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上海经科化学科技有限公司
- 服务名称:
油红O(切片)染色实验服务
- 规格:
张
油红O(切片)染色实验服务
一、实验器材及试剂
1、 实验器材
冰冻切片机、切片刀、载玻片
1、新鲜冰冻切片固定:将冰冻切片复温干燥,固定液中固定15min,自来水洗,晾干。
2、油红染色:切片入油红染液浸染8-10min(加盖避光),蒸馏水洗;
3、背景分化:75%酒精稍分化,蒸馏水洗。
4、苏木素染色:切片入苏木素染液染3-5min,自来水洗,分化液分化,自来水洗,返蓝液返蓝,流水冲洗。
5、封片:甘油明胶封片剂封片。
6、显微镜镜检,图像采集分析。
三、结果判读:
脂滴呈橘红色至鲜红色,细胞核蓝色。
四、注意事项:
1、如果是新鲜组织冰冻切片,需要先固定再染色;如果组织是固定以后冰冻切片,可以将
切片晾干以后,直接染色。
2、整个操作过程中注意动作轻缓,不宜动作太大,以免脂肪丢失或者移位。
3、染色结果不能长期保存,封片后应尽快观察及拍照。
4、甘油明胶常温下为凝固状,一般60℃烤箱中保存。封片后如有气泡不能按压玻片也不宜
强行扯下盖玻片,玻片可入温水中,让盖玻片自行脱落,然后重新封片,以防脂肪移位。
普通病理--染色服务:
番红-固绿染色(植物)实验服务
番红-固绿染色(软骨)实验服务
masson染色实验服务
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PAS糖原染色实验服务
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锇酸染色实验服务
高尔基染色(含多层染色)实验服务
维多利亚兰染色实验服务
本公司还提供以下实验方面服务
“病理学”、“分子生物学”、“细胞生物学”、“图像分析”
“免疫学”、“动物实验”、“蛋白质相关”、
实验要求、样本情况、收费标准、操作流程等详情请咨询我司客服!
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文献和实验油红 O属于偶氮染料,是很强的脂溶剂和染脂剂,与甘油三酯结合呈小脂滴状。脂溶性染料能溶于组织和细胞中的脂类,它在脂类中的溶解度比在溶剂中大。当组织切片置人染液时,染料则离开染液而溶于组织内的脂质(如脂滴)中,使组织内的脂滴呈橘红色。 一、油红O染液的配制 1.油红O 1g 异丙醇 100ml 2.油红O 足量 异丙醇 100ml 配成油红O饱和溶液,使用时以油红O饱和液一份加蒸馏水两份,过滤后使用。 二、染色程序 1.切片用甲醛―钙
组织切片的免疫酶标抗体染色法 1)4%多聚甲醛固定的组织置15%~20%蔗糖PBS中漂洗,4℃过夜或组织块下沉至 杯底; 2)制作30~40um厚的振动切片或冰冻切片,PBS漂洗; 3)2%H2O2甲醇处理,室温20分钟,封闭内源性过氧化物酶活性; 4)1%BSA室温孵育15分钟; 5)第一抗体4℃孵育12~24小时,PBS漂洗; 6)HRP或生物素标记的第二抗体室温孵育30―60分钟,如系生物素标记的第二抗体,反应后则需进一步按ABC法要求操作
无论是在教学科研中,还是在病理诊断领域,病理切片染色是不可缺少的环节。其规范操作流程包括取材、固定、脱水、包埋、切片、染色、结果分析等,每个步骤都有各自的难点和注意事项。本次讲座主要涉及组织预处理方法和注意事项,以及石蜡切片的免疫组织化学染色技术的原理、操作流程和结果分析等经验分享。
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