BaHF高保真DNA聚合酶 核酸扩增(PCR)

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北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域，致力于为客户提供包括BaHF高保真DNA聚合酶 核酸扩增(PCR)在内的一系列分子生物学试剂产品，并提供一系列相关的技术服务。

名称：BaHF高保真DNA聚合酶 核酸扩增(PCR)
英文名：BaHF High Fidelity DNA Polymerase
产地：国产|进口
编号：WE0113
规格：500U|2500U
  本产品是经过特殊处理的热启动高保真聚合酶。该聚合酶具有5"-3"DNA聚合酶活性，5"-3"核酸外切酶活性和3"-5"核酸外切酶活性，在普通PCR条件下，与BaldStar Taq DNA Polymerase相比，具有扩增效率高、错配率低的优良性能。化学修饰使该酶在常温下没有聚合酶活性，有效避免在常温条件下由引物和模板非特异性结合或引物二聚体而产生的非特异性扩增，酶的激活须在95℃下孵育10分钟，该条件可以整合入已有的PCR热循环程序。优化的缓冲体系使酶的作用发挥最大功效，实现对目的片段的高保真、高特异性、高扩增效率、高灵敏度扩增。使用本制品扩增得到的PCR产物的3"端附有一个“A”碱基，因此可直接用于T/A克隆。本产品应用于常规的PCR、RT-PCR和多重PCR，特别适用于对特异性、保真性和扩增效率均有较高要求的PCR。

产品组成：

 

组份	500U	2500U
BaHF DNA Polymerase, 5 U/μl	100μl	5×100μl
5×BaldStar PCR Buffer	1.9ml	5×1.9ml

注意：本产品的5×BaldStar PCR Buffer中含有8.5 mM*离子。

活性定义：
用活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物，在74℃，30分钟内，将10 nmol脱氧核苷酸掺入到酸性不溶物质所需的酶量定义为1个活性单位(U)。

质量控制：
1、经过多次柱纯化，SDS-PAGE检测其纯度大于99%；
2、经检测无外源核酸酶活性；
3、PCR方法检测无宿主残余DNA；
4、能有效地扩增人基因组中的单拷贝基因；
5、室温存放一个月，无明显活性改变。

使用方法：
以下举例为以人基因组DNA为模板，扩增1 kb的片段的PCR反应体系和反应条件，实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。

1、PCR反应体系

试剂	50μl反应体系	终浓度
5×BaldStar PCR Buffer	10μl	1×
dNTP Mix，10 mM each	1μl	200μM each
Forward Primer，10μM	2μl	0.4μM
Reverse Primer，10μM	2μl	0.4μM
Template DNA	＜0.5μg	＜0.5μg/50μl
BaHF DNA Polymerase ，5 U/μ l	0.5μl	2.5 U/50μl
ddH2O	up to 50μl

注意：引物浓度请以终浓度0.1-1.0μM作为设定范围的参考。扩增效率不高的情况下，可提高引物的浓度；发生非特异性反应时，可降低引物浓度，由此优化反应体系。

2、PCR反应条件

步骤	温度	时间	循环数
预变性	95℃	10 min
变性	94℃	30 s	30-40个循环
退火	55-65℃	30 s
延伸	72℃	60 s
终延伸	72℃	5 min

注意：
1)一般实验中退火温度比扩增引物的熔解温度Tm低5℃，无法得到理想的扩增效率时，适当降低退火温度；发生非特异性反应时，提高退火温度，由此优化反应条件。
2)延伸时间应根据所扩增片段大小设定，本产品中所包含的BaHF DNA Polymerase的扩增效率为1-2 kb/min。
3)可根据扩增产物的下游应用设定循环数。如果循环次数太少，扩增量不足；如果循环次数太多，错配机率会增加，非特异性背景严重。所以在保证产物得率的前提下应尽量减少循环次数。
4)本产品须在预变性95℃，10 min条件下实现酶的活化。

储存条件：-20℃，避免反复冻融。

更多有关BaHF高保真DNA聚合酶 核酸扩增(PCR)的价格及使用说明等，请联*(代"系")我们的业务经理王欣女士咨询，我公司还销*(代"售")以下产品：
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BaHF高保真DNA聚合酶 核酸扩增(PCR)关键词：BaHF高保真DNA聚合酶,BaHF High Fidelity DNA Polymerase,WE0113

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BaHF高保真DNA聚合酶 核酸扩增(PCR)关键词：BaHF高保真DNA聚合酶,BaHF High Fidelity DNA Polymerase,WE0113


·dNTP混合溶液(10 mM)
编号：WE0159
英文名称：dNTP Mix(1mM each)
规格：1ml|5ml
  本产品为高质量的脱氧核苷酸(dNTP)的混合物，包括等摩尔的dATP、dGTP、dCTP、dTTP。经过PCR检测的脱氧核苷酸，可与所有的耐热聚合酶配套使用。其中高纯dNTP纯度均达到99%以上，超纯dNTP纯度均达到99.9%以上，不含DNase和RNase。

使用方法：
dNTP(10 mM each)可直接使用，或用调节至中性(PH7.5 左右)的无菌超纯水稀释至适当浓度使用。可用于PCR反应、Real-time PCR、DNA序列测定、分子标记、cDNA合成等。

储存条件：-20℃。

·抗c-Myc标签抗体琼脂糖介质
编号：WE0329
英文名称：Anti-Myc Mouse Monoclonal Antibody Agarose Resin
规格：100μl
抗Myc标签免疫亲和介质是将抗Myc标签的单克隆抗体共价偶联到琼脂糖上，此种琼脂糖能够用于免疫沉淀或者免疫共沉淀，检测含有Myc标签的蛋白。

抗体类型：鼠单克隆抗体IgG1
免疫原：人工合成第410-419位多肽序列(EQKLISEEDL)
应用范围：IP

·HRP标记山羊抗人IgM(Fc5μ)
编号：WE0376
英文名称：Goat Anti-Human IgM(Fc5μ), HRP Conjugated
规格：100μl
本产品为辣根过氧化物酶标记的经亲和纯化的山羊抗体，特异识别人的IgM重链的Fc5μ片段，与人的IgA、IgG，人免疫球蛋白轻链无交叉反应，检测灵敏度高，本底低，对其他种属IgG无明显交叉反应，可用于Western Blot、ELISA 和免疫组化的检测。酶标记抗体，是一类广泛用于免疫学、分子生物学及临床医学各个分支学科中的免疫化学制剂，具有特异、敏感和安全的特点。

免疫原：人IgG(Fc5μ)
缓冲液：0.01M PBS，50%甘油，pH7.6
稳定剂：15 mg/ml BSA(不含IgG和蛋白酶)
防腐剂：无(叠氮*是HRP抑制剂，抗体稀释液中请避免使用叠氮*作为防腐剂)
应用范围：
WB(1：2000-10000)
ELISA(1：2000-20000)
Immunohisto/Cytochemistry(1：100-200)

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