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    TG1 电转化感受态细胞

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    TG1 电转化感受态细胞

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      • 货号:

        CM-6033K

      • 供应商:

        上海淳麦

      • 数量:

        1000只

      • 英文名:

        TG1 电转化Chemically Competent Cell

      • 保质期:

        1年

      • 保存条件:

        零下80度

      • 规格:

        20*100ul

       

      TG1 Electroporation-Competent Cell

      TG1 电击感受态细胞基因组:
      [F´  traD36 proAB lacIqZ M15] supE thi-1    (lac-proAB)    (mcrB-hsdSM)5(r –m –)
      K    K
      TG1 电击感受态细胞简要说明:

      TG1 电击感受态细胞只能用于电击转化,不能用于热激转化。TG1 来源于 E.coliK-12 菌株,是目前生 长 速度最快的克隆用大肠杆菌菌株,在平板上 37℃,7 h 可见克隆。主要的噬菌体展示用菌株,同时也 可用 于普通质粒的构建,lacIqZ M15 的存在使其可以用于蓝白斑筛选等实验;但不含核酸酶 endA1 突 变,体 内核酸酶含量较高,提取质粒时推荐使用质粒提取试剂盒中去蛋白液以去除菌体内大量的核酸酶。
      -CMbio-TG1 电击感受态细胞适用于噬菌体展示文库的构建,经特殊工艺制作,pUC19 质粒检测转化 效率>0.5× 1010 cfu/μg DNA。-CMbio-
      TG1 电击感受态细胞操作说明:
      1. 0.1 cm 电击杯和杯盖从储存液中拿出倒置于干净的吸水纸上 5 分钟,待其沥干水分,正置 5   分钟,使乙

      醇充分挥发,待乙醇挥发干净立即插入冰中,压实冰面,电极杯顶离冰面 0.5 cm 以方便盖上杯盖,冰中 静 置 5 分钟充分降温。-CMbio-
      2. 取-80℃保存的 TG1 电击感受态细胞插入冰中 5 分钟,待其融化,加入目的 DNA (质粒或连接产物) 并用手拨打 EP 管底轻轻混匀,避免产生气泡,立即插入冰中。-CMbio-
      A.  测定转化效率使用  1 μl 10 pg/μl 的对照质粒 pUC19;-CMbio-
      B. 对于连接产物,请用乙醇沉淀 DNA 后加入适量 TE 缓冲液 (10 mM Tris HCl, pH7.5; 1 mM EDTA)重悬, DNA 浓度不超过 100 ng/μl,体积不超过 5 μl/50 μl    感受态。-CMbio-
      3. 用 200 μl 枪头(用刀切除 0.5cm  枪尖)将感受态-DNA   混合物快速移到电击杯中,避免产生气泡,盖上杯盖。

      4. 启动电转仪,设置参数:C=25 μF,PC=200 Ω,V=1.8 kV (此为 BioRad 电转仪推荐参数,也可按所用 电转仪推荐的参数操作),将电击杯快速放入电转槽中,电击完成快速插入冰中。-CMbio-
      5. 2 分钟后从冰中取出电击杯,放室温,加入 1ml 不含抗生素的无菌 S.O.C. 培养基(室温),用 1ml 枪 吹吸电击杯底部数次混匀后,转移到 50 ml 离心管(BD Falcon 50 ml 锥形离心管等),向离心管中 补 加 S.O.C. 培养基至  10 ml。倾斜 45 度放入摇床,37℃,225 rpm 复苏 60    分钟。-CMbio-
      6. 5000 rpm 离心一分钟收菌,重悬后取 100-200 μl 涂布到含相应抗生素的 S.O.C 平板上(因菌量较大, 若全部涂板请选用直径 15cm 培养皿 2-5 个)。将平板倒置放于 37℃培养箱过夜培养 13-17     小时。

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        上海淳麦生物科技有限公司专注于感受态细胞、质粒、载体、农杆菌、酵母等生命科学领域的产品研发和技术服务支持。 
      上海淳麦生物科技有限公司在感受态细胞的研发方面,实力雄厚,拥有了克隆、表达、酵母和农杆菌4大类,共计百余种感受态细胞。在电击感受态方面,拥有了大肠杆菌和农杆菌电击感受态种类,极大提高了客户在转基因以及文库构建方面的成功率。 



       

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    • 联系人:

      陈俊

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      上海市新骏环路588号浦江高科技园区25号楼

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      细胞库 / 细胞培养,ELISA 试剂盒,试剂,抗体

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