核糖核酸酶 H (RNase H)/Ribonuclease

核糖核酸酶 H (RNase H)

from Escherichia coli H 560 pol A1

别名:
RNA酶H

一般描述

非（序列）专一性核糖核酸内切酶，可特异性地水解RNA:DNA杂合链中的RNA链。需要至少4个连续碱基对(RNA:DNA)才能发挥酶活性。RNase H可切割RNA释放出5′-寡聚核糖核苷酸。

来源：大肠杆菌H560 pol A1
存储液：25 mM Tris-HCl，50 mM KCl，1 mM 二硫苏糖醇，0.1 mM EDTA，50% 甘油 (v/v)，pH 8.0 (+ 4°C)
单位体积活力：1 x 103 U/ml，按照Hillenbrand & Staudenbauer法分析。
核糖核酸酶H（RNA酶H）是一种位于细胞核与细胞质中的非特异性核糖核酸内切酶，。它普遍存在并广泛分布于病毒和人类等多种生物中。

应用

核糖核酸酶 H (RNase H) 已用于：

• 体内 RNA 引发的 DNA 合成初始化
• 第二链 cDNA 合成过程中 mRNA 消除
• RNA 的位点特异性切割
• 检测天然来源的双链DNA中的RNA:DNA区域
• 如果存在 oligo (dT)，则去除 mRNA 的 poly (A) 序列
• RNA提取和定量逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)

生化/生理作用

核糖核酸酶H（RNA酶H）特异性剪切RNA:DNA杂交体中的RNA。需要至少4个连续碱基对(RNA:DNA)才能发挥酶活性。RNase H可切割RNA释放出5′-寡核糖核苷酸。RNase H与核酸免疫有关。用RNase H降解mRNA，可消去80%的mRNA和蛋白表达。RNase H识别起始密码子和3′和5′端未翻译区。该酶参与DNA复制。

特点和优势

• 消除潜在的PCR误差来源。
• 在后续PCR过程中增加引物的可结合性。

质量

无核酸内切酶、核糖核酸酶和切割活性。

单位定义

RNase H活性已按照Hillenbrand与Staudenbauer方法进行分析。一单位RNase H的定义为，在+37 °C的标准分析下，通过[³H] poly(A) x poly(dT) 在20分钟时间内生成1 nmol酸性可溶核糖核苷酸所需的酶量。

体积活性：约1 U/μl

制备说明

激活剂：此酶在巯基试剂存在的条件下拥有最高活性

储存及稳定性

-15–-25 °C下储存（未开封）