北京现货超级杂交液(含50%甲酰胺)特价促销

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北京现货超级杂交液(含50%甲酰胺)特价促销的品牌：百奥莱博，是优质的探针标记及检测产品，用于生化研究，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多超级杂交液(含50%甲酰胺)等探针标记及检测产品请联*(代"系")我司咨询订购。

名称：北京现货超级杂交液(含50%甲酰胺)特价促销
品牌：百奥莱博
规格：100mL
英文名：Super hybrid solution(with 50% formamide)
产地：国产|进口
核酸杂交一般是指用一种标记的核酸探针与印迹膜上的核酸进行杂交，由此检测印迹膜上是否存在与探针同源的核酸分子(靶分子)。核酸杂交是分子生物学的基本技术之一，应用非常广泛。由于核酸杂交效率受印迹膜种类、杂交温度、探针浓度、杂交液离子强度、杂交液pH及杂交液粘度等因素影响，用户自己摸索和优化相关条件非常繁琐，因此本公司开发了本产品，其操作流程如下：


产品特点：
1. 既可用于Southern杂交(靶分子为DNA)，也可用于和Northern杂交(靶分子为RNA)，还可以用于菌落杂交，基因芯片等杂交。
2. 既可以用于同位素探针的杂交，也可以用于非同位素探针的杂交。
3. 既可以使用DNA(包括DNA Oligo)探针，也可以使用RNA探针(包括RNA Oligo)
4.含多种能够促进杂交的聚合物，使杂交反应能在6～12小时完成，而常规杂交反应一般需要12～24小时。
5.含多种封堵剂，能阻印迹膜对探针分子的非特异性吸附，能有效降低背景信号，延长曝光时间以便检测到低拷贝的RNA(Northern)和单拷贝的基因(Southern)。
6. A型不含甲酰胺，B型含50%的甲酰胺。后者使杂交在较低温度就可以完成，适合Tm 较高的分子杂交(如RNA-RNA和RNA-DNA杂交)。
7.跟各种常用的印迹膜兼容，包括硝酸纤维素膜和尼龙膜。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。本产品属于高盐溶液，低温下产生沉淀，必须在65℃加热溶解并充分摇匀后才能使用。

使用方法：

一、根据探针和靶分子的不同，分别按下面不同情况计算杂交分子的Tm 值
1. 对DNA-DNA杂交，其Tm = 81.5 + 16.6×log10[Na+] + 0.41×GC%–500/L
说明：L是探针或靶分子的长度(用两者中最短的一个)
GC%是探针或靶分子中的GC 百分比(用两者中最短的一个)
Na+浓度是本产品中Na+的浓度，为0.75 M，16.6 ×log10[Na+]=(-2.07)
2. 对DNA-RNA杂交，其Tm 值比DNA-DNA的Tm 值要高10-15℃。
3. 对RNA-RNA杂交，其Tm 值比DNA-DNA的Tm 值要高20-25℃。
4. 对Oligo探针杂交，Tm=GC 数量×4℃+AT 数量×2℃。

二、确定最佳杂交温度(预杂交温度跟杂交温度应该一样)
1. 对于大于200bp的DNA-DNA杂交，最佳杂交温度一般比Tm低15-25℃，一般选择68℃。
2. 对RNA-RNA或DNA-RNA杂交，最佳杂交温度一般比Tm低15-25℃。如果这样计算出的杂交温度很高(如高于70℃)，则RNA容易降解，所以最好选用含甲酰胺的超级杂交液(B型本产品)，以便能在42℃完成杂交。
3. 对Oligo探针的杂交，最佳杂交温度一般比Tm低5℃。由于Oligo较短，更容易受各种因素影响(如错配率、修饰碱基比例等)，所以最佳温度需要适度摸索和优化。

三、确定洗膜温度
一般使用0.1×SSC做洗膜液，在此条件下的最佳洗膜温度比Tm低5-12℃，一般情况下可以在55℃进行洗膜。Oligo探针可以室温洗膜。

四、预杂交步骤
预杂交就是用不含探针的本产品跟印迹膜进行孵育，其目的是用所含的非特异性DNA分子(鲑精DNA或小牛胸腺DNA)及其它高分子化合物将印迹膜上会非特异地吸附探针分子的位点封闭，否则这些位点会吸附标记的探针，造成高背景。
1. 将结合了靶分子的硝酸纤维素印迹膜或尼龙印迹膜浸泡于自备的6×SSC溶液中，使其充分湿润。
2. 将湿润的印迹膜置于一塑料杂交袋中(塑料袋最好预先封口，再剪掉一角，留一个小口)，按每平方厘米印迹膜加0.2mL超级杂交液的比例沿小口加入超级杂交液，然后用塑料封口机将口封牢。
3. 将此塑料袋浸没入温度设定在最佳杂交温度的恒温水浴中或杂交炉中，保温1-2小时，延长到12-16小时亦可。注意保温过程中塑料袋应在不停的摇动状态中，使超级杂交液与印迹膜充分接触。

五、杂交步骤
1. 如果标记的探针是双链核酸，则需经变性处理。具体操作是将探针样品在沸水浴中加热5分钟，然后迅速置冰浴中。如果是单链DNA或RNA探针，则不需变性，直接使用。
2. 将单链探针或变性后的双链探针加入到完成了预杂交的杂交袋中(先用剪刀剪一小口，加入探针后用热封机封口)。探针的加入量视探针标记效率而定，一般要求终浓度不能低于1-2 ng/mL。如果检测基因组中的单拷贝基因，探针的加入量应加大，而对于检测克隆的基因片段，则探针的量可减少。如果是放射性探针，应将此塑料袋套在另一塑料袋之中，以避免杂交袋发生遗漏、污染工作环境。
3.在选定的杂交温度下继续保温，时间一般为6-12小时。

六、洗膜步骤。注意在下面的所有操作过程中，一定不要使印迹膜干燥。
此步是将与印迹膜非特异结合的探针分子洗去而只留下特异结合的探针分子。由于非特异性杂交的杂交分子解链温度较低，热稳定性较差，在一定的温度和较低的离子强度下，即可洗掉。
1.杂交完毕，取出塑料袋，剪去一角，倒出所有的含探针的杂交液。此含探针的杂交液可以多次使用再倒弃。
2. 剪开杂交袋，用镊子取出印迹膜，浸没于大量的2×SSC(含0.5%SDS)溶液中，室温下振荡漂洗15分钟。
3. 重复上步操作一次。
4. 将印迹膜转移至0.1×SSC(含0.1% SDS)溶液中，在计算好的洗膜温度下振荡漂洗30分钟至1小时。
5. 重复上步操作一次。如果是同位素标记探针，则需要重复至用盖革计数器在无核酸区域检测不出放射信号为止。
6. 将印迹膜转移到滤纸上，吸去表面液体后印迹膜即可用于后续检测。

疑难解答：
问题一：高背景(有或没有杂交信号)
解决方案：将放射性探针的比活降低到2×10E6 cpm/mL以下；将非放射性探针的终浓度降低到30 ng/mL以下；将探针长度控制在200–800 核苷酸；减少杂交时间；适当提高杂交温度。
问题二：没有杂交信号或杂交信号非常弱
解决方案：杂交过程中应应该连续振荡，不应该有气泡，避免印迹膜变干。将放射性探针活性提高到>5×10E8 cpm/ng，提高非放射性标记探针的终浓度；适当降低杂交温度。

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·蛋白marker(43～200kD)
编号：BTN70102C
英文名称：Protein Marker(43-200kD)
规格：10次
本产品为蛋白质电泳标准系列，为已知的标准蛋白质混合物，在SDS-PAGE时可以作为分子量标准，估计其他蛋白质的分子量大小。

产品特点：
1．简单，不需要自己单独购买各种蛋白质配置。
2．本产品有粉末型和溶液型两种，十分稳定。
3．本系列三种产品涵盖从 3.3 KD-200 KD的分子量范围。

 

所含成分及其分子量		A型	B型	C型
肌球蛋白重链	200.0KD			有
*调素结合蛋白	130.0KD			有
兔磷酸化酶B	97.4KD		有	有
牛血清白蛋白	66.2KD		有	有
兔肌动蛋白	43.0KD		有	有
牛碳酸酐酶	31.0KD		有
人生长激素	22.0KD
大豆胰蛋白酶抑制剂A	20.1 KD	有	有
鸡蛋清溶菌酶	14.4KD	有	有
人工合成肽1	7,823D	有
人工合成肽2	5,856D	有
人工合成肽3	3,313D	有

产品组成：

成分	A型	B型	C型
蛋白分子量标准A型(低分子量)	15T	-	-
蛋白分子量标准B型(中分子量)	-	20T	-
蛋白分子量标准C型(高分子量)	-	-	10T
1×SDS-PAGE上样液	0.5ml	0.5ml	0.5ml
说明书	1份	1份	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期两年。

使用方法：

一、干粉型的使用：
1．开封后将1×SDS-PAGE上样液加入到样品管中溶解蛋白质粉末，各分子量标准所需的1×SDS-PAGE上样液的体积如下:
低分子量标准(BTN70102A)需要150μL。
中分子量标准(BTN70102B)需要200μL。
高分子量标准(BTN70102C)需要100μL。
2．沸水浴中加热 5分钟。
3．短暂离心后将溶液按每管10μL的体积分装到多个塑料离心管中，置-20℃长期保存。
4．使用时每次取一管，室温放置直到液体融化后，沸水浴中加热3～5分钟，即可上样进行SDS-PAGE电泳。BTN70102A型推荐使用Tricine-甘油SDS-PAGE胶、BTN70102B 推荐使用12%的分离胶、BTN70102C 推荐使用8%的分离胶。
5．电泳后进行考马斯亮蓝G-250染色，染色后出现的带型见上表。

二、溶液型的使用：
1．将溶液按每管一次电泳的用量分装到塑料离心管中冻存，每次只用一管，这样避免反复冻融。
2．使用时取一管室温放置直到液体融化。
3．沸水浴中加热3～5分钟后趁热上样并进行SDS-PAGE电泳。BTN70102A型推荐使用Tricine-甘油SDS-PAGE胶、BTN70102B 推荐使用12%的分离胶、BTN70102C 推荐使用8%的分离胶。
4．电泳后进行考马斯亮蓝G-250染色，染色后出现的带型见上表。

疑难解答：
1.分子量不同，SDS-PAGE的分离胶和浓缩胶浓度不同。需要自己根据具体情况调整。
2.电泳之后可将胶进行染色观察，如果使用传统配方进行染色时效果不好或考虑其毒性，请选择本公司的一步式蓝色PAGE染液(BTN61204)，该产品具有染色快，无毒，灵敏性高等物点，是常规蛋白染色液的替代品。


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·T4噬菌体基因32蛋白
编号：BTN130663
英文名称：T4 Gene 32 Protein
规格：100μg
T4噬菌体基因32编码蛋白是一种单链DNA(ssDNA)结合蛋白，为T4噬菌体DNA复制和修复所必需(1)。它协调性地结合并稳定瞬时形成的ssDNA区域，在T4噬菌体DNA复制过程中起着重要的结构性作用(2)。该蛋白也被广泛地用于稳定和标记ssDNA区域，以便用电子显微镜观察细胞内DNA的结构。

产品特点：
1．在RT-PCR过程中，增加反转录的产量和延伸能力；
2．土壤样品进行PCR时，增加目的片段的产量和特异性；
3．稳定和标记ssDNA结构。

储存条件：低温运输、-20℃保存、有效期一年。

·多聚甲醛-磷酸缓冲固定液
编号：BTN131282
英文名称：Polyoxymethylene PBS
规格：250mL
本产品是我司推出的专门固定组织和细胞的产品。固定的目的是使蛋白质等成分凝固，使组织结构或细胞形态更接近生活状态。 使细胞内的蛋白质、抗原等沉淀或固定，定位在细胞内原有位置，终止或减少外源性和内源 性分解酶的反应，防止组织因离体时间延长而发生细胞自溶，减少细胞可溶性蛋白质、脂肪和糖类物质的弥散、破坏与丢失。同时也可使组织硬化成形，便于后续的包埋、切片及染色。

4%多聚甲醛固定液是目前最常用的固定液之一。对多种组织都具有良好固定能力。多聚甲醛溶液主要由多聚甲醛、磷酸盐、去离子水组成，pH为7.4，该固定液适合于绝大多数组织和细胞的固定，是免疫组织化学和培养细胞固定中最常用的固定液之一，它能较好的保护组织和细胞的形态结构以及核酸。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：
1．对于细胞样品，去除培养液后，按照每六孔板一个孔加入1 毫升固定液的比例，加入固定液。对于其它样品，加入免疫染色固定液的量都以充分盖住样品为准。通常室温固定10分钟即可。也可以4℃过夜。
2．对于组织样本固定液必须足量，一般是组织块总体积的10-50倍，固定时间视组织块大小而定，一般 48-72h，保证固定液充分渗入组织中。标本浸入固定液后要轻轻摇晃几下,防止标本贴在瓶壁上,影响固定效果。
3．继续后续操作。



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F020202 山羊抗小鼠IgG1抗体 Goat Anti-Mouse IgG1
YPD/YEPD培养基粉剂   1L
ARB10858 人抗突变型瓜*酸波形蛋白抗体(MCV)含量检测 Human anti-mutated citrullinated vimentin antibody,mcv ELISA KIT
邻甲*甲*(代"酸") 5-Hydroxytryptamine hydrochloride 118-90-1
4-**氧乙酸 Acid Orange 12 122-88-3
ARB11466 人胰岛素自身抗体(IAA)Elisa定量检测 Human insulin autoantibodies,iaa ELISA KIT
偶氮*膦mN Phytic acid dodecasodiu*(代"m") salt hydrate 77350-04-0
BL1191 醋酸洋红染色液
铍试剂II Glass Fiber 51550-25-5
DTT溶液(1mol/L,RNase free)   10ml
3-(N-吗*(代"啡")啉)丙磺酸 5′-CMP,2Na 1132-61-2
9000-69-5 Pectin  果胶
BL0964 正常人血清 5ml

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