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Ribonuclease H (RNase H)
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100 UNITS
核糖核酸酶 H (RNase H)
from Escherichia coli H 560 pol A1
别名:
RNA酶H
一般描述
非(序列)专一性核糖核酸内切酶,可特异性地水解RNA:DNA杂合链中的RNA链。需要至少4个连续碱基对(RNA:DNA)才能发挥酶活性。RNase H可切割RNA释放出5′-寡聚核糖核苷酸。
来源:大肠杆菌H560 pol A1
存储液:25 mM Tris-HCl,50 mM KCl,1 mM 二硫苏糖醇,0.1 mM EDTA,50% 甘油 (v/v),pH 8.0 (+ 4°C)
单位体积活力:1 x 103 U/ml,按照Hillenbrand & Staudenbauer法分析。
核糖核酸酶H(RNA酶H)是一种位于细胞核与细胞质中的非特异性核糖核酸内切酶,。它普遍存在并广泛分布于病毒和人类等多种生物中。
应用
核糖核酸酶 H (RNase H) 已用于:
- 体内 RNA 引发的 DNA 合成初始化
- 第二链 cDNA 合成过程中 mRNA 消除
- RNA 的位点特异性切割
- 检测天然来源的双链DNA中的RNA:DNA区域
- 如果存在 oligo (dT),则去除 mRNA 的 poly (A) 序列
- RNA提取和定量逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)
生化/生理作用
核糖核酸酶H(RNA酶H)特异性剪切RNA:DNA杂交体中的RNA。需要至少4个连续碱基对(RNA:DNA)才能发挥酶活性。RNase H可切割RNA释放出5′-寡核糖核苷酸。RNase H与核酸免疫有关。用RNase H降解mRNA,可消去80%的mRNA和蛋白表达。RNase H识别起始密码子和3′和5′端未翻译区。该酶参与DNA复制。
特点和优势
- 消除潜在的PCR误差来源。
- 在后续PCR过程中增加引物的可结合性。
质量
无核酸内切酶、核糖核酸酶和切割活性。
单位定义
RNase H活性已按照Hillenbrand与Staudenbauer方法进行分析。一单位RNase H的定义为,在+37 °C的标准分析下,通过[3H] poly(A) x poly(dT) 在20分钟时间内生成1 nmol酸性可溶核糖核苷酸所需的酶量。
体积活性:约1 U/μl
制备说明
激活剂:此酶在巯基试剂存在的条件下拥有最高活性
储存及稳定性
-15–-25 °C下储存(未开封)
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文献和实验缩写为 RNase H。为分解与 DNA链形成双链的 RNA的核酸酶,从细菌到高等动物广泛存在。 RNA肿瘤病毒 的依赖 RNA的 DNA聚合酶,也具有核糖核酸酶 H的活性。细胞中的 RNase H,一般为核酸内切酶,而 Retro病毒粒子的 RNase,为核酸外切酶。都是将 RNA分解为在 5′端有磷酸基的低〔聚〕核苷酸或单核苷酸。 RNase H参与大肠杆菌素 E1质粒等 DNA复制的起始过程。
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