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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
低温运输
- 保质期:
长期
- 英文名:
T4 RNA Ligase 2(truncated)
- 库存:
707
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")BTN130856型T4 RNA连接酶2(截短型)促销,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:BTN130856型T4 RNA连接酶2(截短型)促销
产地:国产|进口
品牌:百奥莱博
英文名:T4 RNA Ligase 2(truncated)
规格:2000U
T4 RNA连接酶2(截短型),又称T4 RNL2截短型,可特异性地将DNA或RNA的预腺苷酰化5´末端连接到RNA 3´末端。该酶连接时不需要ATP,但需要预腺苷酰化底物。该酶的表达来自E.coli质粒,该质粒编码T4 RNA连接酶2基因的前249个*基酸。与全长的T4 RNA连接酶2不同,T4 RNL2截短型不能将底物的5´末端腺苷酰化,因此无法将RNA或DNA的5´磷酸末端连接到RNA 3´端。该酶可用于microRNA克隆中接头连接的优化,因为此酶只能利用腺苷酰化的引物,因此,可以降低连接背景。其结构式如下图:

产品用途:
1.将5´预腺苷化的DNA或RNA连接到任何 RNA 3´末端;
2.将单链腺苷化引物连接至小RNA上,用于cDNA克隆文库构建;
3.将单链腺苷化引物连接至RNA上,用于链特异cDNA文库构建;
4.无单链和双链DNA核酸外切酶、核酸内切酶、RNase以及磷酸酶的污染。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
关于BTN130856型T4 RNA连接酶2(截短型)促销的更详细说明,请致电我公司咨询,我们将以最饱满的热情为您提供解答,此外,我公司专业供应下列产品:
·超快核酸电泳液(干粉)
编号:BTN51210
英文名称:SuperBuffer-2 Powder
规格:50L
SuperBuffer-2是我司在SuperBuffer基础上开发的DNA/RNA 两用快速电泳液。它跟SuperBuffer一样,能以高达30 V/cm的电压电泳,达到快速电泳的目的。跟SuperBuffer 不同的是,本产品对盐离子浓度敏感度低,同时还能用于RNA电泳。
产品特点:
1.快速,电泳时间短,对分辨率要求不高的电泳(如PCR和酶切检测等)甚至可以在5-10分钟内完成。
2. 不影响后续的Southern杂交,DNA胶回收和DNA连接等反应。
3. 价格与TBE(干粉)相当甚至更便宜。
4. DNA胶回收率高于使用TAE和TBE电泳的胶回收。
储存条件:常温保存和运输,有效期两年。
使用方法:
一:溶液的配制
将本产品全部加到一个干净的容量适当的容器中,按下表的用量加入蒸馏水并在室温下用磁力搅拌器搅拌,直到干粉完全溶解(一般需要30分钟左右)。
配法一(配制20X浓缩液):加2.5升得到20×工作液
配法二(直接配制工作液):加水50升得到50×工作液
注:其他浓度的浓缩液配制可以按比例计算,但浓缩液浓度不能超过20×,否则干粉不能全部溶解。由于干粉含多种未彻底混合均匀的成份,所以必须一次性全部用于溶液的配制。如果缓冲液(浓缩液或工作液)长时间不用,最好灭菌后放4℃长期保存。
二:DNA电泳
将SuperBuffer-2浓缩液用蒸馏水稀释到1×,除了需要使用较高电压才能得到快速的电泳结果外,操作跟使用TAE和TBE基本一样。需注意的地方是:
1.电压:在SuperBuffer-2溶液中既可以使用常规电压,也可以使用较高电压,只是使用常规电压时,其快速的优越性就体现不出来。使用较高电压时,由于各电泳槽结构不同,最佳电压需要稍做摸索。第一次最好将工作电压调到最高电压的80%左右,即平均25 V/cm(电极距离)。对一般minigel,一般可以用250-350V 跑5-10分钟;对大的电泳槽,可用400-450V 跑5-10分钟。每次根据电泳结果和缓冲液温度决定各电泳槽的最佳工作电压和时间。一般电压越高,电泳时间越短。若在电泳时发生电流或电压逐渐下降的现象,请检查电泳仪是否设置了电流上限或功率上限。缓冲液电泳次数超过3次或缓冲液中有细菌/真菌生长也会出现此现象,需要更换新的缓冲液。
2.胶浓度:建议将琼脂糖凝胶的浓度控制在0.8%左右,对于长度在100bp以下的DNA片段,可以将琼脂糖凝胶的浓度提高到1.2%左右。由于每次溶胶过程中会丢失水份,所以最好在溶胶后适当补充水份(可以前后称重),否则胶浓度会逐渐增加,DNA的移动速度会减低、产热会增加。使用0.8%左右的琼脂糖凝胶的好处是一方面可以节约胶的用量,另一方面可以使DNA的泳动速度更快,同时还能够提高DNA的回收率。
3.染色:如果使用EB,最好把染料加入到融化后的凝胶中(只是EB的终浓度最好为0.4 -0.5μg/mL,比使用TAE和TBE时稍高),但也可以加入到电泳缓冲液中或/和电泳上样液中。如果使用百奥莱博低毒染料绿如蓝,最好将染料加入到融化后的凝胶中。如果只有胶中有染料,则长时间电泳后(超过20分钟),大部分染料在高压下会与DNA 分离,DNA 条带可能会看不见或看起来很淡,此时应该再染色一次。在染色液中加入一定的量的NaCl(终浓度≥0.05 mol/L)能提高染色效果。SuperBuffer-2与SYBR Green I 也有良好的兼容性,可以结合使用。
4. DNA 条带扭曲:DNA样品中所含SDS 量过高时(SDS 主要来于上样液),DNA条带将出现扭曲,影响实验效果。建议使用不含SDS的上样液。
5. 反复使用:1×SuperBuffer-2电泳液至少可以重复使用2-3次,如果使用大电泳槽,可以重复使用的次数会更多。
6. TAE和TBE胶:已经用TAE和TBE电泳液配置好的琼脂糖凝胶可以直接放入1× SuperBuffer-2电泳液中按上述电泳条件电泳,但有时候会有扭曲现象。
三:RNA电泳
跟DNA电泳一样,必须在使用前用水将SuperBuffer-2溶液稀释到1×,其使用方法跟DNA电泳的主要区别是:
1.电压:RNA电泳时,最高使用电压大约只有DNA 最高使用电压的一半左右,所以一般minigel可以使用150 V左右的电压。由于各实验室电泳槽规格各异,第一次电泳时,最好将工作电压调到跟MOPS电泳一样的电压,每次再逐渐往上调电压和时间,根据电泳结果和测定缓冲液的温度决定今后的工作电压。
2. RNA上样液:RNA必须与含变性剂的RNA上样液混合,并在80℃保温10分钟后冰浴2-5分钟再上样。不能直接将RNA样品上样或使用DNA上样液,否则电泳不但很难得到清晰的条带,并且在加样孔中还会有看似DNA污染的条带出现。推荐使用百奥莱博生产的RNA变性/上样/染色三合一即用型溶液RNAload。
3.胶浓度:RNA电泳最好使用1%-1.5%的琼脂糖凝胶,用1X SuperBuffer-2配制。
4.染色:同DNA电泳。
BTN130856型T4 RNA连接酶2(截短型)促销关键词:T4 RNA连接酶2(截短型),BTN130856,T4 RNA Ligase 2(truncated)
·大片段Bst DNA聚合酶
编号:BTN100209
英文名称:Bst DNA Polymerase,Large Fragment
规格:800U
Bst DNA聚合酶大片段是将缺少5´→3´外切核酸酶结构域的Bacillus stearothermophilus(嗜热脂肪芽孢杆菌)DNA聚合酶基因在E.coli中表达纯化而得。
产品特点:
1. 5´→3´DNA聚合酶活性,但不具有5´→3´外切核酸酶活性,因此没有纠错功能。
2. 嗜温性,最适反应温度为68℃,建议反应温度不要超过70℃。
3. 强链置换能力,可以用于DNA链置换反应和LAMP扩增。还可用于68℃DNA测序(该条件尤其适用于富含GC的模板和纳克级的模板)。
4. 不能用于热循环测序或PCR,80℃ 10分钟即可失活。
产品组成:
| 成分 | 规格 |
| Bst DNA聚合酶(8U/μL) | 100μl |
| 10×Bst Buffer | 1.5ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存、有效期一年。长期贮存需补加100μg/mL BSA或0.1% Triton X-100。
1×Bst DNA聚合酶Buffer的组成:20mM Tris-HCl(pH8.8 @ 25 ℃),10mM KCl,10mM(NH4)2SO4,2mM MgSO4,0.1% Triton X-100
活性定义及检测条件:1 U 指65℃条件下,30分钟内使10nmoL的dNTP 掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶量。活性检测条件为:50mM KCl,20mM Tris-HCl(pH8.8),10mM MgCl2,30 nM M13mp18 ssDNA,70 nM M13 测序引物(-47)24 mer,200μm dATP,200μm dCTP,200μm dGTP,100μm[3H] dTTP,100μg/mL BSA和酶,65℃温育。
贮存条件:50mM KCl,10mM Tris-HCl(pH7.5),1mM DTT,0.1mM EDTA,0.1% Triton X-100和50%甘油,贮存于-20℃。
BTN130856型T4 RNA连接酶2(截短型)促销关键词:T4 RNA连接酶2(截短型),BTN130856,T4 RNA Ligase 2(truncated)
·DMSO,PCR级
编号:BTN80205
英文名称:DMSO,PCR Grade
规格:1.5mL
大量实验显示5-10%的DMSO能够促进PCR反应,尤其是高GC模板的PCR反应,本产品就是专门用于PCR或RT-PCR的高纯度DMSO。
储存条件:常温运输及保存,有效期一年。
·柱式病毒RNA-DNA共提试剂盒
编号:BTN130971
英文名称:Virus RNA and DNA column extraction kit
规格:50次
本试剂盒是在百奥莱博柱式病毒DNA提取试剂盒的基础上开发的、专门用于从血清(血浆)等液体样品及拭子(咽拭子、鼻拭子、口腔拭子、阴道拭子等)中提取微量病毒DNA和RNA的产品。
产品特点:
1. 本产品可用于病毒RNA、病毒DNA提取以及DNA和RNA双提取。
2. 操作简单,整个过程只需要 20分钟左右。
3. 灵敏度高,通过 PCR 检测到的最终灵敏度可以达到 30-50 拷贝/mL。
4. 安全无毒,不需要使用*酚和*仿等有机溶液。
5.与PCR和荧光PCR兼容。所得DNA可用于PCR、酶切等实验;RNA可用于RT-PCR和Northern杂交等实验。
6. 价廉物美,性价比远高于国外同类产品。
7.适用于各种材料,包括血清、血浆、脑脊液、尿液、粪便、培养细胞上清液等无细胞材料。
试剂盒组成:
| 成份 | 规格 |
| 溶液A | 30mL |
| 离心吸附柱 | 50套 |
| 通用洗柱液 | 50mL |
| DNA洗脱液 | 10mL |
| 使用手册 | 1份 |
储存条件:常温运输及保存,有效期一年。
使用方法:
1. 对于液体病毒样品:在 1.5mL离心管中加入0.1-0.2mL液体病毒样品。如果病毒需要富集,可以将1.5mL液体在 4℃,24000 g冷冻离心 60分钟,移弃1.3mL后剩下的0.2mL 用于第 2 步处理。
对于拭子样品:将一个拭子放入离心管中,加入1mL自备的生理盐水,振荡器上充分振荡半分钟,然后转移 0.2mL 到 1.5mL塑料离心管中,用于第 2 步处理。
2. 加入0.6mL溶液A 到第一步得到的0.2mL样品中,振荡 30秒混匀后室温放置 10分钟。注意:溶液A在 4℃放置后可能会产生沉淀,使用前必须放在 65℃水浴使沉淀彻底溶解并充分摇匀后再取用。
3. 短暂离心后将500μL溶液转移到离心吸附柱中,室温放置 2分钟。
4. 12000rpm室温离心 1分钟,弃收集管中的穿透液,把离心吸附柱放回到收集管中。
5. 将剩余溶液短暂离心后全部转移到步骤3的离心吸附柱中,室温放置2分钟。
6. 12000rpm室温离心1分钟,弃收集管中的穿透液,把离心吸附柱放回到收集管中。
7. 加入0.7mL通用洗柱液到离心吸附柱中,12000 rmp室温离心1分钟,弃收集管中的穿透液,把离心吸附柱放回到收集管中。
8. 12000rpm室温离心1分钟(干甩),弃含穿透液的离心管。
9. 将干甩后的离心吸附柱套入到一个自备的RNase-free的1.5mL离心管中,在离心吸附柱的滤膜的中部加入30-100μL 洗脱液,然后室温放置2分钟。
10. 12000rpm室温离心1分钟,离心管中的溶液即为病毒DNA和RNA溶液。
11. 所得溶液可以直接用于PCR、RT-PCR等实验,也可放-20℃长期保存备用。
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的纯度。 5.干燥 从布氏漏斗上取下有沉淀物的滤纸,放在8cm 表面皿上,置于80℃烘箱内干燥。将干燥后的RNA 制品称重。 6.含量测定 称取一定量干燥后的RNA 产品配制成浓度为10~50μg/mL 的溶液,在751 型 分光光度计 上测定其260nm 处的光密度值,按下式计算RNA 含量: 式中:OD260nm 为260nm 处的光密度值;L 为比色杯的光径(cm
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