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- 罗氏 10972983001
- 2025年10月28日
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- 英文名：
T4 Gene 32 Protein
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−20°C
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- 规格：
100 μG
T4 基因 32 蛋白
T4 Gene 32 Protein
别名: 基因 32 蛋白，t4
General description
通过研究证实，当反应中包含 0.5～1.0 nmol 的蛋白质时，T4 基因 32 蛋白质可提高长 PCR 产品的产量。T4 基因 32 蛋白也被证实可以增加从含有腐植酸的样本中扩增的 PCR 产物的产量。当 PCR 中包含 T4 基因 32 蛋白时（浓度为 2.5 μg/100μl），腐植酸的抑制作用降低 7 倍。
该蛋白分离自 T4 基因 33、35 和 58-61 缺陷的三突变体 T4amN134/amBL292/amE 219。
Specificity
T4 基因 32 蛋白是由噬菌体 T4 基因组的基因 32 编码的单链特异性、螺旋失稳蛋白。在感染 T4 噬菌体的大肠杆菌细胞中 DNA 的复制和基因重组是必需的。
Application
T4 基因 32 蛋白是一种单链特异性 DNA 结合蛋白。可用于：
• PCR 优化（见下文“产品描述”。）
• 刺激 体外 DNA 合成
• DNA 或 RNA 单链区域的稳定性
• 位点特异性突变实验（用 T4 DNA 聚合酶和 T4 DNA 连接酶）
• 帮助限制酶消化完成
• q-PCR
Quality
无污染物
T4 基因 32 蛋白与作为潜在核酸酶底物的各种核酸共同孵育。结果通过凝胶电泳进行分析。基于这些检测，根据当前质量控制程序，在制备液中未检出以下物质：
• 非特异性外切和内切核酸酶
• 单链 dna 酶（切口活性）
• 单链特异性核酸外切酶
• 核糖核酸酶
Physical form
蛋白溶液，1-10 mg/mL，在储存缓冲液（20 mM Tris-HCl、100 mM NaCl、1 mM EDTA、0.5 mM DTT、50% 甘油 [v/v]，pH 值约 8.0）中
Preparation Note
工作浓度： 1～10 mg/mL
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文献和实验加热灭活酶。通过凝胶提取试剂盒纯化消化的pET-32α（+）载体骨架和从pMD18-T载体切下的基因片段。用T4 DNA连接酶在23℃下用pET-32α（+）载体骨架连接基因片段1小时，载体末端和插入末端的比例为1：3（fmol）。将10μl连接反应与100μl感受态大肠杆菌 BL21（DE3）在冰上混合10分钟，并将混合物在42℃下孵育90秒。加入800μlLB并在37°C下孵育40分钟。涂在含有100μg/ ml氨苄青霉素的LB平板上。在37°C孵育过夜。通过菌落PCR筛选插入物的存在或制备
Labeling oligonucleotides with 32PATP
Mix the following in an eppendorf tube: 1. 0.5 microgram oligonucleotide dissolved in H2 O. 2. 3 microliters 10x kinase buffer. 3. 2 microliters 32 P ATP from ICN (>5000 ci/mmole). 4. H2 O so that the final volume is 30
Labeling oligonucleotides with 32P ATP
Wear gloves throughout and work in radiation area. Monitor area before and after use. Mix the following in an eppendorf tube: 1. 0.5 microgram oligonucleotide dissolved in H2O. 2. 3 microliters 10x kinase buffer. 3. 2 microliters 32 P ATP
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