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- 详细信息
- 技术资料
- 库存:
498
- 英文名:
T4 DNA Ligase
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")T4 DNA连接酶 工具酶,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:T4 DNA连接酶 工具酶
规格:200U
产地:国产|进口
品牌:百奥莱博
编号:BTN60609
T4 DNA连接酶从表达T4 gene 30的E.coli细胞中分离纯化而得,由一个分子量为68KDa的单亚基组成。
产品用途:
1.催化连接反应,即dsDNA,dsRNA和DNA/RNA分子的粘性末端和平末端5´-P末端和3´-OH末端之间形成磷酸二酯键。
2.修复dsDNA反应中的切口(Nick)。
3.催化pyrophosphate和ATP之间的磷酸交换反应(Weiss酶单位定义原理)
4.需要ATP、Mg2+和DTT,最佳pH为pH7.5-8.0。
5.NaCl浓度在200mM以上时有抑制作用。
6.1%~10%PEG和150~200mM NaCl能促进连接反应(尤其是平末端DNA)效率。
产品组成:
| 成分 | 规格 |
| T4 DNA连接酶(5U/μL) | 40μl |
| 10×T4连接酶Buffer | 300μl |
| 说明书 | 1份 |
注意:本公司本产品的单位按Weiss 单位定义,200个Weiss单位相当于25000个连接单位,1000个Weiss 单位相当于125000个连接单位。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
使用方法:(DNA片段和载体DNA的连接)
1.在微量离心管中制备下列连接反应液
| 10×T4 DNA Ligase Buffer | 2.5μl |
| 自备插入DNA片段 | 约0.3pmol |
| 自备载体DNA | 约0.03pmol |
| T4 DNA Ligase | 1μL |
| dH2O | up to 25μL |
2.16℃过夜反应
3.加入2.5μL的3M醋酸*(PH5.2)
4.加入62.5μL的预冷无水乙醇,-20℃放置30-60分钟
5.离心回收沉淀,用70%的预冷无水乙醇清洗沉淀,真空干燥
6.25~50μL TE溶解,10-20μL转化至100μL感受态细胞中。
更多有关T4 DNA连接酶 工具酶的价格及使用说明等,请联*(代"系")我们的业务经理王欣女士咨询,我公司还销*(代"售")以下产品:
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T4 DNA连接酶 工具酶关键词:T4 DNA Ligase,T4 DNA连接酶,BTN60609
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T4 DNA连接酶 工具酶关键词:T4 DNA Ligase,T4 DNA连接酶,BTN60609
·超快非醇核酸沉淀剂
编号:BTN60402
英文名称:Magic Solution DNArc
规格:30次
本产品是我司独创的一管式非醇DNA/RNA沉淀剂,其主要特点超快速度,是只需要离心2分钟即可快速沉淀回收溶液中的单双链DNA或RNA(包括探针),可广泛用于DNA/RNA的去盐,去蛋白,反应纯化,浓缩等。
产品特点:
1. 明显提高DNA或RNA沉淀的得率和DNA或RNA提取的产率。
2. 本产品无核酸污染也无DNA酶和RNA酶活性。
3. 痕量DNA和RNA(20pg)回收率达95~98%。
4. 不影响酶切、连接、转录、PCR、转化、转染等实验。
5. 不影响电泳和DNA-蛋白相互作用。
储存条件:常温运输,4℃保存,有效期一年。溶液A呈红色,如果颜色发生变化,则表示pH已经改变,请弃之不用。溶液B为无色液体,会在瓶底产生少量晶体状产生沉淀,用前无需溶化,直接取上清液使用)。
使用方法:
1.将1/10体积的溶液A加入到DNA溶液中(包括PCR,酶切反应液等),振荡混匀。如果回收20 Kb以上的DNA片段,混匀时需要温和;对20Kb以下的DNA片段,可以剧烈震荡。
2.室温静置至少2分钟。此步十分关键,不能省略而直接离心。
3.13000 g室温离心5分钟后,小心吸弃上清。
4.加入0.8mL溶液B,充分震荡混匀。
5.13000 g室温离心2分钟,小心吸弃上清。
6.再用0.2mL溶液B重复第4-5步一次。
7.小心吸弃上清后即得纯化的DNA沉淀,加入少量TE或水,充分吹打溶解。如果最后还会有少量白色不溶沉淀,属于正常现象。
疑难解答:
Q:电泳为何不能检测到回收的DNA?
A:最可能原因是各步加入溶液后没有充分震荡混匀,其次是沉淀在各步吸弃上清时候不小心吸走而丢失,三是溶液A的pH发生改变,四是DNA溶液的盐离子浓度或pH值太高。
Q:电泳时为何有残留荧光物在加样孔中?
A:可能是琼脂糖凝胶中的杂质吸附的DNA,吸取 DNA样品时最好先短暂离心,只取上清液。这些不溶杂质一般不影响后续反应。使用高纯度的琼脂糖可以减少杂杂质的污染。百奥莱博一般使用 OXOID的琼脂糖,得到的DNA可以用于常见的分子生物学后续反应。
Q:本产品与贵公司的Magic Gel DNArc是否相同。
A: Magic Gel DNArc 有离心管和特殊的融胶液,专门用于从胶中回收DNA;本产品用于从反应液中纯化回收DNA,不需要另外提供离心管和融胶液。Magic Gel DNArc的溶液B和溶液C 分别与本产品的溶液A和溶液B类似但浓度不完全相同,建议不要互用。
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T4 DNA连接酶 工具酶
¥180 - 2140









