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- roche
- 罗氏11284932001
- 2025年11月07日
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- 保存条件：
2-8°C
- 英文名：
DNase I
- 供应商：
嵘崴达
- 库存：
需确认
- 规格：
100 mg
DNase I
from bovine pancreas
别名:
Dnase
一般描述
DNase I是一种可降解DNA的双链特异性内切核酸酶。牛胰腺脱氧核糖核酸酶I（DNase I）是DNA小沟相互作用的核酸酶，特异性相对较低。该蛋白质由两个中心β折叠构成，而每个折叠由六个β-链所组成。该结构被大量的环以及α-螺旋区域包围。该酶与核酸外切酶III具有结构相似性。DNase I是研究得最透彻的哺乳动物来源的内切酶之一。
生化/生理作用
在组织解离过程中，部分细胞被裂解并导致DNA的释放。单分子DNA可能会导致细胞结团。向解离缓冲液中加入DNase I会导致该细胞外DNA的降解，因而避免了因意外结团造成的细胞损失。
单位定义
一个单位表示在测定条件下导致吸光度以0.001每分钟的速率而增加的酶活力。
制备说明
激活剂：二价金属离子 (Ca2+, Mg2+)
工作浓度：0.01 至 1 mg/ml
注意：必须针对每种细胞类型单独确定工作浓度。为实现最佳活性，酶须添加 5 mM Mg2+。
重悬
用无菌的双蒸水对冻干酶进行重悬（10 mg/ml）；用PBS（磷酸盐缓冲液）、HBSS（Hank′s 平衡盐溶液）或培养基进行进一步的稀释。
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文献和实验罗氏公司TUNEL细胞凋亡检测程序 （In situ cell death detection kit-POD法） 一、 原理： TUNEL（TdT-mediated dUTP nick end labeling）细胞凋亡检测试剂盒是用来检测组织细胞在凋亡早期过程中细胞核DNA的断裂情况。其原理是荧光素（fluorescein）标记的dUTP在脱氧核糖核苷酸末端转移酶（TdT
citrate，临用前配制）、苏木素或甲基绿、DNase 1（3000 U/ml– 3 U/ml in 50 mM Tris-HCl，pH 7.5， 10 mM MgCl2，1 mg/ml BSA）等。三、 实验步骤操作流程图：制作石蜡切片→脱蜡、水合→细胞通透→加TUNEL反应液→加converter-POD→与底物DAB反应显色→光学显微镜计数并拍照。具体操作步骤：1. 用二甲苯浸洗2次，每次5min；2. 用梯度乙醇（100、95、90、80、70%）各浸洗1次，每次3min；3. PBS漂洗2次
mM Tris/HCL 中，ph7.4-8] 替代处理方案 ※渗透溶液： （0.1%Triton1） X-100，溶于 0.1%柠檬酸 钠的，新鲜配制 ※胃蛋白酶*（0.25%-0.5%，溶于盐酸中，ph2）或胰蛋 白酶*，0.01N HCL，不含核酸酶 ※0.1M 柠檬酸缓冲液，ph6，微波照射 微球菌核酸酶或 设备 试剂 石蜡包埋组织 section3.2.2.1 标记步骤 section3.3 阳性对照 section3.3.1 DNase
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