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- Tunel白光荧光检测
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- 2025年07月15日
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- 提供商：
上海经科化学科技有限公司
- 服务名称：
Tunel白光荧光检测
- 规格：
张
Tunel（白光）检测实验服务
Tunel（荧光）检测实验服务
细胞凋亡中染色体DNA的断裂是个渐进的分阶段的过程，染色体DNA首先在内源性的核酸水解酶的作用下降解为50-300kb的大片段。然后大约30 ﹪的染色体DNA在Ca2+和Mg2+依赖的核酸内切酶作用下，在核小体单位之间被随机切断，形成180～200bp核小体DNA多聚体。DNA双链断裂或只要一条链上出现缺口而产生的一系列DNA的3'-OH末端可在脱氧核糖核苷酸末端转移酶（TdT）的作用下，将脱氧核糖核苷酸和荧光素、过氧化物酶、碱性磷酸化酶或生物素形成的衍生物标记到DNA的3'-末端，从而可进行凋亡细胞的检测，这类方法一般称为脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法（TUNEL）。
石蜡切片tunel实验步骤
1、 石蜡切片脱蜡至水：依次将切片放入二甲苯Ⅰ15min-二甲苯Ⅱ15min-无水乙醇Ⅰ5min-无水乙醇Ⅱ5min-85%酒精5min-75%酒精5min-蒸馏水洗。
2、 修复：切片稍甩干后用组化笔在组织周围画圈（防止液体流走），在圈内滴加蛋白酶K工作液覆盖组织，37度温箱孵育30min。将玻片置于PBS（PH7.4）中在脱色摇床上晃动洗涤3次，每次5min。
3、 破膜：切片稍甩干后在圈内滴加破膜工作液覆盖组织，常温下孵育20min，将玻片置于PBS（PH7.4）中在脱色摇床上晃动洗涤3次，每次5min。
4、 加试剂1,2：按片子数量和组织大小取tunel试剂盒内适量试剂1 (TdT) 和试剂2(dUTP)按2:29混合，加到圈内覆盖组织，切片平放于湿盒内，37℃水浴锅孵育2小时，湿盒内加少量水保持湿度。
5、 DAPI复染细胞核：切片用PBS（PH7.4）洗涤3次，每次5min。去除PBS后在圈内滴 加DAPI染液，避光室温孵育10min。
6、封片：玻片置于PBS（PH7.4）中在脱色摇床上晃动洗涤3次，每次5min。切片稍甩干后用抗荧光淬灭封片剂封片。
7、 镜检拍照：切片于尼康倒置荧光显微镜下观察并采集图像。
分子病理实验服务
IF/免疫荧光检测-IHC/免疫组化检测-Tunel检测-ISH/原位杂交检测-Confocal/共聚焦：
免疫荧光（单标）实验服务
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免疫荧光（单标，芯片）实验服务
免疫荧光（双标，芯片）实验服务
尼罗红染色（含荧光拍照）实验服务
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Tunel（白光）检测实验服务
Tunel（荧光）检测实验服务
原位杂交（DAB显色、NBT显色）实验服务
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原位杂交白光实验服务
活细胞成像实验服务
激光共聚焦拍照实验服务
3D成像实验服务
本公司还提供以下实验方面服务
“病理学”、“分子生物学”、“细胞生物学”、“图像分析”
“免疫学”、“动物实验”、“蛋白质相关”、
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文献和实验的谱线范围各有差异，如何进行配置合适的荧光显微镜以获得最佳的荧光检测效果成为一个较为复杂的问题。广州科适特科学仪器有限公司一直致力于为客户提供定制化的荧光显微镜成像系统，根据客户的反馈和我们自身的工作实践简单总结一下如何选择合适的光源以获得优质的荧光效果。一、荧光显微镜简要原理荧光显微镜的基本构造通常由普通光学显微镜再加一些如荧光光源 、激发滤片、双色束分离器及阻断滤片等附件的基础上组成。同时采用的荧光光源一般为超高压汞灯，它可发出各种波长的光，且每种荧光物质都会有一个产生最强荧光的激
，但是对组织切片是无法检测的，但是对还没做成组织切片的石蜡标本可以制成单细胞悬液来进行流式检测，但是过程比较复杂，不好制备，因此，不提倡用。因此，检测石蜡包埋的组织切片最好的办法还是TUNEL法，还可以结合HE染色观察调亡细胞形态学改变，再结合免疫组化检测Fas、Bcl-2等调亡基因的蛋白表达来解释其调亡机理，已经足够了， tjbone：采用免疫荧光检测Fas、Bcl-2等凋亡的细胞也是可行的方法。 DEVELOPING A NEW METHOD FOR DETECTING ISLET
Annexin V凋亡流式双染与Tunel凋亡免疫组化案例介绍
说明； 4. TUNEL试剂盒的购买：事先咨询嘉美生物，明确是否有该抗体可使用，如无则由双方协商公司代购。 标本收集、保存、运输 1. 组织标本：事先应以10%的福尔马林或4%的多聚甲醛固定（后者同时适合免疫荧光检测）； 2. 细胞检测：由实验室负责准备检测样本，实验委托者提供细胞或实验室负责提供细胞； 3. 样本运输：样本密封完毕，建议以塑料瓶装好标本寄送以免路途损坏；如寄送切片则选择纸盒包装完好，周围加以泡沫或纸巾填塞以免路途损坏，常温寄送即可。 Annexin
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