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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
527
- 英文名:
Endotoxin removing Kit
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
常温运输,4℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产供应内毒素清除试剂盒批发,我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:内毒素清除试剂盒批发
编号:BTN160692
品牌:百奥莱博
产地:国产|进口
规格:1.5mL
英文名:Endotoxin removing Kit
本试剂盒使用的是一类高效内毒素清除树脂,它以修饰过的多粘菌素B(PMB)为配体,进行特异性的内毒素清除。经此专用亲和介质纯化,样品最终的内毒素水平可低于0.1 EU/mL。
细菌内毒素(脂多糖,LPS)是革兰氏阴性细菌细胞壁的主要成分。人们在研究革兰氏阴性菌血症和内毒素血症的过程中,发现细菌内毒素在其中起着关键的作用,内毒素使机体免疫功能严重受损,进一步的发展可能引发脓毒性休克,弥散性血管内凝血,急性呼吸窘迫综合症,全身炎症反应综合症或致命性多器官功能衰竭。因此,内毒素的清除对于人类疾病治疗的注射型药品、生物制品等都是必须的,尤其对于基因药物、蛋白药物、单抗克隆药物、治疗性疫苗、小分子化学药物等生物制品的下游纯化处理来说就显得非常重要。
试剂盒特点:
1.高稳定性,高去除效率。
2.高结合力:> 2000,000 EU/mL。
3. pH范围为5-10时,亲和介质对内毒素的清除率在92%以上;pH值在7-8时,清除效率最高。
4. 无需恒流泵即可调节流速。
5. 重复使用 5次不会改变柱子效果。
6. 使用方便,试剂盒中提供无热原缓冲液,无热原收集管及无热原枪头等。
7.适合纯化对象为蛋白,多肽,抗体,多糖等。
8.可耐受试剂:20% DMSO,20% 乙醇,20% 甘油;1 M 尿素,300mM咪唑; 0.05% 吐温-20,10mM DTT等。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 专用亲和介质 | 1.5mL预装柱 |
| 再生缓冲液 | 125ml |
| 平衡缓冲液 | 125ml |
| 流速控制器 | 1个 |
| 无热原接收管 | 1 包(3 支/包) |
| 无热原枪头(1mL) | 2 包(6 支/包) |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输,4℃保存,有效期一年。
使用方法:
1.样品处理:样品的pH值和离子强度在内毒素去除的过程中起着重要作用。虽然结合内毒素的pH范围在6-9,但是7-8的pH范围是纯化的最佳范围。合适的离子浓度可以降低非特异性吸附,0.15-0.5 M NaCl的条件可以得到一个很好的去除效率和低的样品损失。所以,纯化之前可以使用处理过的*化*,0.1 M的*氧化*或0.1 M盐*(代"酸")来调节离子强度或pH值。
2.活化亲和介质:将预装柱置于铁架台,垂直固定,去除预装柱顶部的盖子,打开流速控制器,使保护液在重力作用下流干,加入5mL的(预冷)再生缓冲液,调节流速控制器,保持流速在0.25mL/min(或者10滴/min),待再生缓冲液流干,再加入5mL 再生缓冲液,再重复操作两次,确保体系保持无热原(即内毒素)存在。即使是第一次使用也必须进行这一步操作。这步操作大约需要60分钟完成。
3. 平衡亲和介质:活化完毕后,加入6mL的(预冷)平衡缓冲液,调节流速控制器,保持流速在0.5mL/min,流干平衡缓冲液,再按此操作重复两次。这步操作大约需要40分钟完成。
4.内毒素清除:将流速控制器关闭,使用无热原枪头将样品加入,打开控制器,控制流速不高于0.25mL/min,流出液体积达到1.5mL后,使用无热原接收管接受样品,样品流干后,再加入1.5mL-3.0mL的(预冷)平衡缓冲液淋洗,收集淋洗液。检测样品浓度及内毒素水平。
5. 再次使用:如果流出样品内毒素水平未能达到预期值,需要将预装柱重新再生,按照步骤1 重新再生,然后上样纯化。
6. 储存条件:如果预装柱用完后需要保存,先用10mL 平衡缓冲液平衡柱子,待平衡液流干,加入1.5mL的再生缓冲液(含0.02%的叠氮化*)。
关于内毒素清除试剂盒批发的更详细说明,请致电我公司咨询,我们将以最饱满的热情为您提供解答,此外,我公司专业供应下列产品:
·粪便RNA柱式提取试剂盒
编号:BTN101109
英文名称:Fecal RNA column Extraction Kit
规格:50次
由于粪便中有机质含量丰富,对RT-PCR等后续反应有极大的抑制作用,所以从粪便中提取高纯度的RNA一直是十分棘手的问题。本产品是在粪便RNA提取试剂盒基础上开发的柱式粪便RNA提取产品。
试剂盒特点:
1. 操作比非柱式法更加简单快速,处理一个样品只需要约十几分钟。
2. 去污染效果好,RNA 纯度更高,平均OD260/280一般都在2.0左右。
3. 得到的RNA可直接用于RT-PCR、Northern杂交、cDNA 合成等实验。
4. 性价比高于进口的柱式粪便RNA提取产品。
5. 试剂无毒无害,环保。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 溶液A | 50ml |
| 酸洗玻璃珠,400μm | 25g |
| 溶液B | 15ml |
| 溶液C | 50ml |
| 离心吸附柱 | 50套 |
| 通用洗柱液 | 50ml |
| RNA洗脱液 | 10ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输和保存,有效期两年。
使用方法:
1.在自备的3-5mL离心管中称取0.5-1 g 粪便,加入0.5g 玻璃珠和1mL溶液A,盖紧离心盖后震荡器上剧烈震荡5-10分钟。注意:如果放置在低温,溶液A可能会产生沉淀,使用前必须放在65℃水浴使沉淀彻底溶解并充分摇匀后再取用。
2. 稍微静置后将上清液(一般呈棕色)转移至一个干净的1.5mL塑料离心管中。所取上清液不要超过1mL,否则后续操作没有足够空间。
3.在离心管中加入0.3mL的溶液B和0.2mL自备*仿,在振荡器上振荡30秒混匀。振荡器振荡时必须使管底溶液震荡起来。
4.室温12000rpm离心3~5分钟。
5. 将上清液(约0.6mL)转移到另一干净的1.5mL塑料离心管中,下层有机相和中间层含有DNA、蛋白质和其他杂质,避免触及或吸取。最好留下100μl上清液不取。
6.在上清液中加入等体积的溶液C,用手上下颠倒或振荡器振荡30秒混匀,此时溶液呈均匀的乳浊状。
7.室温12000rpm离心3分钟,两相间将有白色膜状物(蛋白质)形成。
8. 将一半的溶液转移到离心吸附柱中,套入收集管中厚12000rpm室温离心半分钟,弃收集管中的穿透液。
9. 将剩下的一半溶液转移到同一离心吸附柱中,套入收集管中后12000rpm室温离心半分钟,弃收集管中的穿透液。
10. 加0.7mL 通用洗柱液,套入收集管中后室温离心半分钟,弃收集管中的穿透液。
11. 加0.3mL 通用洗柱液,套入收集管中后室温离心半分钟,弃收集管中的穿透液。此步可以省略。
12. 将离心吸附柱套入收集管中后室温离心半分钟,弃含穿透液的收集管。此步干甩十分重要,否则残留的乙醇会影响RNA的使用。
13. 将离心吸附柱套入到一个自备的RNase-free 收集管中,加入30-100μL RNA洗脱液,室温放置1-2分钟。
14. 12000rpm室温离心半分钟,离心管中溶液即为RNA样品,可以立即使用或存放于-80℃待用。
15. RNA 完整性的电泳检测:如果需要做Northern杂交,强烈建议用户使用甲醛变性胶进行RNA电泳,因为非变性胶不能分离所有的RNA分子(BioTechniques,28:414,2000)。
16. RNA产量产率测定:将5-10μl RNA 溶于TE缓冲液中(pH7.5-8.2 之间)检测其在OD260的光吸收。通过光吸收可以得出RNA浓度(1OD260的RNA=40μg/mL),进而计算出RNA的产量(浓度X 体积)和产率(RNA产量/组织用量)。
17. RNA 纯度测定:无污染的总RNA的OD260/OD280一般在1.8-2.1之间(具体数值与其碱基组成和溶液成分等多种因素有关),高于此范围则分别表示样品可能有蛋白质污染,但一般不影响RT-PCR等反应。
内毒素清除试剂盒批发关键词:BTN160692,Endotoxin removing Kit,内毒素清除试剂盒
·碘化丙啶(PI)干粉
编号:BTN130863
英文名称:Propidiumodide,Powder
规格:10mg
PI是一种可对DNA染色的细胞核染色试剂,它在嵌入双链DNA后释放红色荧光。常用于细胞凋亡(apoptosis)或细胞坏死(necrosis)的检测,常用于流式细胞仪分析。尽管PI不能通过活细胞膜,但却能穿过破损的细胞膜而对核染色。PI-DNA复合物的激发和发射波长分别为535nm和615nm。
CAS号:25535-16-4
分子式:C27H34I2N4
分子量:668.39
储存条件:低温运输,-20℃干燥避光保存,有效期一年。
·农杆菌EHA101感受态细胞
编号:BTN161205
英文名称:E.coli EHA101 Rosetta Competent Cell
规格:10×100μL
EHA101菌株为C58型背景,核基因中含有筛选标签-利福平抗性基因rif,为了便于转化操作,此菌株携带一无自身转运功能的胭脂碱型Ti质粒pEHA101(pTiBo542DT-DNA),此质粒含有vir基因,vir基因是T-DNA 插入植物基因组必需的元件。pEHA101(pTiBo542DT-DNA)质粒自身的T-DNA转移功能被破坏,但可以帮助转入的双元载体T-DNA顺利转移。pEHA101(pTiBo542DT-DNA)型Ti质粒含有筛选标签:kan,赋予EHA101菌株卡那霉素抗性,适用于玉米、水稻、烟草等植物的转基因操作。
本公司生产的EHA101化学转化感受态细胞经特殊工艺制作,pK7WGF2质粒(壮观霉素抗性)检测转化效率>104cfu/μg DNA。EHA101农杆菌的基因型是:C58(rifR)TipEHA101(pTiBo542 D T-DNA)(kanR)Nopaline。
产品组成:
| 成分 | 规格 |
| EHA101 农杆菌感受态细胞 | 0.1ml×10 |
| pKWGF2(10ng/uL) | 10μl |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:干冰运输,-80℃保存,有效期一年。
自备试剂:质粒DNA、液氮等。
使用方法:
转化前准备
1. 冰水浴和37℃水浴。
2.液氮或干冰/乙醇混合物。
3. 将抗性平板在28℃培养箱中平衡至少15分钟。
转化方法
1. 取-80℃保存的农杆菌感受态于室温或手心片刻待其部分融化,处于冰水混合状态时插入冰中。
2. 每100μL感受态加1μg(体积不大于10μL)质粒DNA,用手拨打管底混匀,依次于冰上静置5分钟、液氮5分钟、37℃水浴5分钟、冰浴5分钟。
3. 加入700μL无抗生素的LB或YEB液体培养基,于28℃振荡培养2~3小时。
4. 6000rpm离心一分钟收菌,留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块涂布于含相应抗生素的LB或YEB 平板上,倒置放于28℃培养箱培养2-3天(当平板只含有转化所用双元载体抗生素时,28℃培养48小时即可;平板中同时加入双元载体抗生素,20μg/ml rif时,需28℃培养60小时;如果使用的平板含有50μg/ml rif 则需要28℃培养72-90小时)。
注意事项:
1、加入质粒时体积不应大于感受态体积的1/10;质粒不纯或存在乙醇等有机物污染,转化效率急剧下降;质粒增大一倍,转化效率下降一个数量级。
2、混入质粒时应轻柔操作。转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。
3、平板上阳性克隆密度过大时,由于营养不足,阳性克隆生长变慢,菌落变小,为了获得大的菌落,应减少质粒用量。
4、利福平浓度不应高于25μg/mL,过高的利福平浓度不利于农杆菌生长,会降低其生长速度和转化效率。本公司EHA101感受态计算转化效率时所用平板只含有50μg/mL kan,若所用平板含有20μg/mL rif 则转化效率降低到1/2。
5、培养基中加入利福平的目的是防止杂菌生长、筛选农杆菌;根据所用菌株抗性加入链霉素或庆大霉素可防止Ti质粒丢失,但链霉素不利于农杆菌的转基因操作,所以一般培养农杆菌时不考虑链霉素或庆大霉素,Ti质粒丢失的概率极低(可以忽略)。
内毒素清除试剂盒批发关键词:BTN160692,Endotoxin removing Kit,内毒素清除试剂盒
反-4-甲氧基肉桂酸 TIM 943-89-5
BL0941 生物素化羊抗兔IgG抗体
黄素腺嘌呤二核苷酸二*盐 PUC19 84366-81-4
彩虹预染超低分子量蛋白Marker(1.2-45KD) 10次
ARB11425 人载脂蛋白H(Apo-H)elisa检测 Human apolipoprotein h,apo-h ELISA KIT
ARB14236 猪口蹄疫A型抗原(FMD-A-Ag)酶联免疫定量检测
ARB11995 大鼠N端前脑*素(NT-proBNP)代做ELISA实验 Rat n-terminal pro-brain natriuretic Peptide,nt-probnp ELISA KIT
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β-葡聚糖酶 Span 40 9025-70-1
PY02-066 抗生素检定培养基Ⅳ号 250克
CYB163001 羊抗人IgG-FITC(抗全分子)
ARB10422 人丙*(代"酮")酸激酶(PK)酶标法分析 Human pyruvate kinase,pk ELISA KIT
002006 EDTA抗凝羊血 100ml|500ml
ARB14158 人胱硫醚β-合酶(CBS)Elisa方法检测
N-羟基-5-降冰片烯-2,3-二甲酰亚胺 Citrinin 21715-90-2
ARB11062 人转化生长因子β2(TGF-β2)代做ELISA实验 Human transforming growth factors β2,tgfβ2 ELISA KIT
枸橼酸*抗凝剂(4%) 100ml
N,N-双(2-羟yi基)甘*酸 Bismuth sulfate 150-25-4
BTN60803 可保种型蓝白T载体 Blue-White Vector T
亮绿染色液(2%) 100ml
北京百莱博科技有限公司专业生产供应销*(代"售")生物试剂、化学试剂、抗原抗体、血清血浆、Elisa试剂盒,更多试剂产品需求,欢迎来电咨询选购内毒素清除试剂盒批发。
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