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- 百奥莱博
- BTN140385-RUD
- 北京
- 2025年07月05日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
481
- 英文名：
E.coli LBA4404 Chemical Competent Cell
- 保质期：
一年
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件：
-80℃
- 规格：
10×100μL
特别提示：包括农杆菌LBA4404化学感受态细胞在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
产品名称：农杆菌LBA4404化学感受态细胞
英文名称：E.coli LBA4404 Chemical Competent Cell
产品货号：BTN140385
产品规格：10×100μL
本产品为LBA4404农杆菌化学感受态细胞，其具有利福平和链霉素抗性，适用于玉米、烟草等植物的转基因操作，经pCAMBIA2301质粒检测转化效率高达103cfu/μg。
储存条件：干冰运输、-80℃保存，有效期一年。
自备试剂：质粒DNA、液氮等
使用方法：
转化前准备
1.冰水浴和37℃水浴。
2.液氮或干冰/乙醇混合物。
3.将抗性平板在28℃培养箱中平衡至少15分钟。
转化方法
1.取-80℃保存的农杆菌感受态细胞于冰水浴中融化。
2.无菌条件下，向刚刚融化的感受态细胞悬液中加入需要转化的质粒，每100μL感受态细胞加1ug质粒DNA，轻柔混匀。冰水浴中静置10分钟。
3.将离心管置于液氮中速冻5分钟(注：也可以用干冰和无水乙醇混合物替代液氮)。
4.迅速将离心管置于37℃水浴静置中5分钟，不要晃动水面。然后快速转至冰水浴中静置5分钟。
5.加入800μl无抗生素的2×YT或LB液体培养基，28-30℃振荡培养2~3小时。使菌体复苏，表达抗性。
6.5000rpm离心1分钟收菌，保留100μL左右上清，轻轻吹打重悬菌体，均匀涂布到含有相应抗生素的LB固体培养基平板上，待平板中的液体完全吸收后，倒置平板，28-30℃培养48-72小时。
我公司销售的农杆菌LBA4404化学感受态细胞北京供应商，质量上佳，价格普惠，欢迎广大新老客户踊跃订购。
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文献和实验相关专题 DNA连接与转化 农杆菌感受态细胞的制备 1.挑取少许农杆菌LBA4404，接种于5ml LB液体培养基 (含50mg/L STR)中，28℃、200r/mim培养过夜。 2.取2ml培养物于LB液体培养基 (含50mg/L STR) 中继续培养，直至OD800 为0.5左右。 3.将培养物置冰浴中30min，4℃、5000r/min、离心5min，弃去上清液。 4.用10ml冷
mg/l +6-BA 3 mg/l，500ml （固体），分装在250ml三角瓶中，每瓶100ml；高压灭菌 抗生素母液：Kan 100mg/ml 5ml ; Cb 500mg/ml 5ml 抽滤灭菌，分装在Ep 管中，每管1ml, -20℃保存。 实验材料】：烟草无菌苗叶片。 【方法】： 1. 取普通烟草无菌苗叶片，用锋利手术刀片切去边缘和主叶脉，叶片切成0.5 cm见方的小块（使四周均有伤口），备用。 2. 取培养过夜的农杆菌LBA
室完成。 1.2 农杆菌菌株 大肠杆菌DH5α为受体菌，克隆质粒为PUC19，植物表达载体为PROKⅡ，根癌农杆菌菌株LBA4404,由中国科学院北京微生物所提供。具有ACC脱氨酶基因，长度为1kb,位于表达载体pROKⅡ35s上。 1.3 实验方法 1.3.1 哈密瓜无菌苗的获得 分别取皇后、伽师瓜种子去皮,70%的酒精溶液浸泡1min,再用0.1%的升汞溶液消毒6～
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