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沉淀法miRNA分离试剂盒

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  • 钦诚生物
  • QC90203
  • 上海
  • 2025年07月13日
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      一年

    • 供应商

      钦诚生物

    • 保存条件

      4°保存

    • 规格

      50次

    它具有下列特点:
    1. 从总 RNA 中直接分离纯化小 RNA,不需要使用离心吸附柱。得到的小 RNA 长度大部分在 200 nt 以下,包括 5S RNA、tRNA、 miRNA、 Pre-miRNA、pri-miRNA、siRNA、shRNA 和 snRNA 等。
    2. 操作简单快速,整个过程只需要约 30 分钟。
    3. 小 RNA 纯净,OD260/280 一般都在 1.9 以上。
    4. 可用于 RT-PCR、miRNA 标记、microarray 等后续实验。
    5. 此方法能去除 90%左右的大 RNA,但会有少量残留大 RNA,如果需要 纯度更高,可以选择 PAGE 回收法。
    规格及成分 成 份 50 次包装 溶液 A 5 mL 溶液 B 10 mL 溶液 C 50 mL RNase-free 水 10 mL 使用手册 1 份
    运输及保存 常温运输.4℃保存,有效期一年。
    自备试剂 RNase-free 塑料离心管。
    使用方法
    1. 在纯化好的 100 uL 总 RNA(含大 RNA 和小 RNA)中,加入 50 uL 溶液 A,振荡 30 秒混匀。如果 RNA 样品体积不足 100 uL,可以用 RNase-free 水补足,如果体积超过 100 uL,可以用本公司核酸浓缩剂 浓缩到 100 uL。
    2. 室温 12000-15000 g 离心 30 分钟。小 RNA 在上清中,大 RNA 在沉 淀中。注意:离心时间不能短于 30 分钟,否则大 RNA 沉淀不充分。
    3. 小心将上清液转移到干净的 1.5 mL RNase-free 塑料离心管中。留下的 沉淀可以用 75%乙醇洗涤后做大 RNA 电泳对照用。
    4. 在上清液中加入 200 uL 溶液 B,振荡 30 秒混匀。
    5. 室温 12000-15000 g 离心 10 分钟,小心弃上清。由于溶液 B 中有惰 性的助沉剂,所以得到的小 RNA 沉淀肉眼可见。
    6. 加入 1 mL 溶液 C,震荡数秒。
    7. 室温 12000-15000 g 离心 10 分钟,小心弃上清。
    8. 短暂离心数秒,小心吸弃残留液体(约 50 uL 左右)。
    9. 在沉淀中(含小 RNA)加入 30-100 uL RNase-free 水,吹打溶解即 得小 RNA 溶液。注意:不能只吹打管底部分,还需要吹打整个离心管管 壁的离心面部分,因为上面也有有小 RNA 沉淀。 10. 最好先 PAGE-银染检测小 RNA 纯度再使用。

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