- ￥129 - 458
- BioTNT
- A2010A012
- 上海
- 2025年07月16日
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- 详细信息
- 技术资料
- 库存：
99
- 供应商：
上海普时如生物有限公司
- 保存条件：
2~8℃
- 规格：
100T/500T
| 规格： | 100T | 产品价格： | ￥129.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 500T | 产品价格： | ￥458.0 |
Realtime PCR PreMIX（高ROX）
（适用高ROX仪器）
本产品货号为 A2010A012和A2010A012X5
产品介绍
本产品由qPCR Premix和独立的ROX 染料，DEPC 水，三个组分组成。
qPCR Premix含有优化浓度的Fast HSTaq DNA Polymerase、SYBR Green I、dNTPs、Mg2+、反应缓冲液和稳定剂等成分。Fast HSTaq DNA Polymerase高温加热前，抗Taq单克隆抗体与Taq结合，抑制Taq的聚合酶活性，从而抑制在低温条件下出现的由引物和模板DNA非特异性杂交或引物二聚体引起的非特异性扩增。抗体在PCR反应的预变性步骤中已完全失活，不会阻碍之后Taq酶聚合反应，大大提高了PCR反应的灵敏度及特异性。优化浓度的SYBR Green I荧光染料掺入DNA双链后，荧光信号增强，而不掺入链中SYBR Green I染料分子荧光信号不变，从而保证荧光信号的增加与PCR产物的增加完全同步，荧光可以在退火或延伸阶段测定。
按照如下体系配置ROX 染料，可以适用于需要High ROX校正的仪器：ABI Prism7000/7300/7700/7900，Eppendorf，ABI Step One/Step One Plus等。
使用说明
1、从冰箱中取出本产品，室温融化后轻轻震荡混匀，1000rpm简短离心10–15秒。
2、qPCR反应体系配制：请参考以下方式配制体系：
50-μLPCR反应体系下推荐，0.5–500ng基因组DNA，1pg–50ng质粒或环状DNA，1–20ng cDNA
3、按照以上方式使用本产品进行qPCR实验可应用在市场现存的以下各种qPCR仪器:
需要High ROX校正的仪器：ABI Prism7000/7300/7700/7900，Eppendorf，ABI Step One/Step One Plus等。请购买biotnt的A2010A012货号产品。
*当引物Tm值≥60℃，扩增产物<300bp时，推荐两步法反应条件；
**当引物Tm值<60℃，扩增产物>300bp时，推荐三步法反应条件；
***本mix采用的是hot start 抗体taq酶，该酶保证了Real-Time PCR实验的特异性，并降低了实验操作难度（反应液配制时不需要在冰上操作，加样时间即使比较久，非特异性反应很少），必须有95℃5分钟这一步，否则会导致后面的反应不能进行，没有信号检测出；
自备设备和试剂
1、模板：cDNA，基因组DNA，质粒DNA，噬菌体DNA；
2、上下游引物，推荐BioTNT®Preci®mRNA qPCR Primer Pair；
3、BioTNT® Preci® qPCR Positive Control
4、RNase-free Water；
5、96孔或384孔PCR板；0.2mL或0.5mL Eppendorf管（无菌、无酶、RNase-free）；
6、移液器（10μL、200μL规格）及RNase-free Tips（10μL、200μL的枪头）；
7、Real-Time PCR仪；13000rpm离心机；
PCR结果判断
2、熔解曲线为单峰，且峰的Tm值与产物理论Tm相差在±2℃以内，如下右图所示：
注：引物设计软件报告会通过计算CG含量以及序列位置得到理论Tm值，实验所得熔解曲线峰所对应的Tm值会因为仪器的不同而变化，但变化不会超过±2℃，如果相差过大，可能并不是目的基因的产物。
运输与储存
1、冰袋或干冰运输，收到后立即贮存于–20℃。
2、-20℃储存,有效期为6月。
3、可多次冻融。不多于6次冻融。
质量标准（QC）
经BioTNT BALB/c小鼠核酸通用PCR阳性模板验证合格的基因引物，其适用于几乎所有BALB/c小鼠样本的PCR扩增，并且其熔解曲线呈特异性单峰，可以相当准确地显示目的基因的表达水平。如果客户的引物经本产品验证不合格，推荐您购买BioTNT引物，为您节省很多宝贵的精力和时间。
技术支持
1、BioTNT为其所提供的技术支持质量和效率而自豪。技术支持部门在样品及检测领域及对BioTNT产品具有丰富的实践经验和充足的理论知识。如果您PCR或其它产品有问题或遇到困难，请联系我们，无需迟疑。
2、BioTNT客户是我们产品改进和特殊应用信息的主要来源。您所提供的信息对于BioTNT的研究人员很有帮助。当您对产品性能或新的应用及新的技术有任何建议时，我们希望您能及时联系我们。
3、有关技术支持和更多信息，请联系BioTNT技术支持部门。
BioTNT配套试剂
注意事项
1、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴防护手套操作。
2、如需更详细信息，请向产品供应商咨询相关的材料安全数据书。
使用限制
本产品只用于分子生物学研究。不能应用于诊断、预防和治疗疾病。
（适用高ROX仪器）
本产品货号为 A2010A012和A2010A012X5
| 组分货号 | 名称 | A2010A012 |
| A2010A012-1 | qPCR Premix | 1mL，5x1ml |
| A2010A012-2 | ROX染料 | 40ul，200ul |
| DEPC 水 | 1mL，5x1ml | |
| 说明书 | 1份，1份 |
产品介绍
本产品由qPCR Premix和独立的ROX 染料，DEPC 水，三个组分组成。
qPCR Premix含有优化浓度的Fast HSTaq DNA Polymerase、SYBR Green I、dNTPs、Mg2+、反应缓冲液和稳定剂等成分。Fast HSTaq DNA Polymerase高温加热前，抗Taq单克隆抗体与Taq结合，抑制Taq的聚合酶活性，从而抑制在低温条件下出现的由引物和模板DNA非特异性杂交或引物二聚体引起的非特异性扩增。抗体在PCR反应的预变性步骤中已完全失活，不会阻碍之后Taq酶聚合反应，大大提高了PCR反应的灵敏度及特异性。优化浓度的SYBR Green I荧光染料掺入DNA双链后，荧光信号增强，而不掺入链中SYBR Green I染料分子荧光信号不变，从而保证荧光信号的增加与PCR产物的增加完全同步，荧光可以在退火或延伸阶段测定。
按照如下体系配置ROX 染料，可以适用于需要High ROX校正的仪器：ABI Prism7000/7300/7700/7900，Eppendorf，ABI Step One/Step One Plus等。
使用说明
1、从冰箱中取出本产品，室温融化后轻轻震荡混匀，1000rpm简短离心10–15秒。
2、qPCR反应体系配制：请参考以下方式配制体系：
| qPCR反应体系 | 体积(μL) | 终浓度 | 备注 |
| qPCR Premix(2X) | 10 | BioTNT A2010A011 | |
| 上游引物(10μM) | 0.4 | 0.2μM | 可由引物初始浓度调整 |
| 下游引物(10μM) | 0.4 | 0.2μM | 可由引物初始浓度调整 |
| 样本cDNA/阳参/阴参 | 1 | 待检样品 | |
| ROX染料 | 0.36 | 1X | |
| RNase-free水 | 补足 | 补足总体积20μL | |
| 总体积 | 20 |
3、按照以上方式使用本产品进行qPCR实验可应用在市场现存的以下各种qPCR仪器:
需要High ROX校正的仪器：ABI Prism7000/7300/7700/7900，Eppendorf，ABI Step One/Step One Plus等。请购买biotnt的A2010A012货号产品。
| 操作步骤 | 两步法反应条件* | 三步法反应条件** | |||
| 温度 | 时间 | 温度 | 时间 | ||
| 预变性*** | 95℃ | 5minutes | 95℃ | 5minutes | |
40个循环 | 变性 | 95℃ | 5seconds | 95℃ | 5seconds |
| 退火 | 60℃ | 30seconds | 55℃ | 20seconds | |
| 延伸 | 72℃ | 20seconds | |||
| hold | 4℃ | hold | 4℃ | hold | |
**当引物Tm值<60℃，扩增产物>300bp时，推荐三步法反应条件；
***本mix采用的是hot start 抗体taq酶，该酶保证了Real-Time PCR实验的特异性，并降低了实验操作难度（反应液配制时不需要在冰上操作，加样时间即使比较久，非特异性反应很少），必须有95℃5分钟这一步，否则会导致后面的反应不能进行，没有信号检测出；
自备设备和试剂
1、模板：cDNA，基因组DNA，质粒DNA，噬菌体DNA；
2、上下游引物，推荐BioTNT®Preci®mRNA qPCR Primer Pair；
3、BioTNT® Preci® qPCR Positive Control
4、RNase-free Water；
5、96孔或384孔PCR板；0.2mL或0.5mL Eppendorf管（无菌、无酶、RNase-free）；
6、移液器（10μL、200μL规格）及RNase-free Tips（10μL、200μL的枪头）；
7、Real-Time PCR仪；13000rpm离心机；
PCR结果判断
- 扩增曲线为s型，如下左图所示：
注：引物设计软件报告会通过计算CG含量以及序列位置得到理论Tm值，实验所得熔解曲线峰所对应的Tm值会因为仪器的不同而变化，但变化不会超过±2℃，如果相差过大，可能并不是目的基因的产物。
运输与储存
1、冰袋或干冰运输，收到后立即贮存于–20℃。
2、-20℃储存,有效期为6月。
3、可多次冻融。不多于6次冻融。
质量标准（QC）
经BioTNT BALB/c小鼠核酸通用PCR阳性模板验证合格的基因引物，其适用于几乎所有BALB/c小鼠样本的PCR扩增，并且其熔解曲线呈特异性单峰，可以相当准确地显示目的基因的表达水平。如果客户的引物经本产品验证不合格，推荐您购买BioTNT引物，为您节省很多宝贵的精力和时间。
技术支持
1、BioTNT为其所提供的技术支持质量和效率而自豪。技术支持部门在样品及检测领域及对BioTNT产品具有丰富的实践经验和充足的理论知识。如果您PCR或其它产品有问题或遇到困难，请联系我们，无需迟疑。
2、BioTNT客户是我们产品改进和特殊应用信息的主要来源。您所提供的信息对于BioTNT的研究人员很有帮助。当您对产品性能或新的应用及新的技术有任何建议时，我们希望您能及时联系我们。
3、有关技术支持和更多信息，请联系BioTNT技术支持部门。
BioTNT配套试剂
| 品名 | 货号 | 规格 |
| BioTNT® Preci® mRNA qPCR Primer Pair | PRIM1 | 500test |
| BioTNT® Preci® qPCR Positive Control | 20uL | |
| RNA极速抽提试剂盒 | A2010A110 | 50T |
| TRIzol®RNA提取试剂盒 | A2010A0401 | 50T |
| cDNA第一链合成RNA逆转录试剂 | A2010A0601 | 50T |
注意事项
1、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴防护手套操作。
2、如需更详细信息，请向产品供应商咨询相关的材料安全数据书。
使用限制
本产品只用于分子生物学研究。不能应用于诊断、预防和治疗疾病。
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Realtime PCR PreMIX（高ROX sybgreen）
￥129 - 458
