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嵘崴达
- 英文名:
PMSF Phenylmethylsulfonyl fluoride
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- 规格:
25 G
PMSF
Phenylmethylsulfonyl fluoride
| packaging | pkg of 10 g (10837091001) |
| pkg of 25 g (11359061001) |
Specificity
可抑制丝氨酸蛋白酶,如胰凝乳蛋白酶、胰蛋白酶、凝血酶和半胱氨酸蛋白酶木瓜蛋白酶(通过DTT处理可逆)。不抑制金属蛋白酶、大多数的半胱氨酸蛋白酶或天冬氨酸蛋白酶。
Application
PMSF(C7H7O2SF)可抑制丝氨酸蛋白酶,如胰凝乳蛋白酶、胰蛋白酶、凝血酶和半胱氨酸蛋白酶木瓜蛋白酶(通过DTT处理可逆)。它不抑制金属蛋白酶、大多数的半胱氨酸蛋白酶或天冬氨酸蛋白酶。
PMSF 已用于在进行Western blotting之前从组织和细胞中制备蛋白质提取物。
Biochem/physiol Actions
PMSF 可作为多种蛋白酶和其他酶的非特异性抑制剂,如棕榈酰辅酶A脱酰酶、芳基硫酸酯酶A、乙酰胆碱酯酶、胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶。它是一种不可逆的抑制剂,且丝氨酸残基的磺酰化羟基存在于酶的活性位点中。
Quality
纯度:色谱均相的
Preparation Note
激活剂:PK需要Mg2+ (o或Mn2+, CO2+)以及K+ (或NH4+, Rb+)以实现完全的活性。
工作浓度:17至170 μg/ml (0.1至1 mM)
工作溶液:由于PMSF的短半衰期,必须在每一步的纯化步骤中加入新鲜的溶液。在某些特定条件如碱性pH值下,PMSF的半衰期可能只有35分钟。常用于沉淀蛋白的高盐条件(3M)可能也会逆转PMSF的抑制。Pefabloc SC被推荐作为一种无毒、水溶性且水稳定的替代品。
储存条件(工作溶液):15至25 °C
在15至25 °C的100%异丙醇中的PMSF储备溶液可稳定至少9个月。
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文献和实验Preparation of cell lysates from E. coli by enzymatic lysis
(phenylmethylsulfonyl fluoride)in isopropanol 1M MgCl2Procedure1.Resuspend the cells in chilled lysis buffer in a ratio of 1 g cell wet weight to 1 ml lysis buffer.Add the PMSF (10 µl PMSF (100 mM)per ml of celsuspension)at this point.2.Add lysosyme to a final
是去垢的作用; PMSF PMSF即Phenylmethanesulfonyl fluoride,也称Phenylmethylsulfonyl fluoride或α-Toluenesulfonyl fluoride。中文名为苯甲基磺酰氟。分子式为C7H7FO2S,分子量为174.19。可抑制丝氨酸蛋白酶例如胰蛋白酶(trypsin)和胰凝乳蛋白酶(chymotrypsin),也可抑制半胱氨酸蛋白酶和乙酰胆碱酯酶。有效浓度为0.1-1mM。难溶于水,且在水溶液中非常不稳
(TEB: PBS containing 0.5% Triton X 100 (v/v), 2 mM phenylmethylsulfonyl fluoride (PMSF), 0.02% (w/v) NaN3 ) at a cell density of 107 cells per ml. 3. Lyse cells on ice for 10 minutes with gentle stirring. 4. Centrifuge at 6,500 x g for 10
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