北京现货SuperSYBR Mixture(高含量ROX校正

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博专业生产销*(代"售")北京现货SuperSYBR Mixture(高含量ROX校正染料)促销，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：北京现货SuperSYBR Mixture(高含量ROX校正染料)促销
品牌：百奥莱博
产地：国产|进口
英*(代"文")名：SuperSYBR Mixture(High ROX)
  本品是专用于染料法(SYBR Green I)实时荧光定量PCR的预混体系，浓度为2×，包含BaldStar Taq DNA Polymerase、PCR Buffer、dNTPs、SYBR Green I荧光染料、Mg2+和ROX II校正染料，操作简单方便。主要用于基因组DNA靶序列和RNA反转录后cDNA靶序列的检测。
  本品所含的荧光染料SYBR Green I可以与所有的双链DNA结合，使该产品可用于不同靶序列的检测而不需合成特异性标记探针。本品含有的BaldStar Taq DNA Polymerase是一种经化学修饰的、全新高效热启动酶，在常温下没有聚合酶活性，有效避免在常温条件下由引物和模板非特异性结合或引物二聚体而产生的非特异性扩增，酶的激活须在95℃下孵育10分钟。独特的PCR缓冲体系与热启动酶的组合，有效抑制了非特异性的PCR扩增，显著提高了PCR的扩增效率。
  所含的ROX染料可校正定量PCR仪孔与孔之间产生的荧光信号误差，本试剂盒中ROX校正染料含量较高，适用于ABI Prism7000/7300/7700/7900，Eppendorf，ABI Step One/Step One Plus等需要较高ROX信号进行校正的荧光定量PCR仪 。

试剂盒组成：

 

组份	1ml	5ml
2×SuperSYBR Mixture(High ROX)	1ml	5×1ml
ddH2O	1ml	5×1ml

产品特点
1、本产品中使用了全新高效热启动酶BaldStar Taq DNA Polymerase与独特的PCR缓冲体系，显著提高PCR的扩增效率，具有高灵敏度和特异性强的特点。
2、适用于荧光定量PCR检测，能够准确地对目的基因进行定量和检测。

注意事项：
1、使用前请上下颠倒轻轻混匀，尽量避免起泡，并经短暂离心后使用。
2、本产品中含有SYBR Green I荧光染料和ROX染料，保存本产品或配制PCR反应液时应避免强光照射。
3、避免反复冻融本品，反复冻融可能使产品性能下降。
4、本品不能用于探针法荧光定量PCR。
5、配制反应液时，请使用新的或者无污染的枪头和离心管，尽量防止污染。

操作步骤：
以下举例为常规PCR反应体系和反应条件，实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。

1、PCR反应体系

试剂	50μl反应体系	终浓度
2×SuperSYBR Mixture(High ROX)	2 5μl	1×
Forward Primer，10μM	1μl	0.2μM
Reverse Primer，10μM	1μl	0.2μM
Template DNA	2μl
ddH2O	up to 50μl

注意：
1)通常引物浓度以0.2μM可得到较好结果，可以终浓度0.1-1.0μM作为设定范围的参考。
2)通常DNA模板的量以10-100ng基因组DNA或1-10ng cDNA为参照，因不同物种的模板中含有的目的基因拷贝数不同，可对模板进行梯度稀释，以确定最佳的模板使用量。
3)推荐反应体系为50μl，也可以根据实际实验需求按比例扩大或者缩小反应体系。

2、PCR反应程序：
注意！本产品预变性反应必须在95℃ 10分钟下完成！

建议采用下表显示的两步法PCR进行程序设定，本程序是以ABI7500荧光定量PCR仪为例。若因Tm值较低的引物等原因，得不到良好的实验结果时，可尝试进行三步法PCR 扩增，三步法操作步骤详见《反应条件的优化》。
 

步骤	温度	时间	循环数
预变性	95℃	10 min
变性	95℃	15 s	35-40 个循环
退火/延伸	60℃	1 min
融解曲线分析	95℃	15 s
	60℃	1 min
	95℃	15 s
	60℃	15 s

注意：
1)本产品所采用的热启动酶须在预变性95℃、10 min条件下实现酶的活化。
2)退火温度请以60-64℃作为设定范围的参考，发生非特异性反应时，可提高退火温度。
3)本程序是以ABI 7900荧光定量PCR仪为参照设定，融解曲线分析请以所使用的荧光定量PCR仪推荐的程序进行设定。

反应条件的优化：
在荧光定量反应条件优化时，应从引物浓度、退火温度、延伸时间等方面进行考虑，以提高反应特异性和扩增效率。
1、反应特异性和扩增效率高的实验体系应具备以下条件：
1)反应特异性高：阴性对照无引物二聚体等非特异性扩增；不产生目的片段以外扩增。
2)扩增效率高：Ct值低；PCR扩增效率高，接近理论值100%。
2、反应条件优化方法：
1)引物浓度：通常引物浓度以0.2μM可得到较好结果，可以终浓度0.1-1.0μM作为设定范围的参考。若提高反应特异性，可降低引物浓度；若提高扩增效率，可增加引物的浓度，由此优化反应体系。
2)退火温度：建议采用两步法PCR，退火温度60℃进行反应。若提高反应特异性，可提高退火温度，以60-64℃作为设定范围的参考。若因使用Tm值较低的引物等原因，得不到良好的实验结果时，可尝试进行三步法PCR扩增，三步法的退火温度请以56℃-64℃的范围作为设定参考。
3)延伸时间：建议采用两步法PCR，延伸时间1 min进行反应。若提高扩增效率，可尝试将延伸时间增加，或尝试三步法PCR。
注意！本产品预变性反应必须在95℃ 10分钟下完成！

三步法荧光定量PCR(本程序是以ABI7900荧光定量PCR仪为例)：
 

步骤	温度	时间	循环数
预变性	95℃	10 min
变性	95℃	10 s	35-40个循环
退火	56-64℃	30s
延伸	72℃	32s
融解曲线分析	95℃	15s
	60℃	1 min
	95℃	15 s
	60℃	15 s

注意：
1)本产品所采用的热启动酶须在预变性95℃、10 min条件下实现酶的活化。
2)无法得到理想的扩增效率时，适当降低退火温度；发生非特异性反应时，提高退火温度。
3)若需提高反应扩增效率，可适当增加延伸时间。
4)本程序是以ABI 7900荧光定量PCR仪为参照设定，融解曲线分析请以所使用的荧光定量PCR仪推荐的程序进行设定。

储存条件：-20℃，避免反复冻融

北京现货SuperSYBR Mixture(高含量ROX校正染料)促销极具性价比，此外，我公司正火爆促销以下产品：

·人基因组DNA定量试剂盒
编号：WE0230
英*(代"文")名称：Human Genomic DNA Quantification Kit
规格：1ml|5ml
  本产品是采用探针法进行实时荧光定量PCR(qPCR)，实现对从各种样品(石蜡样本、流式分选的细胞、血清或血浆样本及少量临床样本等)中抽提的DNA进行浓度和质量的准确检测。产品提供了qPCR过程中所需的全*(代"套")试剂，包括反应混合液，引物混合物，标准品，只需添加提取好的DNA即可开始实验，操作简单方便、省时省力。反应混合物使用了高效、快速的热启动BaldStar Taq DNA Polymerase，扩增灵敏度高，特异性好，缩短了程序反应的时间。
  ROX染料用于校正定量PCR仪孔与孔之间产生的荧光信号误差，一般用于ABI、Stratagene等公司的Real Time PCR 扩增仪。不同仪器的激发光学系统有所不同，因此ROX染料的浓度必须与相应的荧光定量PCR仪相匹配。
  不需要ROX校正的仪器：Roche LightCycler 480，Roche LightCyler 96，Bio-radiCyler iQ，iQ5，CFX96等。
  需要Low ROX校正的仪器：ABI Prism7500/7500 Fast，QuantStudio® 3 System，QuantStudio® 5 System， QuantStudio® 6 Flex System，QuantStudio® 7 Flex System，ViiA 7 system， Stratagene Mx3000/Mx3005P，Corbett Rotor Gene 3000等。
  需要High ROX校正的仪器：ABI Prism7000/7300/7700/7900，Eppendorf，ABI Step One/Step One Plus等。


北京现货SuperSYBR Mixture(高含量ROX校正染料)促销关键词：SuperSYBR Mixture(高含量ROX校正染料),SuperSYBR Mixture(High ROX),WE0135


·磁珠法唾液DNA提取试剂盒
编号：WE0207
英*(代"文")名称：Magbead Saliva DNA Extraction Kit
规格：96次
  本试剂盒提供了一种简单、快速、高效的唾液DNA提取方法，适用于从在保护液 中保存的唾液中提取DNA。在高盐存在时，DNA结合于硅基包被的Magbeads表面。 漂洗后，高纯度的DNA被洗脱于Buffer EB或去离子水中。DNA的得率与样品中细胞数 量，储存条件、时间有很大关系。纯化得到的DNA纯度好(A260/280在1.7-1.9之间， A260/230大于1.5)，完整度高(大于15 kb)，可用于二代测序、芯片检测、PCR检测等下游实验。

试剂盒组成：

组份	96次
Buffer ML	24ml
Buffer GW1(浓缩液)	80ml
Buffer GW2(浓缩液)	50ml
Buffer MW3	96ml
Buffer EB	30ml
蛋白酶K	2×25mg
蛋白酶K 储存液	2×1.25ml
Magbeads PN	1ml

自备仪器及试剂：

1、手动单管操提取：
1)恒温混匀仪
2)2/15ml磁力架
3)异丙醇、无水乙醇

2、手动96孔深孔板提取：
1)恒温混匀仪
2)废液抽吸系统
3)手动连续分液器
4)电动连续分液器
5)手动连续分液器分液管(25ml)
6)96孔深孔板磁力架
7)异丙醇、无水乙醇

实验前准备及重要注意事项/strong>：
1、向蛋白酶K 中加入指定用量(1.25ml/25mg)的蛋白酶K 储存液使其溶解，-20℃保存。配置好的蛋白酶K 勿长时间室温放置，避免反复冻融，以免影响其活性。
2、Magbeads严禁冰冻、高速离心。冰冻和高速离心可能会对Magbeads造成不可逆的损害。
3、第一次使用前应按照试剂瓶标签在Buffer GW1和Buffer GW2中加入无水乙醇并做好标记。
4、如Buffer ML中出现沉淀，请在56℃水浴锅中重新溶解，摇匀后即可使用。
5、实验过程中，磁珠在溶液中的充分混匀对提取的得率与纯度都有很大的影响。实验过程中务必使磁珠与溶液充分混匀。不同厂家生产的恒温混匀仪效果有一定差异，实验过程中请注意观察磁珠状态。如出现磁珠贴壁等未充分混匀的现象，请用移液器吹吸混匀或调整震荡频率。

操作步骤：

一、手动单管操作：
1、转移400μl唾液与保护剂的混合溶液至1.5ml离心管中，然后16000×g离心1分钟。
2、将离心管从离心机中取出，转移300μl上清液至新的1.5ml离心管中，之后向新的离心管加入20μl 蛋白酶K 和200μl Buffer ML。涡旋震荡混匀后，将新离心管放入56℃水浴锅中孵育1小时。此时可弃去旧离心管。
3、将离心管从水浴锅中取出，室温放置5分钟后短暂离心使溶液回流于离心管底部。向离心管中加入310μl充分混匀的异丙醇(300μl)与Magbeads(10μl)混合物，涡旋震荡5秒钟后立即放于25℃、1600 rpm的恒温混合仪上震荡混匀5分钟。
4、将离心管放于磁力架上静置1分钟，待Magbeads吸附于离心管侧壁后彻底弃去溶液(保持离心管固定于磁力架上)。
5、将离心管从磁力架上取下，加入750μl Buffer GW1(加入前请检查是否已加入无水乙醇)后涡旋点震1分钟或涡旋点震5秒钟后放于25℃、1600 rpm的恒温混合仪上震荡混匀2分钟(震荡过程确保Magbeads处于悬浮混匀状态)。之后将离心管放于磁力架上静置1分钟，待Magbeads吸附于离心管侧壁后轻轻颠倒磁力架将离心管盖上的杂质洗落后充分弃去溶液(保持离心管固定于磁力架上)。
6、重复步骤5。
7、将离心管从磁力架上取下，加入750μl Buffer GW2(加入前请检查是否已加入无水乙醇)后涡旋点震1分钟或涡旋点震5秒钟后放于25℃、1600 rpm的恒温混合仪上震荡混匀2分钟(震荡过程确保Magbeads处于悬浮混匀状态)。之后将离心管放于磁力架上静置1分钟，待Magbeads吸附于离心管侧壁后轻轻颠倒磁力架将离心管盖上的杂质洗落后充分弃去溶液(保持离心管固定于磁力架上)。
8、重复步骤7。
9、选择步骤：
1)保持离心管固定于磁力架上，用移液器去除离心管管底和管盖上的溶液，之后室温放置5-10分钟使乙醇充分挥发干净。如离心管侧壁上有液珠，可向离心管中加入750μl无水乙醇。盖盖后颠倒离心管，之后充分弃去溶液。
2)保持离心管固定于磁力架上，向离心管中加入750μl Buffer MW3，待悬起的磁珠重新吸附于磁力架上后立即充分弃去溶液。
10、将离心管从磁力架上取下，加入50-200μl Buffer EB。涡旋震荡使磁珠充分悬浮于洗脱液中后将其放于56℃、1600 rpm的恒温混合仪上震荡洗脱10分钟，或将离心管在56℃水浴锅中孵育10分钟，期间每隔3分钟涡旋震荡10秒钟。
11、将离心管放于磁力架上静置2分钟，待Magbeads充分吸附于离心管侧壁后用移液器将溶液转移至新的离心管中-20℃保存备用。

二、手动96孔板操作：
1、向2.0ml的96孔深孔板(简称“深孔板”)中加入500μl唾液与保护剂的混合溶液，然后在水平离心机上2000×g离心5分钟。
2、将深孔板从离心机中取出，取300μl上清液至新的深孔板中，之后向新的深孔板中加入20μl 蛋白酶K 和200μl Buffer ML。用硅胶盖将新的深孔板封闭后将其放于恒温混合仪上1500 rpm震荡2分钟，之后将新的深孔板放于56℃水浴锅中孵育1小时。此时可将旧的深孔板弃去。
3、将深孔板从水浴锅中取出，固定于25℃、1500 rpm的恒温混匀仪上震荡5分钟。
4、将深孔板从恒温混匀仪取下，短暂离心后打开硅胶盖。向深孔板中加入310μl充分混匀的异丙醇(300μl)与Magbeads(10μl)混合物，盖上硅胶盖后立即将深孔板固定于25℃、1500 rpm恒温混匀仪上震荡5分钟。
5、将深孔板从恒温混匀仪上取下放于96孔板磁力架上静置2分钟，之后用废液抽吸系统或8通道移液器弃去溶液，期间避免枪头接触磁珠。
6、用手动连续分液器向深孔板中加入500μl Buffer GW1(加入前检查是否已加入无水乙醇)，之后将深孔板固定于25℃、1500 rpm恒温混匀仪上震荡2分钟。
7、将深孔板从恒温混匀仪上取下放于96孔板磁力架上静置2分钟，之后用废液抽吸系统或8通道移液器弃去溶液，期间避免枪头接触磁珠。
8、重复步骤6-7。
9、用手动连续分液器向深孔板中加入500μl Buffer GW2(加入前检查是否已加入无水乙醇)，之后将深孔板固定于25℃、1500 rpm恒温混匀仪上震荡2分钟。
10、将深孔板从恒温混匀仪上取下放于96孔板磁力架上静置2分钟，之后用废液抽吸系统或8通道移液器弃去溶液，期间避免枪头接触磁珠。
11、重复步骤9-10。
12、将深孔板从恒温混匀仪上取下放于96孔板磁力架上静置2分钟，之后用废液抽吸系统或8通道移液器弃去溶液，期间避免枪头接触磁珠。
13、保持深孔板固定于96孔板磁力架上，将深孔板倒置于干净的吸水纸上放置2分钟。之后将深孔板放于100℃(由于深孔板未与加热模块直接接触，管底实际温度在50-60℃之间)的恒温混匀仪上静置5分钟。
14、用电动连续分液器或8通道移液器向深孔板中加入100-200μl Buffer EB，之后将深孔板放于100℃、1500 rpm恒温混匀仪上震荡10分钟。
15、将深孔板从恒温混匀仪上取下放于96孔板磁力架上静置2分钟，用8通道移液器将溶液转移至96孔板板中盖盖后-20℃保存备用。

储存条件：室温(15～30℃)


北京现货SuperSYBR Mixture(高含量ROX校正染料)促销关键词：SuperSYBR Mixture(高含量ROX校正染料),SuperSYBR Mixture(High ROX),WE0135

淀粉酶(AMS)检测试剂盒(碘-淀粉微板法)   200T|500T
9054-8*(代"9")-1 SOD 超氧化物岐化酶(来源牛红细胞)
脱*乙酸 Glycine tert butyl ester hydrochloride 520-45-6
ARB12860 小鼠心肌肌*蛋白I(cTn-I)检测服务 Mouse cardiac troponin i,ctn-i ELISA KIT
26177-56-6 D-果糖-6-磷酸二* D-Fructose 6-phosphate
ARB10157 人Salusin-α 酶标法分析 Human Salusin α ELISA KIT
ARB12922 小鼠白细胞介素6(IL-6)定量分析 Mouse interleukin 6,IL-6 ELISA KIT
ARB10067 人B淋巴细胞刺激因子(Blys)受体Elisa方法检测 Human b lymphocyte stimulator,blys ELISA KIT
3-硝基*(代"*")磺酸* Alcohol dehydrogenase 127-68-4
ARB12926 小鼠半乳糖6硫*(代"酸")酯酶(GAl-6S)ELISA代测服务 Mouse galactose-6-sulphate sulphatase,gal-6s ELISA KIT
ARB10494 人白介素8(IL-8)elisa测定使用说明书 Human interleukin 8,IL-8 ELISA KIT
羟甲基纤维素 VB3
糖原D-PAS染色液(淀粉酶消化法)   5×50ml|5×100ml

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