T4连接酶品牌

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域，致力于为客户提供包括T4连接酶品牌在内的一系列分子生物学试剂产品，并提供一系列相关的技术服务。

名称：T4连接酶品牌
产地：国产|进口
品牌：百奥莱博
编号：JN0066
规格：28KU
英文名：T4 DNA Ligase
  T4 DNA连接酶常用于催化双链DNA平末端或互补粘性末端之间的 连接反应，也能催化双链RNA 5´-磷酸末端和3´-羟基末端间的连接。还可以修复双链DNA、RNA或DNA/RNA杂交双链中的单链切口。以上反应均需消耗ATP。

产品组成：

 

组份	体积
T4 DNA连接酶 （350U/μl）	80μl
2×Quick Ligation Buffer	1ml
10×T4 DNA Ligation Buffer	1ml

产品特点：
随酶附带10×T4 DNA Ligation Buffer及独特配方的2×Quick Ligation Buffer提供给您更多的选择：而使用10×T4 DNA Ligation Buffer，16℃过夜连接可获得最高的连接效率；使用快连Buffer在室 温(25℃)下，仅需5分钟即可完成粘性末端或平滑末端DNA片段的连接 反应。

产品用途：
1、DNA片段和载体DNA的连接。（参见实验方案）。
2、DNA片段和Linker或Adaptor DNA的连接。

使用建议：
1、粘末端的连接反应：插入片段和载体的摩尔浓度比特别重要，此比例在2-6之间最好，低于2:1就会导致较低的连接效率，高于6:1则会导致多个插入。摩尔比请按载体与插入片段DNA浓度及分子大小来计算。
2、平滑末端的连接反应：平滑末端的连接反应与突出末端相比反应较慢(其Km值约为突出末端的100倍)。进行平滑末端的连接反应时，可提高DNA浓度，将使用酶量增加到突出末端量的2～5倍左右。
3、向粘粒或噬菌体进行连接反应：可使载体和插入DNA的摩尔比调整为1:1，同时增大DNA浓度以便取得良好效果。(0.05～0.1μg／μl以上)
4、反应温度： 该酶的最适温度为37℃，由于热稳定性较差，因此 长时间反应时通常需在16℃下进行。若反应1-2小时左右的话也可在室 温下进行反应。
5、抑制剂：T4 DNA连接酶要求Mg2+，因此螯合Mg2+的EDTA的存在会阻碍反应。将溶解于含有高浓度EDTA缓冲液中的DNA准备作为样品使用，最好先用灭菌蒸馏水或TE缓冲液进行置换。

应用实例：

图 例 1 ） 在25℃，用不同活性单位（2U、4U、6U）T4 DNA连接酶与λDNA/Hind III 片段作用10分钟后的结果以及连接产物灭活T4连接酶后再次使用Hind III酶切结果。
泳道1：λDNA/Hind III；
泳道2：λDNA/Hind III+2U T4 Ligase；
泳道3：λDNA/Hind III+4U T4 Ligase；
泳道4：λDNA/Hind III+6U T4 Ligase；
泳道5：λDNA/Hind III ,T4 Ligase连接产物，Hind III酶切

活性定义：在20μl的连接反应体系中, 6μg的λDNA-Hind III的分解物在16℃下反应30分钟时, 有90%以上的DNA片段被连接所需要的酶量定义为1个单位。

质量保证：经多次柱纯化，SDS-PAGE胶检测仅可见清晰单一的目的条带；PCR方法检测无大肠杆菌DNA残留，无核酸内、外切酶污染。

快速连接步骤：
1、取50 ng载体和3倍摩尔量的插入片段，用双蒸水调整总体积为10μl。
2、加入10μl 2×Quick Ligation Buffer，混匀。
3、加入0.5～1μl T4 DNA连接酶，充分但轻柔混匀（切勿剧烈震荡，可能导致酶部分失活）。
4、稍事离心，置于室温 (25℃) 作用5分钟。
5、冰上放置，转化（如不立即进行转化实验请冻 存于-20℃）

除T4连接酶品牌外，我公司正在打折促销以下产品：

·重组人信号素3A(Semaphorin 3A)(Sema 3A)
编号：JN1153
英文名称：Recombinant Human Semaphorin 3A
规格：10μg|50μg|500μg|1mg
本品由我们的哺乳动物细胞表达系统制备而成，目的基因编码的Asn21-Val771在C端含有His标签。

Semaphorin 3A质量控制：＞95%(还原性SDS-PAGE)

Semaphorin 3A制剂：液体

Semaphorin 3A保存：收到货后请置于-20℃，可保存6个月，避免反复冻融。

关于Semaphorin 3A：
Semaphorin-3A is a secreted protein which belongs to the semaphorin family. Semaphorins are a family of secreted and cell-bound signaling molecules defined by the presence of a common 500 aa Sema domain.This protein can function as either a chemorepulsive agent, inhibiting axonal outgrowth, or as a chemoattractive agent, stimulating the growth of apical dendrites. In both cases, the protein is vital for normal neuronal pattern development. Increased expression of this protein is associated with schizophrenia and is seen in a variety of human tumor cell lines.


T4连接酶品牌关键词：JN0066,T4连接酶,T4 DNA Ligase

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T4连接酶品牌关键词：JN0066,T4连接酶,T4 DNA Ligase

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