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- 详细信息
- 技术资料
- 库存:
483
- 英文名:
Blood RNA Column large-scale extraction kit
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
常温运输,4℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")柱式血液RNA大量提取试剂盒多少钱,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:柱式血液RNA大量提取试剂盒
编号:BTN80902
产地:国产|进口
规格:5次
英文名:Blood RNA Column large-scale extraction kit
本试剂盒是在柱式血液RNA提取试剂盒(BTN71202)基础上开发的大提升级产品,专门从动物全血样品中快速提取总RNA。跟柱式血液RNA提取试剂盒相比,本产品具有下列特点:
1.大量提取,每次最多可处理 30mL血液。
2. 操作简单快捷,直接使用新鲜的或冷冻的抗凝全血样品,不需要裂解红细胞等任何预处理步骤,整个提取过程只需要十分钟左右,可以全在室温下进行。
3. 纯度高,OD260/OD280 均在2.0左右,得到的RNA可以直接用于RT-PCR和Northern杂交等研究。
4.产率一般为2-5μg/mL人血。
5.与常用的抗凝剂(包括肝素,EDTA,柠檬酸*,草酸*)兼容。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 溶液A | 100ml |
| 溶液B | 30ml |
| 溶液C | 100ml |
| 大提离心吸附柱 | 5套 |
| 通用洗柱液 | 100ml |
| RNA洗脱液 | 10ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输,4℃保存,有效期一年。
使用方法:
1. 将10-30mL 新鲜或解冻后的抗凝全血加入到50mL塑料离心管中。
2. 12000~15000g室温离心5分钟,弃上清(血浆)。
3. 将20mL溶液A加入到血液细胞沉淀中,用移液枪吹打沉淀使细胞裂解。
4. 将6mL的溶液B和4mL *仿加入到离心管中,剧烈震荡30秒。
5. 12000~15000g室温离心3~5分钟,将上清液(为无色或浅红色)转移到另一干净离心管中。注意:转移的液体不要超过25mL,否则下一步不能加入等体积的溶液C。为防止污染,最好留少量上清液。下层有机相一般呈深红色,中间层为白色,含有DNA,蛋白质和其他细胞破碎物,避免触及或吸取。
6. 加入等体积的溶液C,充分颠倒混匀。
7. 分两次将溶液转移到离心吸附柱中,每次转移后12000~15000g室温离心半分钟,弃穿透液。
8. 加 25mL 通用洗柱液,室温离心半分钟,弃穿透液。
9. 重复步骤 8一次。
10.室温 12000~15000g离心半分钟。此步十分重要,否则残留的通用洗柱液会影响RNA的后续反应。
11. 将离心吸附柱转移到一个新的离心管中,加入1mL RNA 洗脱液,室温放置1-2分钟。
12. 12000~15000g室温离心半分钟,离心管中溶液即为RNA样品,可以立即使用或存放于-80℃待用。
13. RNA 完整性的电泳检测:如果需要做Northern杂交,强烈建议用户使用甲醛变性胶进行RNA电泳,因为非变性胶不能分离所有的RNA分子(BioTechniques,28:414,2000)。
14. RNA产量产率测定:将5-10μL RNA溶于TE缓冲液中(pH7.5-8.2 之间)检测其在OD260的光吸收。通过光吸收可以得出RNA浓度(1 OD260的RNA=40μg/mL),进而计算出RNA的产量(浓度X 体积)和产率(RNA产量/组织用量)。人血RNA产率一般为2-5μg/mL。
15. RNA 纯度测定:无污染的总RNA的OD260/OD280一般在2.0左右(具体数值与其碱基组成和溶液成分等多种因素有关),高于此范围则分别表示样品可能有蛋白质污染,但一般不影响RT-PCR等反应。
疑难解答:
Q: 如何去除RNA样品中的DNA污染?
A:可以使用百奥莱博的非酶DNA 清除剂DNA ERASOL-2。
Q: 为何有的样品在第6 步离心后有很厚的中间层,上清很少。
A: 这是因为蛋白质变性不充分,可以适当减少血液的用量。白细胞多的血液容易产生这种情况。
关键词:柱式血液RNA大量提取试剂盒,Blood RNA Column large-scale extraction kit,BTN80902
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