miRNA分离纯化试剂盒(沉淀法)北京现货促销

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

百奥莱博专业生产销*(代"售")miRNA分离纯化试剂盒(沉淀法)北京现货促销，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：miRNA分离纯化试剂盒(沉淀法)北京现货促销
规格：50次
产地：国产|进口
品牌：百奥莱博
microRNA(miRNA)和RNA干扰研究是当今分子生物学研究的一大热点，但快速分离和纯化相关的小RNA十分棘手，是目前研究 miRNA的主要技术障碍之一。目前国外相关产品寥寥无几，并且基本采用先提总 RNA 再富集其中的小RNA的两步法策略，国内相关产品更是一片空白。百奥莱博为满足广大用户的需求，开发了具有自主知识产权的本产品。

试剂盒特点：
1.从总 RNA中直接分离纯化小RNA，不需要使用离心吸附柱。得到的小RNA 长度大部分在 200nt以下，包括 5S RNA、tRNA、 miRNA、Pre-miRNA、pri-miRNA、siRNA、shRNA和snRNA等。
2. 操作简单快速，整个过程只需要约30分钟。
3.小RNA 纯净，OD260/280一般都在 1.9以上。
4.可用于RT-PCR、miRNA 标记、microarray等后续实验。
5. 此方法能去除 90%左右的大 RNA，但会有少量残留大 RNA，如果需要纯度更高，可以选择 PAGE 回收法。

试剂盒组成：

 

成分	规格
溶液A	5ml
溶液B	10ml
溶液C	50ml
RNase-free 水	10ml
说明书	1份

储存条件：常温运输，4℃保存，有效期一年。

使用方法：
1.在纯化好的100μl 总 RNA(含大 RNA和小RNA)中，加入50μl溶液A，振荡 30秒混匀。如果 RNA样品体积不足 100μl，可以用RNase-free水补足，如果体积超过 100μl，可以用本公司核酸浓缩剂浓缩到 100μl。
2.室温 12000～15000g离心 30分钟。小RNA在上清中，大 RNA在沉淀中。
 注意：离心时间不能短于30分钟，否则大 RNA沉淀不充分。
3.小心将上清液转移到干净的1.5mL RNase-free塑料离心管中。留下的沉淀可以用 75%乙醇洗涤后做大 RNA电泳对照用。
4.在上清液中加入200μl溶液B，振荡 30秒混匀。
5.室温 12000～15000g离心 10分钟，小心弃上清。由于溶液B中有惰性的助沉剂，所以得到的小RNA沉淀肉眼可见。
6. 加入1mL溶液C，震荡数秒。
7.室温 12000～15000g离心 10分钟，小心弃上清。
8. 短暂离心数秒，小心吸弃残留液体(约50μL左右)。
9.在沉淀中(含小RNA)加入30-100μl RNase-free 水，吹打溶解即得小RNA溶液。注意：不能只吹打管底部分，还需要吹打整个离心管管壁的离心面部分，因为上面也有有小RNA沉淀。
10. 最好先 PAGE-银染检测小RNA 纯度再使用。

更多有关miRNA分离纯化试剂盒(沉淀法)北京现货促销的价格及使用说明等，请联*(代"系")我们的业务经理王欣女士咨询，我公司还销*(代"售")以下产品：

·*酚蓝溶液(电泳级)
编号：BTN100882
英文名称：Bromophenol Blue Solution
规格：10mL
*酚蓝分子式为C19H10Br4O5S，分子量为669.97，CAS号为115-39-9。易溶于*氧化*溶液，溶于甲醇、乙醇和*酚，是一种pH指示剂，在pH3.0(黄)~4.6(蓝紫)范围，颜色由黄变蓝。本产是*酚蓝的1%水溶液，用作制备常用做电泳指示染料，其泳动率在0.5-1.4%琼脂糖中，相当于300bp dsDNA，在8% PAGE变性胶中相当于20bp dsDNA。如果含*酚蓝的上样液跟样品混合后变黄，则表示样品中酸性物质没去除干净，必须用1M Tris pH8.8调到*酚蓝呈蓝色，否则蛋白将向相反方向移动。

储存条件：常温运输及避光干燥保存，有效期一年。

·冷启动核酸酶
编号：BTN130824
英文名称：Cold-active Nuclease
规格：10000U
本酶能够切断所有类型的DNA和RNA(单链、双链、线性以及环状)，即使在冰上也能进行反应。因此，本酶特别适用于消化蛋白质等一些热不稳定基质中的核酸物质。

产品用途：
➤ 降解基因组DNA。
➤从大肠杆菌细胞中抽提蛋白质时，降低溶液黏度。
➤ 双向电泳时，对样品进行预处理。
➤ 病毒纯化时的预处理。

产品组成：

成分	规格
Cryonase冷启动核酸酶(20U/μl)	500μL
使用手册	1份

储存条件：低温运输，4℃遮光保存，有效期二年。

活性定义：以鲑鱼精子DNA为底物，在37℃、pH7.5的条件下，1分钟内使反应液的260nm吸光度增加0.001所需的酶量定义为1个活性单位(U)。


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·25mM*化*溶液(PCR级MgCl2溶液)
编号：BTN90302
英文名称：MgCl2，PCR Grade
规格：5mL
本产品为专门用于PCR的MgCl2，其浓度为25mM，可以用于调节MgCl2的最佳浓度。

储存条件：低温运输、-20℃保存，有效期一年。

·真菌(酵母)专用蛋白酶抑制剂
编号：BTN130529
英文名称：Protease Inhibitor for Yeast
规格：1mL
本产品为酵母细胞蛋白酶抑制混合液，溶剂为DMSO。专门用于裂解各种酵母细胞时，抑制各种内源和外源蛋白酶活性，防止蛋白质降解。

产品特点：
1. 即开即用，不需要单独购买每个成分再配制。
2. 止蛋白质降解。本产品抑制谱广，能特异性抑制丝*酸蛋白酶、半胱*酸蛋白酶、天门冬*酸蛋白酶及金属蛋白酶等各种蛋白酶活性。
3. 本产品为优化的酵母蛋白酶抑制剂混合溶液。与各种细胞裂解液兼容，在裂解液中加入1/100体积即可。

储存条件：低温运输，4℃保存，有效期两年。

·大肠杆菌BL21-CondonPlus(DE3)-RIPL化学感受态细胞
编号：BTN140378
英文名称：E.coli BL21-CondonPlus(DE3)-RIPL Chemical Competent Cell
规格：10*100μl
本产品来源于Stratagene公司的BL21-Gold菌株，缺少Lon蛋白酶和OmpT蛋白酶，从而减少对重组蛋白的降解，补充大肠杆菌缺乏的4 种稀有密码子(AGA、AUA、CCC、CUA)对应的tRNA(argU、ileY、proL、leuW)，提高外源基因，尤其是富含AT-或GC-的真核基因在原核系统中的表达水平。该菌株染色体整合了λ噬菌体DE3 区(DE3 区含有T7 噬菌体RNA聚合酶)，可同时表达T7 RNA聚合酶和大肠杆菌RNA聚合酶，可用于pET系列，pGEX，pMAL等质粒的蛋白表达，同时具有四环素，*霉素，链霉素，壮观霉素抗性。本产品由特殊工艺制作，经pUC19质粒检测转化效率高达108cfu/μg。
菌株基因型为：F- ompT hsdS(rB-mB-)dcm+ Tetr galλ(DE3)endA Hte [argU proLCamr] [argU ileY leuW Strep/Specr]。

储存条件：干冰运输、-80℃保存，有效期半年。

自备试剂：目的DNA、SOC或LB培养基等

使用方法：
1. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μl，可以根据实际情况分装使用。
以下实验以100μl感受态细胞为例。
2. 待感受态细胞融化后，向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA，通常100μl感受态细胞能够被1 ng超螺旋质粒DNA 所饱和)，用移液器轻轻吹打混匀，冰浴30分钟。
3. 42℃热击90秒，迅速将离心管转移到冰浴中，冰上静置2-3分钟。
4. 每个离心管中加入450μl 无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素)，混匀后置于37℃摇床，150rpm 振荡培养45分钟使菌体复苏。
5. 根据实验需求，取适量已转化的感受态细胞，加到含有相应抗生素的LB 固体琼脂培养基上，用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开，将平板置于37℃直至液体被吸收，倒置培养，37℃培养12-16小时。

注意事项：
1、涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA 总量较多，可取少量转化产物涂布平板；若转化的DNA 总量较少，可取200-300μl转化产物涂布平板。若预计的克隆数较少，可通过离心(4,000rpm ，2分钟)后吸除部分培养液，悬浮菌体后将其涂布于平板中。
2、新制备的固体培养基不易涂干，可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。
3、涂布剩余的菌液可置于4℃保存，如果次日的转化菌落数过少，可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。
4. 诱导时，IPTG浓度可选(0.1-2mM 均可)。
5. 为获得需要量的蛋白，最佳诱导时间，温度，IPTG浓度需实验者优化。


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