PMSF Phenylmethylsulfonyl fluo

PMSF

Phenylmethylsulfonyl fluoride

Specificity

可抑制丝氨酸蛋白酶，如胰凝乳蛋白酶、胰蛋白酶、凝血酶和半胱氨酸蛋白酶木瓜蛋白酶（通过DTT处理可逆）。不抑制金属蛋白酶、大多数的半胱氨酸蛋白酶或天冬氨酸蛋白酶。

Application

PMSF（C7H7O2SF）可抑制丝氨酸蛋白酶，如胰凝乳蛋白酶、胰蛋白酶、凝血酶和半胱氨酸蛋白酶木瓜蛋白酶（通过DTT处理可逆）。它不抑制金属蛋白酶、大多数的半胱氨酸蛋白酶或天冬氨酸蛋白酶。
PMSF 已用于在进行Western blotting之前从组织和细胞中制备蛋白质提取物。

Biochem/physiol Actions

PMSF 可作为多种蛋白酶和其他酶的非特异性抑制剂，如棕榈酰辅酶A脱酰酶、芳基硫酸酯酶A、乙酰胆碱酯酶、胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶。它是一种不可逆的抑制剂，且丝氨酸残基的磺酰化羟基存在于酶的活性位点中。

Quality

纯度：色谱均相的

Preparation Note

激活剂：PK需要Mg²⁺ (o或Mn²⁺, CO²⁺)以及K⁺ (或NH⁴⁺, Rb⁺)以实现完全的活性。
工作浓度：17至170 μg/ml (0.1至1 mM)
工作溶液：由于PMSF的短半衰期，必须在每一步的纯化步骤中加入新鲜的溶液。在某些特定条件如碱性pH值下，PMSF的半衰期可能只有35分钟。常用于沉淀蛋白的高盐条件（3M）可能也会逆转PMSF的抑制。Pefabloc SC被推荐作为一种无毒、水溶性且水稳定的替代品。
储存条件（工作溶液）：15至25 °C
在15至25 °C的100%异丙醇中的PMSF储备溶液可稳定至少9个月。