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- 2026年01月06日
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- 英文名：
CopyControl™ BAC Cloning Kit
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大量
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-70℃
| CCBAC1B | CopyControl™ BAC Cloning Kit (BamH I) 1 Kit |
| CCBAC1H | CopyControl™ BAC Cloning Kit (Hind III) 1 Kit |
| CCBAC1E | CopyControl™ BAC Cloning Kit(EcoR I ) 1 Kit |
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文献和实验Construction of BAC Libraries：Construction of a BAC library
: Megabase-size DNA in microbeads 50 ul 10X Hind III reaction buffer 10 ul BSA (10 mg/ml) 1.0 ul SPD (40mM) 5 ul ddH2 O 29 ul (10 X Hind III reaction
将基因组DNA用限制性内切酶（常用EcoR I、BamH I或者Hind III）来消化基因组DNA，然后通过脉冲场电泳找到合适长度的DNA片段（比如100kb-150kb），随后透析回收DNA。需要注意：（1）电泳时，要选用合适的DNA Ladder，以保证电泳后可以准确定位所需分子量的DNA。（2）电泳以后，应尽量缩短用紫外光照射目标DNA的时间，否则会显著降低克隆效率。（3）回收DNA的时候，应该要避免过度离心，以防止DNA被剪切，降低文库质量。三、载体的选择目前，常用的基因组文库载体有黏粒
的pIndigoBAC-5、pCC1BACTM)，平均来说，合适的片段长度为120kb-300kb。 构建黏粒基因组DNA文库，研究者需要将基因组DNA用注射器抽打来随机剪切DNA;接着用末端修复酶修复DNA，可以提高DNA连接入载体的效率;然后通过脉冲场电泳或者普通电泳来找到40kb左右的DNA片段，随后使用Epicentre GELase 胶回收试剂盒回收DNA。 构建BAC基因组DNA文库，研究者需要将基因组DNA用限制性内切酶(常用EcoR I、BamH I或者Hind III
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