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嵘崴达
- 英文名:
Fluorescein-12-UTP
- 规格:
25 μL
荧光素-12-UTP
≥85% (HPLC), solution
别名:
荧光素-5 (6)-甲酰胺甲酰-(5-[3-氨基烯丙基] 尿苷 5'-三磷酸盐), 荧光素-12-UTP 四锂盐
Empirical Formula (Hill Notation):
C39H41N4O22P3
一般描述
质量
典型分析:至少 85% 荧光素-12-UTP(HPLC,区域 %)。
荧光素通过酰胺键与尿苷三磷酸结合。分子式为 C39H37N4O22P3Li4。
应用
荧光素-12-UTP 用作 SP6、T3 和 T7 RNA 聚合酶的底物。在 体外 转录反应中可替代 UTP 用于 RNA 标记。
标记的 RNA 随后可通过 原位杂交 和直接荧光检测或使用抗荧光素-AP、Fab 片段或抗荧光素-POD、Fab 片段的 ELISA 检测。
罗氏试剂
| 11427857910 | Fluorescein-12-uridine-5¦-trip,荧光素- 12 -尿苷5 |
| 11333089001 | Anti-Digoxigenin, Sheep |
| 11467140001 | DNA, MB-Grade,罗氏试剂 |
| 11008412001 | Klenow Enzyme, Labeling Grade,,Klenow酶 |
| 11209272001 | Nylon Membranes, 10 sheets,尼龙膜,10张 |
| 11417240001 | Nylon Membranes, 1 roll,尼龙膜,1卷 |
| 11498045910 | Actin RNA Probe,DIG 2ug,肌动蛋白RNA探针,DIG2ug |
| 12041677001 | CDP-Star, ready-to-use,化学发光底物 |
| 3333574001 | Terminal Transferase, recomb. ,末端转移酶 |
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文献和实验如下四类:直接标记法,加尾标记法,基于逆转录反应的标记方法,基于RNA克隆扩增的标记方法。 常用于RNA标记的方法按标记物性质分为: 放射性同位素标记:32P、35S、3H 非放射性标记:半抗原荧光素化学发光物质 地高辛 地高辛标记RNA常用的方法是将DIG与UTP共价结合形成DIG-UTP,以DIG-UTP、ATP、CTP、GTP为底物通过RNA聚合酶T7、SP6经体外转录合成标记RNA。此法多用于RNA探针的制备,一般每20~25个核苷酸可引入一个地高辛分子
底物中未标记UTP和DIG-11-UTP的比例很重要,因为在使用地高辛抗体进行含DIG的杂交体的检测时,探针上插入的DIG分子需排布在一个合适的空间位阻范围,以利于抗体的顺利结合,并获得高灵敏度的检测信号。 罗氏DIG Northern Starter Kit中提供理想浓度比例的含DIG-11-UTP的核苷酸混合底物。当实验涉及的反义链探针的AU含量很高时,可通过加入未标记dNTPs的方法,适当调低DIG-11-UTP在核苷酸混合底物中的浓度。
和DIG-11-UTP的比例很重要,因为在使用地高辛抗体进行含DIG的杂交体的检测时,探针上插入的DIG分子需排布在一个合适的空间位阻范围,以利于抗体的顺利结合,并获得高灵敏度的检测信号。 罗氏DIG Northern Starter Kit中提供理想浓度比例的含DIG-11-UTP的核苷酸混合底物。当实验涉及的反义链探针的AU含量很高时,可通过加入未标记dNTPs的方法,适当调低DIG-11-UTP在核苷酸混合底物中的浓度。 探针标记分析和灵敏度检测
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