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- BTN160901-MFA
- 北京
- 2025年07月13日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
880
- 英文名：
E.coli DH10B Electroporation-Competent Cell
- 保质期：
半年
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件：
-80℃
特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")北京现货大肠杆菌DH10B电击感受态细胞特价优惠，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。
名称：大肠杆菌DH10B电击感受态细胞
英文名：E.coli DH10B Electroporation-Competent Cell
编号：BTN160901
产地：国产|进口
规格：50μL×5
本电击感受态细胞只能用于电击转化，不能用于热激转化。DH10B菌株来源于MC1061菌株，mcrA、mcrBC 及mrr突变使DH10B菌株适合于克隆富含甲基胞嘧啶或甲基腺嘌呤的DNA(无论真核生物还是原核生物的基因组DNA 都能被高效的转入DH10B中)。recA1和endA1的突变有利于插入DNA的稳定和高纯度质粒DNA的提取。φ80dlacZΔM15 标记的存在使DH10B可用于蓝白斑筛选，rpsL 赋予其链霉素抗性。DH10B电击感受态细胞适用于大质粒的构建或者各种文库构建。本感受态细胞经特殊工艺制作，经 pUC19质粒检测，转化效率>1010cfu/μg。
菌株基因型为：[F-mcrA Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC)φ80lacZΔM15 ΔlacX74 recA1endA1 araD139 Δ(ara，leu)7697 galE15 galK λ- rpsL nupG。
储存条件：干冰运输、-80℃保存，有效期半年。
自备试剂：目的DNA、SOC培养基等。
使用方法：
1. 将0.1 cm的电击杯和杯盖从储存液中拿出倒置于干净的吸水纸上5分钟，待其沥干水分，正置5分钟，使乙醇充分挥发，待乙醇挥发干净立即插入冰中，压实冰面，电极杯顶离冰面0.5 cm以方便盖上杯盖，冰中静置5分钟充分降温。
2. 取-80℃保存的DH10B电击感受态细胞插入冰中5分钟，待其融化，加入目的DNA(质粒或连接产物)并用手拨打EP 管底轻轻混匀，避免产生气泡，立即插入冰中。(注：对于质粒，测定转化效率使用1μl 10 pg/μL的对照质粒pUC19；对于连接产物，请用乙醇沉淀DNA后加入适量TE缓冲液(10mM Tris HCl，pH7.5; 1mM EDTA)重悬，DNA浓度不超过100 ng/μL，体积不超过5μL/50μL感受态。)
3. 用 200μl 枪头(用刀切除0.5 cm 枪尖)将感受态-DNA 混合物快速移到电击杯中，避免产生气泡，盖上杯盖。
4.启动电转仪，设置参数：C=25 μF，PC=200 Ω，V=2.4 kV(此为BioRad电转仪推荐参数，也可按所用电转仪推荐的参数操作)，将电击杯快速放入电转槽中，电击完成快速插入冰中。
5. 向电击杯中加入700μL 不含抗生素的无菌培养基 SOC.，混匀后转移到空EP 管中，37℃，200rpm 复苏60分钟。
6. 5000rpm离心一分钟收菌，重悬后取100-200μL 涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。平板上(因菌量较大，若全部涂板请选用直径15cm培养皿2-5个)。将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。如果进行蓝白斑筛选操作，将平板放 37℃培养至少13小时。
注意事项：
1. 加入DNA时体积不应大于感受态体积的1/10。
2.电击感受态细胞加入电击杯应避免产生气泡，气泡会增加弧光放电风险。
3. 当 DNA 不纯或存在盐，乙醇，蛋白及缓冲液等污染时，转化效率急剧下降。
4.电击杯里的离子可增加溶液的电导，增大在含有细胞和DNA的溶液中产生电流和弧光放电的风险。
5. 若转化大质粒或想获得较高转化效率，推荐使用高纯质粒提取试剂盒提取质粒。质粒增大一倍，转化效率下降一个数量级。
6. 对于连接产物转化，最好转化前乙醇沉淀DNA后用适量TE缓冲液(10mM Tris HCl,pH7.5; 1mM EDTA)重悬产物，保证DNA浓度不超过100 ng/μL。过高浓度连接产物或过大体积连接产物会降低转化效率，增加弧光放电的风险。
7. 混入质粒时应轻柔操作，吸取感受态细胞时避免用力过猛，以免剪切力过大损伤细胞膜，降低转化效率。
8.转化高浓度的质粒或连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。
9.电击感受态细胞最好保存在-80℃以下，高于-80℃超期储存会导致转化效率会下降。
关键词：大肠杆菌DH10B电击感受态细胞,BTN160901,E.coli DH10B Electroporation-Competent Cell
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| 编号 | 名称 |
| BTN121112 | 大肠杆菌Stbl3化学感受态细胞 |
| BTN90501 | Tth DNA聚合酶 |
| BTN131029 | 胰蛋白酶(质谱级) |
| BTN151103A | 超级电泳液(含染料) |
| BTN60906 | cDNA第一链合成试剂盒(逆转录试剂盒)(RT试剂盒) |
| BTN140587 | B-5固定液 |
| BTN121004 | 大肠杆菌Rosetta(DE3)化学感受态细胞 |
| BTN60903 | Tris盐*(代"酸")溶液(1M,pH7.5)(不含RNase) |
| BTN101118 | 水样病毒沉淀剂 |
| BTN160680 | 无缝克隆试剂盒 |
| BTN160801 | 大肠杆菌TG1电击感受态细胞 |
| BTN80911 | 蛋白酶K溶液 |
| BTN100879 | 过硫*(代"酸")铵(电泳级) |
| BTN100101 | 镍柱介质(镍-琼脂糖凝胶) |
| BTN130430 | 大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ |
| BTN81224 | BCIP/NBT显色试剂盒 |
| BTN70503S | DNA marker(200-5000bp) |
| BTN120693 | 丝裂霉素C溶液 |
| BTN131122 | 考马斯亮蓝R-250 |
| BTN100939 | 福林酚试剂 |
| BTN160227 | 甲醛-乙酸-乙醇固定液(FAA) |
| BTN140651 | 12mL亲和层析柱 |
| BTN80906 | 一站式miRNA柱式大提试剂盒 |
| BTN70704B | 预染蛋白Marker(43～200kD) |
| BTN131038 | dUTP溶液，100mM |
| BTN130609 | 一步式RT-PCR Mix |
| BTN100940 | 石蜡包埋组织全基因组扩增试剂盒 |
| BTN111008 | 非酶多糖清除剂(DNA专用) |
| BTN80901 | 柱式动物RNA大量提取试剂盒 |
| BTN100102A | His标记蛋白质微量纯化套装 |
| BTN100839 | PCR级甲酰胺 |
| BTN120421 | T4 RNA连接酶 |
| BTN131276 | Baker甲醛*中性固定液 |
| BTN130658 | 无机焦磷酸酶(PPase)(酵母) |
| BTN100878 | Western印迹膜封膜液(尼龙膜) |
| BTN81024 | 大肠杆菌DH5α化学感受态细胞 |
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文献和实验的电转化感受态细胞特别耐受电击处理，方便好用，在DNA材料极珍贵、量少时，或构建有代表性文库时，建议采用电转化感受态细胞。ElectroTen-Blue®细胞是目前商品化的电转化感受态细胞中效率最高的，达到>3 x 1010 转化子/μg 超螺旋DNA。此外XL1-Blue，XL1-Blue MRF’，SURE®，ABLE® 和TG1等细 胞也提供电转化形式感受态细胞。SURE® －克隆不稳定 DNA 大肠杆菌DNA修复系统会针对重复序列、二级结构（如Z-DNA）等真核DNA进行重排或删除
质分子量标准(19-119KD) （50次）--每支 280元 五． 秋季部分产品特价促销单 具体产品和价格如下： 一. DNA分子量标准产品: DNA分子量标准 规格 优惠价 DL2000 50次 58元 参照片断（bp）：100 、250、500、750、1000、2000bp Marker1 50次 58元 参照片断（bp）：100 、200、300、400、500、600bp Marker2 50次 58元 参照片断（bp）：100 、300、500
分析。 阈值：是循环开始3～15个循环的荧光信号的标准偏差的10倍，设定在扩增曲线指数增长期。 C(t)值：荧光信号（扩增产物）到达阈值时所经过的扩增循环次数。十、大肠杆菌感受态细胞（E.coli DH5α）制备 1. 前夜接种受体菌（DH5或DH10B），挑取单菌落于LB培养基中37 ℃摇床培养过夜（约16小时）； 2. 取1 ml过夜培养物转接于100 ml LB培养基中，在37 ℃摇床上剧烈振荡培养约
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