北京现货Denhardt溶液(同位素探针)折扣价

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

百奥莱博专业生产供应北京现货Denhardt溶液(同位素探针)折扣价，我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂，价格优惠，欢迎广大科研工作者垂询订购。

名称：北京现货Denhardt溶液(同位素探针)折扣价
品牌：百奥莱博
编号：BTN91104A
英文名：Denhardt Solution
产地：国产|进口
规格：250mL
本产品是最经典的、用于核酸膜杂交时降低膜对标记探针的非特异结合的试剂，早在Southern杂交出现前10年由Denhardt发明，该产品可用与Southern(含单拷贝基因)、Northern、非同位素杂交(B型规格)，与硝酸纤维素膜、尼龙膜等各种常用的核酸杂交介质兼容。A和B分别适用于同位素和非同位素探针。

储存条件：低温运输、-20℃保存、有效期一年。

更多有关北京现货Denhardt溶液(同位素探针)折扣价的价格及使用说明等，请联*(代"系")我们的业务经理王欣女士咨询，我公司还销*(代"售")以下产品：

·增强型DAB显色试剂盒
编号：BTN81223
英文名称：Enhanced DAB Chromogenic Kit
规格：100mL
增强型DAB显色试剂盒中含有检测辣根过氧化物酶(HRP)的所有试剂，适合于检测各种印迹膜上标记的HRP。其反应原理是HRP可以催化底物DAB在目的蛋白所在的位置转变为深褐色的化合物，可根据颜色的有无和深浅来检测HRP的存在与否或存在量，进而推测HPR标记物识别的靶分子的位置及含量。该反应的示意图如下：


产品特点：
1．即开即用，不需要用户准备任何材料。
2．DAB以干粉提供，方便运输。
3．可用于各种印迹膜(包括Southern、Northern、Western印迹膜)和免疫组化中的组织切片。免疫组织显色后还可用Nuclear fast red复染。
4．跟PVDF膜、尼龙膜兼容。
5．显色过程中需要避光，在显色后可拍照或扫描。

试剂盒组成：

 

成分	规格
DAB干粉	100mg
10mL棕色塑料瓶	1个
DAB溶解液	100ml
增强剂	1ml
H2O2	1ml
说明书	1份

 注意：本产品可以配制100mL增强型DAB显色液，但其具体使用次数根据跟印迹膜的大小密切相关。

储存条件：常温运输，4℃保存，有效期1年

自备试剂：超纯水、HRP标记物(抗体或探针)处理过的印迹膜。

使用方法：
1．从DAB溶解液中取5mL到一个10mL的棕色塑料瓶中(本试剂盒提供)，将100mg DAB干粉全部加入，充分振荡混匀，所得溶液即是20×DAB浓缩液。此溶液如果一次不能用完，可以分装成小管在-20℃避光放置6个月。
2．按每cm2印迹膜需要0.1mL DAB显色液的比例计算所需显色液的量，并按下表配制DAB显色液(此处以配制10mL为例，用户如需要配制其他体积，可按比例增减各成分用量)：

成分	用量
DAB溶解液	9.4ml
20×DAB浓缩液	0.5ml
增强剂	0.1ml
H2O2	10μl

 注意：此溶液必须立即使用。
3．如果是印迹膜，则迅速将印迹膜转移到上步得到的DAB显色液中，室温避光静置。待印迹膜上出现满意的条带时(一般需要2-3分钟，最长不超过10分钟，具体跟靶分子浓度密切相关)，迅速将印迹膜转移到盛有超纯水的托盘中摇晃，终止显色反应。数分钟后需要换水，共三次。用吸水纸吸干印迹膜上的水分，照相处理后避光干燥保存印迹膜。
4．如果是组织切片，则直接将DAB染色液滴加在切片上，室温避光放置10分钟，然后浸在超纯水中数次，空气中干燥后显微镜下检测或照相。


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·小鼠基因组DNA
编号：BTN131033
英文名称：Mouse Genomic DNA
规格：100μg
本产品为小鼠基因组DNA，是从无疾病小鼠全血中分离到的。利用脉冲电场凝胶电泳测量，90%以上的DNA的大小大于50kb。该DNA适用于Southern blot杂交,基因组分析(包括 PCR)及基因组文库构建等实验。

储存条件：低温运输、4℃保存、有效期一年。

·3´RACE试剂盒
编号：BTN101104
英文名称：3´-RACE Kit
规格：10次
研究真核基因的最基础的工作之一就是确定其转录终止位点，目前最通用的方法是3´-RACE法，RACE(Rapid Amplification of cDNA Ends)是Frohman发明的、通过PCR快速克隆cDNA末端的技术，它在不建立cDNA文库的前提下，利用已知cDNA序列设计引物，通过往两端延伸和扩增获得其3´-端序列。本试剂盒就是根据3´-RACE原理而开发。RACE的原理如下图：


产品特点：
1. 即开即用，客户不需要单独准备各种材料。
2.反应条件经过精心优化，包括使用无RNase H活性的MMLV和优化的引物。

试剂盒组成：

成分	规格
MMLV逆转录酶-RI混合物(RNase H-，200U/μL)	10μl
MMLV Buffer(含dNTP)	50μl
PCR MagicMix 2.0(含酶和染料)	1.5ml
3´-RACE引物A(10μM)	10μl
3´-RACE引物B(10μM)	100μl
3´-RACE引物C(10μM)	100μl
RNase-Free水	1ml
说明书	1份

储存条件：低温运输、-20℃保存、有效期一年。

使用方法：

一、利用含Oligo(dT)的3´-RACE引物A进行逆转录
 注意：MMLV酶使用前必须短暂离心，因为它含50%甘油，及其粘稠，否则将取不到所需体积。
1.在一个PCR管中，加入以下组分：

成分	用量
Poly(A)RNA(或总RNA)	0.2-2μg(5μg)
3´-RACE引物A(10μM)	1μL
MMLV Buffer(含dNTP溶液)	5μL
RNase-Free水	补至19μL
合计	19μL

 注意：如果可能，最好使用Poly(A)RNA作为模板。
  65℃保温5分钟，展开RNA的二级结构，立即冰浴待用。
2. 再在上述PCR管中加入1μl MMLV逆转录酶-RI混合物(200U/μL)。
3. 37℃保温60分钟，42℃保温30分钟进行逆转录反应；然后50℃保温10分钟终止反应。
4. 加入0.5mL RNase-free水稀释上步得到的cDNA，冰浴待用。长期放置需要放-20℃保存。

二、利用基因专一性引物A和3´RACE引物B进行第一轮PCR
5. 用不同量的RT反应液(稀释后的cDNA)设置PCR(样品组最好设置用量梯度，单位：μL)。

成分	梯度1	梯度2	梯度3	梯度4
稀释后的cDNA	1	5	10	15
基因专一性引物A(10μM)	2.5	2.5	2.5	2.5
3´RACE引物B(10μM)	2.5	2.5	2.5	2.5
98℃ 5分变性RNA-cDNA杂交链，短暂离心后再加入下列成分
PCR MagicMix 2.0	25	25	25	25
RNase-free水	19	15	10	5
合计	50	50	50	50

6. 按下列条件进行PCR(注：应根据实际情况选择适当的退火温度)。
 第1次循环：52-60℃ 2分，72℃ 40分(此步的目地是合成第二链的cDNA，复性温度需要根据自备基因专一性引物A的Tm值进行优化，一般可以从55℃开始)。
 第2-30次循环：94℃ 1分钟，52-60℃ 1分，72℃ 3分(此步为PCR扩增，复性温度需要根据自备基因专一性引物A的Tm值进行优化，一般可以从55℃开始)。
 最后延伸：72℃ 15分
7. 取5μl的PCR反应液进行琼脂糖凝胶电泳以确认PCR扩增产物。若得到目的扩增产物需要用于后续实验，请于-20℃保存；若没有得到目的扩增产物，可按下列步骤进行巢式PCR反应。

三、利用基因专一性引物B和3´RACE引物C进行巢式PCR反应
8. 将上轮PCR产物(4管)均用水稀释稀释20倍，然后每管均用巢式PCR进行扩增。巢式PCR反应设置如下：

成分	用量
PCR MagicMix 2.0	25μl
上步得到的PCR反应液(稀释20倍后)	1μl
基因专一性引物B(10μm)	2.5μl
3´RACE引物C(10μm)	2.5μl
超纯水	补至50μL

9. PCR反应。按下列条件进行PCR：
第1-30次循环：94℃ 1分钟，52-60℃ 1分，72℃ 3分(复性温度需要根据自备基因专一性引物B的Tm值进行优化，一般可以从55℃开始)最后延伸：72℃ 15分
10.电泳检测。然后根据实验结果进行DNA测序或TA克隆。

注意事项：
1. 如果两轮PCR得到的非特异产物多，可以在RT反应是继续降低3´-RACE引物A的用量。
2.自备的基因专一性引物的GC含量最好跟3´-RACE引物B和引物C的一致，后者长度均为18nt，均含11个G(或C)，7个A(或T)。


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3,5-二碘-L-甲腺*酸 3,4-Dimethoxybenzaldehyde 1041-01-6
ARB12941 小鼠血小板衍生生长因子可溶性受体α(PDGFsR-α)定量分析 Mouse platelet-derived growth factor soluble receptor α,pdgfsr-α ELISA KIT
PY04-037  *啶酮酸(IV)  4.0mg/支×10支  每支添加于200ml李氏菌增菌肉汤(LB1，LB2)基础中即为LB2，用于李氏菌二次增菌培养
D-泛醇 Potassium sodiu*(代"m") tartrate tetrahydrate 81-13-0
ARB12268 大鼠多巴胺D2受体(D2R)尿液中含量检测 Rat dopamine d2 receptor,d2r ELISA KIT
白蛋白检测试剂盒(*甲*(代"酚")紫微板法)   100T
86-87-3 Naphthalene acetic acid(NAA)  α-*乙酸
F020232 兔抗驴IgG抗体 Rabbit Anti-Donkey IgG
CYB164017 羊抗小鼠IgG(1：500～2000)-HRP
CGS缓冲液(pH7.0)   500ml
ARB12408 大鼠组织蛋白去乙酰化酶(HD)尿液中含量检测 Rat Histone deacetylase,hd ELISA KIT
N-*甲酰-L-缬*酰甘*酰-L-精*酸对硝基*(代"*")胺盐*(代"酸")盐 MSNT 64815-80-1
柠檬酸* 1,3,5-Tribromobenzene 6100-05-6

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