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GAL指示剂培养基品牌

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  • 百奥莱博
  • 北京
  • 2025年07月14日
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      北京百奥莱博科技有限公司

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      900

    • 英文名

      GAL Indicator Medium

    特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

    百奥莱博专业生产供应GAL指示剂培养基品牌,我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。


    名称:GAL指示剂培养基品牌
    规格:250mL
    品牌:百奥莱博
    英文名:GAL Indicator Medium
    产地:国产|进口
    GAL指示剂培养基是一种用来记录半乳糖发酵能力的培养基,可以实时监测发酵过程产生半乳糖的能力。本产品为优化的MAL指示剂培养基,包含有菌株所需要的全部营养成分和指示剂,即开即用,方便使用。

    储存条件:常温运输及保存,有效期两年。

    我公司的GAL指示剂培养基品牌,性价比高,货期短,送货上门,欢迎您来电咨询购买,另外,我公司还生产供应销*(代"售")下列产品:

    ·印迹膜抗体稀释液
    编号:BTN81208
    英文名称:Antibody Dilution Buffer
    规格:250mL
    本产品用于稀释Western Blot抗体,即开即用,方便快捷。

    产品组成:

     
    成分 规格
    抗体稀释液成分一 100ml
    抗体稀释液成分二 0.5g
    说明书 1份


    储存条件:常温运输,4℃保存,有效期一年。

    使用方法:

    一、转膜(湿法电转移,本产品不含相关试剂)
    1.制备湿法电转液:将湿法电转液干粉全部溶解在1L去离子水中得20×湿法电转液,用时用去离子水稀释20倍预冷待用。
    2.根据PAGE胶的大小剪切同样大小的滤纸和各边都大1mm的硝酸纤维素膜(以下简称膜)。避免手直接接触膜。
    3.将切好的膜浸泡在新鲜稀释的1×湿法电转液(下简称转移液)中15-20分钟。
     注意:最好用镊子夹住膜的一边轻轻置于转移液上,只让膜下层不转移液接触,通过毛细管作用使整个膜浸湿。避免让膜沉入转移液中,否则膜不转移液之间形成的气泡会阻止膜的湿润。
    4.在容器中将两块海绵垫、六层滤纸用转移液浸湿。
    5.在转移夹上依次放上一张浸湿的海绵垫、三层浸湿的滤纸、一块PAGE胶(只要分离胶部分)、一张浸湿的膜、三层浸湿的滤纸、一张浸湿的海绵垫。
     注意:每叠加层一定要用玻棒来回擀几遍以擀走里面的气泡。膜两边的滤纸绝对不能相互接触,否则电转移时会发生短路,烧坏装置。
    6.合起转移夹幵放入转移槽中(一定要注意方向,转印带负电荷的蛋白质时电极方向是膜正胶负;转印带正电荷的蛋白质时,电极方向是膜负胶正),然后用预冷的转移液灌满转移槽。
    7.插上电极,一般在冷却条件下用100V恒压转移30-60分钟或冷室中14V转移过夜。
     注意:一定要检查电流的大小,电流一般在0.1-0.4A。应根据蛋白分子量的大小确定转膜时间,对于小分子量的蛋白,转膜时最好垫2张或更多张膜(最多可10 张),即使白质已经转过了第一张膜,还会在其它膜上检测到;对于大分子量的蛋白,转膜时电压要高一点,时间也要延长一点,开始最好也用两块或多张膜。转移时间长的时候特别要注意加强降温措施。如果目的蛋白转移效率低,可以在转移液中加终浓度为20%的甲醇或0.1%的SDS。
    8.终止转移后,取出膜,幵在膜上剪去一个小角以标记方向。如有必要可用自备的各种染液对胶或膜进行染色以确定蛋白质转移效率。

    二、封膜(本产品不含相关试剂)
    1.将膜转移至杂交袋中,加5-10mL Western封膜液后热密封杂交袋开口。
    2.室温下用脱色摇床摇动杂交袋30-60分钟。

    三、与一抗二抗结合
    1.用5mL Western抗体稀释液(配制方法:将抗体稀释液成分二干粉到入成分一溶液中,溶解后即可。未用完的抗体稀释液需-20℃保存)将自备的一抗稀释至适当的倍数(一般需要稀释10-100000倍使用,最佳稀释倍数跟一抗效价相关,需摸索)。
    2.剪开杂交袋的一角,倒去封膜液,加入5mL新鲜稀释的一抗溶液,加热密封杂交袋开口。
    3.室温下在脱色摇床上摇动杂交袋30-60分钟。
    4.用抗体稀释液将自备的HRP或AP标记的二抗稀释至适当浓度(一般需要稀释500-4000倍。最佳稀释倍数跟二抗效价相关,需摸索)。
    5.剪开杂交袋的一角,倒去一抗溶液(可留存),加入5mL新鲜稀释的二抗溶液,加热密封杂交袋开口。
    6.室温下在脱色摇床上摇动杂交袋30-60分钟,也可过夜孵育。
    7.剪开杂交袋的一角,倒去二抗溶液(可留存)。
    8.剪开杂交袋,用镊子取出膜,用Western洗膜液在器皿中洗3次,每次10分钟。
    9.根据二抗的标记酶选择下面两种显色方法之一。

    四、HRP显色检测(对HRP标记的二抗,本产品A型,本产品不含相关试剂)
    1.将膜平放,在吸附了抗原抗体的一面加入100-500μL TMB溶液A和100-500μL TMB溶液B,铺满整个膜表面(具体用量可按膜的大小增减)。
    2.置于平式摇荡仪上,在室温下孵育2至5分钟,直至深蓝色条带出现。
    3.用镊子夹起膜,放入去离子水中洗膜3次终止反应,每次30分钟。
    4.空气中晾干后照相保存。
     注意:膜显色后的颜色在数小时后将会褪色,不能永久存在,故需要及时照相。

    五、AP显色检测(对AP标记的二抗,本产品B型,本产品不含相关试剂)
    1.用新鲜配制的1×AP缓冲液洗涤硝酸纤维素膜5分钟。
    2.将膜转移到新配制的BCIP-NBT法AP显色液中,每cm2膜需要0.1mL显色液。新鲜配制BCIP-NBT法AP显色液(以10mL为例)的方法:将9mL去离子水、1mL 10×AP缓冲液、50μl BCIP溶液和50μl NBT溶液混匀。此溶液必须在1小时内使用。
    3.室温摇晃5-30分钟显色(37℃可加速反应)。
    4.显色到合适程度后用自备去离子水洗膜3次终止反应,每次30分钟。
    5.用吸水纸吸干膜上的水分,避光干燥保存或在一周内照相。

    六、Western抗体清除剂(说明:此处理可能会使蛋白质失去某些表位,本产品不含相关试剂)
    1.将膜浸泡在Western抗体清除剂中,70℃摇晃孵育30分钟,去除一抗和二抗。用Western洗膜液洗膜两次,每次10分钟。
    2.膜即可用于下一次Western检测的膜封堵步骤。


    GAL指示剂培养基品牌关键词:GAL Indicator Medium,GAL指示剂培养基,BTN130899


    ·TdT加尾法DNA地高*(代"辛")标记试剂盒
    编号:BTN90605C
    英文名称:TdT-Tailing DNA Labeling Kit
    规格:5次
    本试剂盒是基于TdT末端转移酶能够在DNA的3´端添加dNTP尾巴的原理而设计,该反应的示意图如下:
    TdT加尾法DNA地高*(代

    产品特点:
    1.快速,15分钟即可完成标记反应。
    2. 不但可用于单链DNA和DNA Oligo标记,还可用于3´突出的双链DNA标记,但后者标记效率稍低。
    3.可用同位素底物和非同位素底物(生物素和地高*(代"辛")标记的核苷酸等)。
    4. 提供不带标记核苷酸、带生物素标记核苷酸和带地高*(代"辛")标记核苷酸三种选择。
    5. 同时提供非标记的dATP,用户可以用其调节加尾长短和标记核苷酸掺入比例。
    6. 标记的探针可用于电泳迁移率实验(EMSA)、原位杂交(ISH)、Northern Blot(不推荐用于低丰度RNA检测)、小RNA Northern、Southern Blot(不推荐用于单拷贝基因检测)、菌落杂交、斑点印迹杂交分析等。

    试剂盒组成:
    成分 规格
    TdT缓冲液,5× 20μl
    TdT(末端转移酶,10U/μL) 10μl
    dATP,2mM 5μl
    标记核苷酸 (A、B、C不同,见注)
    超纯水 1ml
    说明书 1份

    注:A型用于自选标记,用户需自备标记核苷酸,本产品不提供标记核苷酸;B型提供5μl Biotin-11-dUTP;C型提供含5μl DIG-11-dUTP。

    储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。

    使用方法:
    1.在0.2mL微量离心管中按下表设置一个20μl体系的标记反应(如果需要标记更多探针,请增加标记体积而不要增加探针DNA的浓度):
    成份 用量
    探针DNA 100-200 pmol
    TdT Buffer,5× 4μl
    标记核苷酸,1mM
    (A型需自备标记核苷酸)
    1μl
    dATP,2mM (见下注)
    TdT末端转移酶(10U/μL) 2μl
    超纯水 补到20μl

    注:dATP可以不加,但这样得到的加尾全部是标记核苷酸,由于空间阻碍,灵敏度不一定最佳。如果杂交效果不好,掺入一定比例的dATP到标记核苷酸中,以控制标记的密度,提高比活。具体比例如何可以自己优化。
    2. 37℃反应15分钟,延长到30分钟也可以。如果没有非标记核苷酸存在,一般可以加尾3-5个Biotin或DIG标记的核苷酸(标记物空间阻碍抑制延长);如果有在加尾反应中加入一定比例的非标记核苷酸dATP(其他dNTP也可,只是本试剂盒只提供dATP而已),每条探针上可加上约100个核苷酸,平均含5个标记核苷酸
    3. 70℃ 10分钟灭活TdT酶。
    4. 如果需要,可以PAGE电泳+银染(相关试剂需要另购)检测标记效率,带标记的探针泳动速度将低于没标记的探针。
    5. 如果是非同位素标记,探针不需纯化可以直接用于杂交。如果需要纯化非同位素标记的探针,请不要酚/*仿抽提,因为非同位素标记物一般会使探针DNA进入有机相而丢失。
    6. 使用时需将探针以1-8 ng/μL的终浓度加入到杂交液中(如果探针是双链DNA,加入前还需热变性)。如果不立即使用,非同位素标记的探针DNA可-20℃长期放置一年,同位素标记的探针DNA不能放置。


    GAL指示剂培养基品牌关键词:GAL Indicator Medium,GAL指示剂培养基,BTN130899


    ·酪蛋白溶液(PBS)
    编号:BTN131105B
    英文名称:Casein Blocking Solution(PBS)
    规格:250mL
    即用型酪蛋白(1%)用于封闭非特异性位点。
    A型:溶于TBS的Hammarsten级酪蛋白,Kathon防腐剂,pH7.4。
    B型:溶于PBS的Hammarsten级酪蛋白,Kathon防腐剂,pH7.4。可用于在使用牛奶封闭背景高时作为替代品使用。

    储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。

    ·5×SDS-PAGE上样液
    编号:BTN81204
    英文名称:SDS-PAGE Loading Buffer,5×
    规格:1mL
    本产品是专门用于SDS-PAGE电泳样品上样用的缓冲液,其浓度为5×,配胶时即开即用,非常方便。

    储存条件:低温运输、-20℃保存,有效期一年。

    ·极高热稳定单链结合蛋白
    编号:BTN130664
    英文名称:ET SSB
    规格:50μg
    极高热稳定性单链结合蛋白(ET SSB)是从极度耐热的微生物中分离得到的单链DNA结合蛋白质,在95℃温育60分钟后,依然具有全部活性。因为具有极高的热稳定性,ET SSB可用于需要高温反应条件的实验中,如核酸扩增反应和测序反应。

    产品特点:
    1.提高DNA聚合酶的延伸能力;
    2.稳定和标记ssDNA结构;
    3.增加PCR反应的产量和特异性;
    4.增加RT-PCR中,反转录的产量和延伸能力;
    5.改善强二级结构区域的DNA测序;
    6.通过ssDNA结合和链置换,增强RecA蛋白的活性。

    储存条件:低温运输、-20℃保存、有效期一年。



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