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- 详细信息
- 技术资料
- 库存:
502
- 英文名:
Bacteria DNA column extraction kit
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
2~8℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博供应的北京现货柱式细菌DNA提取试剂盒哪里买用于生化科研试验,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多柱式细菌DNA提取试剂盒等DNA纯化产品请联*(代"系")我司咨询订购。
名称:北京现货柱式细菌DNA提取试剂盒哪里买
规格:50次
品牌:百奥莱博
英文名:Bacteria DNA column extraction kit
产地:国产|进口
本试剂盒可以用于绝大多数革氏阳性和阴性细菌基因组DNA的快速提取。
试剂盒特点:
1. 操作简单,整个过程不到20分钟。
2.产率一般在5-20μg/mL过液培养的饱和菌液(108-109个细胞)。
3. OD260/280一般在1.8以上,可直接用于PCR、酶切、杂交等实验。
4. DNA片段长度一般在40-50 Kb左右。
5. 每次提取可以处理0.1-1.5mL的细菌,也可以使用菌落。
6. 价廉物美,与国外同类产品相比质量相当,但价格便宜。
7. 安全无毒,本试剂盒对人体无害,无腐蚀性和刺激性气味。
8. 本产品分A型(无溶菌酶,适用于革氏阴性细菌)和B型(含溶菌酶,适用于革氏阳性细菌)。
试剂盒组成:
| 成分 | A型 | B型 |
| 溶菌酶干粉 | 无 | 600mg |
| 溶液A | 15ml | 15ml |
| 溶液B | 7.5ml | 7.5ml |
| 溶液C | 30ml | 30ml |
| 离心吸附柱 | 50套 | 50套 |
| 通用洗柱液 | 50ml | 50ml |
| DNA洗脱液2.0 | 10ml | 10ml |
| 说明书 | 1份 | 1份 |
储存条件:常温运输及保存(溶菌酶需要-20℃保存),有效期一年。
使用方法:
注意:溶液A和溶液B容易产生沉淀,溶液B十分粘稠,均需要放置在65℃预热使沉淀溶解、粘稠度降低,用前充分摇匀。
一: 对革氏阴性细菌样品,只需用A型
1. 将0.1-1.5mL过夜培养的菌液转移到1.5mL离心管中,12000rpm室温离心1min沉淀细菌,弃上清。
2. 加入300μL预热的溶液A到细菌沉淀中,充分吹打均匀。
3. 再加入150μL预热的溶液B到离心管中,颠倒数次混匀。此时溶液中可能有白色丝状悬浮物产生。由于溶液B比较粘稠,可以采取称量方法取用,150μL约等于150-160mg。也可以将1mL枪头剪去一截再吸取。
4. 65℃放置3~5分钟。如果室温放置,DNA产量会降低10-20%。
5. 加入200μl自备*仿,震荡混匀10-30秒,此时溶液将呈乳白色。
6. 12000rpm室温离心2分钟。此时上清液将变得透明,中间层有白膜。小心转移上清液到一个新的1.5mL塑料离心管中,避免触及中间层的白膜。
7. 加入1.5倍体积(约0.7mL)的溶液C,颠倒混匀后全部转移到离心吸附柱中,室温放置至少2分钟。
8. 12000rpm室温离心1分钟,DNA将吸附在离心吸附柱的膜上,倒弃收集管中的穿透液。
9. 将0.5mL通用洗柱液加入离心柱中,12000rpm室温离心1分钟,弃穿透液。
10. 重复上步操作一次。
11. 空甩半分钟去除残留液体,将离心吸附柱转移到新的1.5mL离心管中。
12. 加50-100μL通用洗脱液,室温放置3~5分钟。
13. 12000rpm室温离心1分钟即得DNA溶液。
14. 由于本产品使用的离心吸附柱吸附DNA的能力较强,可以重复上步操作一次以便得到更多的DNA。
15. 直接取5-10μL电泳检测DNA,其余放冰箱备用。
二: 对革氏阳性细菌样品,需用B型(含溶菌酶)
1. 将0.1-1.5mL过夜培养的革氏阳性细菌12000rpm室温离心1分钟后,重悬于0.6mL溶菌液中(溶菌液配制:30mL无菌水+600mg溶菌酶,配制后最好分装成小管并放-20℃长期保存,每次只用一小管),颠倒混匀5-10次后放37℃保温至少30分钟(有的革氏阳性菌种可能需更长时间,自己摸索)。
2. 12000rpm室温离心10分钟,小心弃上清。
3.后续处理接上面的革氏阴性细菌提取步骤中的第2步。
三:其他注意事项
1.可以直接使用细菌菌落提取DNA,操作时直接将细菌菌落挑入到溶液A中,后续操作同上。
2.从单个菌落中提取到的DNA较少,所以只用30μL通用洗脱液洗脱。
使用效果:
图注:用本产品提取1.0mL过夜培养的E.coli Tg1细菌,DNA最后溶于100μL TE中,取20μL上样。M表示全长的λDNA,其余均为提取的样品DNA。
想要了解更多关于北京现货柱式细菌DNA提取试剂盒哪里买的价格、品牌、厂家、说明书、促销信息,请和我们联*(代"系")。此外我公司还销*(代"售")下面的产品:
·FTA卡血液样品DNA提取试剂盒
编号:BTN130933
英文名称:FTA blood sample DNA extraction kit
规格:50次
·糖原干粉(分子生物学级)
编号:BTN131189
英文名称:Glycogen Powder
规格:1g
本产品为分子生物学级糖原干粉。不含DNase,RNase,可以用作沉淀DNA或RNA的辅助沉淀剂。
储存条件:室温运输和保存,有效期一年。
·Helly固定液
编号:BTN131224
英文名称:Helly Fixative Solution
规格:250mL
Helly固定液是由Zenker固定液改进而来的混合型固定液(把其中的乙酸换成甲醛)。该固定液是白细胞颗粒的优良固定剂,因此对白细胞或造血器官如骨髓,脾脏及肝脏等组织的固定,均可采用Helly固定液固定。
产品特点:
1.Helly 固定液是骨髓、脾、肝等造血器官的良好固定剂。
2.此固定液亦可保存线粒体,染色前需用碘去汞。
3.固定时间一般需要10-12小时。
产品组成:
| 成分 | 规格 |
| 溶液A | 2L |
| 溶液B | 100ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输和保存,有效期一年。
使用方法:
1.配制适量体积的Helly固定液,按照20:1的比例将溶液A和溶液B混合,搅拌均匀,所得溶液即为Helly固定液。因溶液B加入到溶液A中24小时后即生成沉淀而失效,所以Helly固定液需要即配即用。
2.标本修块,置入Helly固定液内固定12~24小时(根据样品材料、大小不同,固定时间可能会有较大差异)。
3.固定后,用流水冲洗12小时,常规方法脱水、透明。
4.对于用升*(代"汞")固定或含有升*(代"汞")混合固定液的切片,切片脱蜡后需脱汞(浸入5%碘酒精10秒),脱碘(5%硫代硫*(代"酸")*),然后流水冲洗,染色。
北京现货柱式细菌DNA提取试剂盒哪里买关键词:Bacteria DNA column extraction kit,柱式细菌DNA提取试剂盒,BTN60802A
·2%明胶溶液(PCR级)
编号:BTN70905
英文名称:Gelatin Solution,PCR Grade
规格:1.5mL
大量实验显示一定比例的明胶能够促进PCR反应。本产品为2%的明胶溶液,按1/5到1/20(具体取决于PCR反应体系)的比例加入到PCR反应体系中,可以提高PCR的效率。
储存条件:低温运输、-20℃保存,有效期一年。
·四氮唑蓝(NBT)
编号:BTN100832
英文名称:Gelatin Solution,PCR Grade
规格:250mg
NBT即四氮唑蓝,分子式为C40H30N10O6Cl2,分子量为817.6,CAS号为298-83-*(代"9")。本产品为黄色粉末,在水中的溶解度为10mg/mL,可以稳定保存1-2周。常和BCIP配成混合液,是碱性磷酸酶底物之一。
储存条件:常温运输,4℃避光保存,有效期一年。
·即用型荧光定量PCR试剂盒
编号:BTN90408
英文名称:Instant Fluorescent qPCR Kit
规格:1mL
本产品是基于荧光染料检测的即用型PCR试剂盒,可以对靶片段进行实时定量PCR分析。产品含有经过优化的缓冲液组分、Taq DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2及新型荧光染料DNAgreen等所有实时定量PCR所需要的成分,用户只需加入模板和引物即可进行实时定量PCR反应和HRM分析,具有广泛的用途。
产品特点:
1. 方便,用户只需准备模板和引物既可以进行实时定量PCR实验和HRM(High Resolution DNA Melt Curve Analysis)分析。而基于SYBR Green I和LC Green染料的qPCR mix则不能同时用于上述两种实验。
2. 使用第三代饱和型荧光染料,信号强,不会抑制PCR反应。
3.快捷,即用型的预配液使加样操作步骤大大简化,避免了交叉污染,降低实验误差。
4. 各成分的浓度和比例都经过精心优化,反应的灵敏度高,特异性强。能检测到浓度为50拷贝/mL的靶分子。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| Taq DNA聚合酶(5U/μL) | 100μl |
| 易错PCR Mix,10× | 300μl |
| 易错PCR专用dNTP,10× | 300μl |
| MnCl2,5mM | 300μl |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,保存期限为6个月。
使用方法:
1.以20μl的qPCR反应体系为例:在一干净的PCR管中,加入下列成分:
| 反应体系成分 | 20μl体系 | 终浓度 |
| qPCR MagicMix,2× | 10μl | 1× |
| 自备引物一 | xμl | 0.1-0.5μM |
| 自备引物二 | xμl | 0.1-0.5μM |
| 自备模板 | xμl | |
| 自备ROX | 2μl | (可以不加) |
| 补超纯水到 | 20μl |
放入荧光PCR仪中进行扩增,并在退火或延长步骤中记录荧光信号。
注意:
a)通常引物浓度以0.2μm可得到较好结果,可以终浓度0.1-1.0μm作为设定范围的参考;通常DNA模板的量以10-100 ng基因组DNA或1-10 ng cDNA为参照,因不同物种的模板中含有的目的基因拷贝数不同,可对模板进行梯度稀释,以确定最佳的模板使用量。
b)ROX 校正染料:如果使用ABI公司的7500,7700和7900三种型号的荧光PCR仪器,则需用自备的ROX进行Ct值校正。对ABI 7700和7900,ROX的最佳浓度为1×(即在每20μl反应体系中加2μl 10×ROX)。对ABI 7500,ROX的最佳浓度为0.05-0.1×(每20μl反应体系加0.1-0.2μl 10×ROX;也可将10×ROX稀释到1×,然后每个反应体系加入1-2μl 1×ROX)。ROX会在溶解曲线中产生噪音,因此,如果出现了杂峰,将软件中“Passive Reference Dye”中的“ROX”选项取消打勾,然后重新分析数据。
对于iCycler IQ,MJ Opticon,MJ Chromo4,MX3000,MX4000,RotorGene3000,RotorGene 6000和LightCycler 480等型号的荧光PCR仪器,ROX不是必须的,但加入的话也不会影响整个PCR分析。
2. 循环步骤:根据扩增子的性质和仪器性能,从以下三个过程中任选一个进行扩增。
两步快速循环法:适用于引物Tm值设计为60℃的反应
| 循环步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
| 酶活化 | 95℃ | 10min | 1 |
| 变性 | 95℃ | 15s | 35-40 |
| 退火&延伸 | 60℃ | 1min |
注意:本产品所采用的热启动酶须在预变性95℃、10 min条件下实现酶的活化。退火温度请以60-64℃作为设定范围的参考,发生非特异性反应时,可提高退火温度。
三步快速循环法:适用于延伸步骤温度高于退火步骤的PCR(长引物PCR)
| 循环步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
| 酶活化 | 95℃ | 10min | 1 |
| 变性 | 95℃ | 10s | 35-40 |
| 退火 | 56-64℃ | 30s | |
| 延伸 | 72℃ | 32s |
注意:
·退火温度:建议采用两步法PCR,退火温度60℃进行反应。若提高反应特异性,可提高退火温度,以60-64℃作为设定范围的参考。若因使用Tm值较低的引物等原 因,得不到良好的实验结果时,可尝试进行三步法PCR扩增,三步法的退火温度请以56℃-64℃的范围作为设定参考。
·延伸温度:延伸温度设为72℃通常可以提高扩增效率。但是,对于AT含量大于70%的扩增子来说,延伸温度设为60℃为宜。
通用循环法:这种循环方法适用于几乎所有的荧光PCR仪,也适用于用快速循环法不能扩增的模版。
| 循环步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
| 酶活化 | 96℃ | 10min | 1 |
| 变性 | 96℃ | 15s | 35-40 |
| 退火&延伸 | 60℃ | 1min |
3. 数据采集
具体操作按所用仪器推荐的流程进行。本产品中所含的荧光染料在没结合DNA时,最大吸收光谱在471nm,结合DNA时的最大吸收光谱在500nm,最大发射光谱在530nm。
注意事项:
1. 如果使用iCycler,可以不加入FAM。
2. 如果使用Roche LightCycler的玻璃毛细管进行PCR,需加入终浓度为0.5mg/mL的自备BSA。
北京现货柱式细菌DNA提取试剂盒哪里买关键词:Bacteria DNA column extraction kit,柱式细菌DNA提取试剂盒,BTN60802A
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