相关产品推荐更多 >
万千商家帮你免费找货
0 人在求购买到急需产品
- 详细信息
- 技术资料
- 库存:
450
- 英文名:
One-Stop RNA Electrophoresis Pack
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
常温
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产供应北京促销一站式RNA电泳套装价格,我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:北京促销一站式RNA电泳套装价格
品牌:百奥莱博
编号:BTN60904
产地:国产|进口
规格:10次
本品是包括琼脂糖、去离子甲醛、RNA上样液、电泳液等在内的RNA电泳套装,专门用于RNA电泳分析。可以进行至少10次mini变性胶电泳。
产品特点:
1. 即开即用,用户不需要自己进行RNase 灭活、高压灭菌、pH调节等操作。
2.与Northern杂交等后续反应兼容。
产品组成:
| 成分 | 规格 |
| 琼脂糖 | 5g |
| 超纯水 | 250ml |
| 甲醛 | 60ml |
| RNAload(含EB) | 0.5ml |
| RNAep,10× | 100ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输和保存,但收到货后RNAload 需要4℃保存,RNAep,10×一旦打开需要-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
注意:所有器皿(三角瓶,电泳槽,枪头等)均需去除RNase。强烈推荐使用本公司的超强无毒的固相RNase 清除剂。
一、配制琼脂糖甲醛变性胶(1.2%,100mL)
1.在三角瓶中加入下列成份:琼脂糖 1.2-1.5g;DEPC水 87mL
2. 将琼脂糖加热融化后,加入10mL 10×RNAep(10×RNAep 就是10×MOPS缓冲液,其瓶子一旦打开,就很容易产生污染细菌,细菌大量繁殖后会释放大量 RNase,所以剩下的10×RNAep 最好-20℃放置)。
3. 待胶冷却至 60℃左右,再加下列成份:甲醛 3.0mL;自备EB(10mg/mL)2-4μL
注意:由于本试剂盒提供的RNAload中含EB,所以也可以不加EB,但效果较差。如果使用自备的其他染料,如SYBR Green I,则不能同时使用其他染料,包括含EB的RNAload,用户需要另购不含EB的RNAload)。
4. 混匀后倒胶,凝固半小时后即可以使用。
二、配制电泳液
5. 将RNAep 用DEPC 水稀释十倍后即成电泳液,所需要的体积根据使用的电泳槽决定。
三、变性RNA样品
6.在一干净的离心管中将5-10μL RNA和15μL RNAload 混合,50-60℃保温10分钟后冰浴5-10分钟,直接上样。注意:每一泳道至多可分析30μg RNA,通常用10-20μg 总RNA进行Northern杂交,可以检测高丰度mRNA(占mRNA 总量的0.1%以上);如待测RNA含量极微,每个泳道需加0.5-3.0μg poly(A)+ RNA。
四、电泳
7.电泳时,将凝胶预电泳5 min(电压为5 V/cm)。随后加样品和分子量对照(如果有的话),以3-4 V/cm的电压电泳,直至染料迁移至胶下游的3/4处。
8.电泳结束后,在300nm 紫外灯下拍照。
五、后续处理
9. 按标准方法进行Northern杂交等后续处理。
使用效果:
图注: 用本产品电泳兔全血总RNA效果图。10μL 总RNA与15μL RNAload 混合后在甲醛琼脂糖变性胶上电泳0.5小时,直接在紫外灯下观察并照相。
疑难解答:
Q:RNA电泳为何最好使用RNAep,不要使用DNA电泳液TAE或TBE?
A:一是因为RNAep 经过去RNase处理,而一般实验室使用的TAE或TBE都没有经过去RNase处理,故极有可能含RNase,使样品RNA 降解。即使要灭活TAE或TBE中的RNase 也十分麻烦,因为DEPC 不能处理含Tirs的缓冲液;二是TEB含有硼*(代"酸"),硼*(代"酸")是研究多羟基醇和糖的经典试剂,它能与RNA中含多羟基的核糖反应生成糖硼*(代"酸")络合物,故电泳时RNA 带型十分弥散。在一定浓度范围内,RNA分子间还能通过硼*(代"酸")形成分子间复合物,出现电泳时各种RNA以一条带的形式出现的现象。所以RNA电泳时要避免使用含硼*(代"酸")的缓冲液。使用TAE效果虽然比TBE 稍好,但文献报道(BioTechniques 2000,28:414-415),它不能分离某些大小不同的RNA分子。
Q:上样孔里的红色荧光物一定是污染的基因组DNA 吗?
A:不是。用TAE或TBE电泳液和非变性胶电泳RNA时容易产生此现象,初步研究发现大部分红色荧光物是变性不充分的单链RNA通过碱基互补或通过硼*(代"酸")络合(如果使用TBE作电泳液的话)形成的复合物,加RNase处理后,这些红色荧光物一般会消失。为避免此现象,建议最好使用甲醛变性胶电泳。如果需要使用非变性胶,也必须在上样前使RNA变性。
使用百奥莱博优化的上样/变性/染色三用溶液RNAload可以使RNA在非变性胶上电泳时也有较好分辨率。使用非变性胶时,可以使用TAE或超快电泳液SuperBuffer-2,最好不要使用TBE缓冲液,因为TBE中的硼*(代"酸")能与RNA的多羟基形成复合物,RNA 很难形成锐利的条带。
Q:如何确认和去处除污染的基因组DNA?
A:如果怀疑有DNA污染,可以用RNase处理RNA样品,然后再电泳。如果上样孔里的红色荧光物不消失,则表示是基因组DNA污染。进一步确认可以使用PCR扩增法。去除污染的DNA可以使用非酶的DNA去除剂DNAScavenger或RNase-free DNase,由于RNase-free DNase一般都有残留的RNase污染,所以必须严格按照厂家提供的使用手册进行操作。
Q:为何我的植物RNA样品有4-5 条带?
A:部分植物组织有叶绿体等质体,而叶绿体有核糖体,所以也有其rRNA。
叶绿体的rRNA跟细胞浆里面核糖体的rRNA大小不同,所以一般会多出两条带(共4 条rRNA 条带)。小的tRNA和5S rRNA 有时可见,有时不可见,取决于回收效率。
北京促销一站式RNA电泳套装价格极具性价比,此外,我公司正火爆促销以下产品:
·核酸外切酶T
编号:BTN130627
英文名称:Exonulease T
规格:250U
核酸外切酶T(Exo T)又称核糖核酸酶T(RNase T),沿 3´→5´方向特异性作用于单链RNA或DNA的3´突出末端。核酸外切酶T作用于3´突出末端,产生RNA或DNA分子的平末端。
产品特点:
➤特异地作用于单链DNA或RNA;
➤ 使DNA或RNA的3´突出端变为平齐末端;
➤ 无核酸内切酶和外切酶污染。
产品组成:
| 成分 | 规格 |
| 核酸外切酶(5000U/mL) | 50μL |
| 10×Buffer | 1ml |
| 使用手册 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期半年。
热失活:65℃ 加热 20分钟。
活性定义:1单位指 100μl反应体系中,25℃条件下,30分钟从1nmol[³H]-标记的多聚胸腺嘧啶生成0.1nmol TCA可溶性DNA所需要的酶量。
·可逆型Taq DNA聚合酶抑制剂
编号:BTN60901
英文名称:Taq DNA Polymerase Inhibitor
规格:0.3mL
Taq DNA聚合酶是进行PCR的最常用工具酶,但是由于它在常温下还是具有部分活性,所以经常会出现非特异的扩增产物,尤其是当PCR反应体系中有大量非特异DNA存在的时候。目前最常见的解决方法是使用抗Taq DNA聚合酶的抗体和使用经过化学修饰的热启动Taq DNA聚合酶(如AmpliTaq Gold),但前者的缺点是加热后抗体会不可逆失活,后者的缺点是需要预热处理使酶激活。
产品特点:
1.可逆抑制Taq DNA聚合酶的活性,即常温抑制Taq酶活性,在45℃以上抑制功能丧失,当温度降低到45℃以下后,抑制活性又得以恢复。
2. 耐热,产品本身为非蛋白质试剂,远比Anti-Taq抗体稳定,便于保存和运输。
3. 使用简单,在加Taq酶前将本产品按PCR反应体积的1/10直接加入即可。
4.适用范围广,除Taq DNA聚合酶外,还可用于抑制其他DNA聚合酶的活性,如:Tth pol、Stoffel片段、Tfl pol、Tbr pol等。而一种酶的抗体一般对另一种酶的活性没有抑制作用。
5.与后续的RT-PCR兼容。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
在加入Taq或Tth DNA聚合酶之前,按PCR反应终体积1/10的比例将本产品加入到反应体系中混匀,然后再加入DNA聚合酶,启动PCR反应。
北京促销一站式RNA电泳套装价格关键词:BTN60904,One-Stop RNA Electrophoresis Pack,一站式RNA电泳套装
L-来苏糖 CHAPS 1949-78-6
半胱*酰甘*酸 Celite 545 19246-18-5
PY02-199 曙红亚甲基蓝琼脂 250克
F030502 FITC标记小鼠抗乙肝e抗原抗体 Monoclonal Mouse Anti-HBeAg*FITC
Fmoc-D-天冬酰胺 3-Phenylpropanoic acid 108321-39-7
ARB12989 小鼠抗中性粒/中心体抗体(ACA)含量检测 Mouse anti-centrol and centrosome antibody,aca ELISA KIT
ARB14110 人肌肉生长抑制素(MSTN)检测服务
酒石酸** Metribuzin 6381-59-5
BL0772 (66-669)高分子量 marker Protein mixture(原装)
*啶酮 L-Cysteine.HCI.H2O 59756-60-4
肌酐(Cr)检测试剂盒(肌*酸氧化酶微板法) 100T
ARB14234 猪瘟病毒抗原(CSFV-Ag)血清中含量检测
无*基酵母氮源[不含硫*(代"酸")胺] γ-L-Glutamyl-α-naphthylamide
PY06-005 大肠杆菌与大肠菌群显色培养基Ⅲ 1000ml,用于大肠杆菌和大肠菌群快速计数(MPN法)
ARB13165 小鼠热休克蛋白40(Hsp-40)酶免分析 Mouse heat shock protein 40,hsp-40 ELISA KIT
ARB13315 山羊白介素10(IL-10)含量检测 Goat interleukin 10,IL-10 ELISA KIT
HC0030 150cm2培养瓶(5个/包)
ARB11838 人凝血因子Ⅶ(FⅦ)含量测试 Human coagulation factor Ⅶ,fⅦ ELISA KIT
北京促销一站式RNA电泳套装价格关键词:BTN60904,One-Stop RNA Electrophoresis Pack,一站式RNA电泳套装
·SP6体外转录试剂盒
编号:BTN91107
英文名称:SP6 in vitro Transcription Kit
规格:50次
本试剂盒是基于SP6 RNA聚合酶的RNA体外转录试剂盒,它利用含有SP6启动子的模版DNA,以NTP为底物,从SP6启动子下游开始合成与模版DNA中一条链互补的RNA,简单快速获得大量的RNA分子。
产品特点:
1. 即开即用,用户只需提供含SP6启动子的DNA模板即可以进行体外转录实验,不需要单独准备每一个成份。
2. 单溶液预配液,减少加样次数,避免了操作误差,增加了可重复性。
3. 模版DNA可以是线性化的质粒DNA,也可以是PCR扩增产物。
4.可以合成的RNA的最佳长度在20nt到2000nt之间。
5.产品配方经过精心优化,每μg DNA模版可以合成2-6μg RNA。
得到的RNA可以用于RNA 结构研究、核酶生物化学、体外翻译、RNA-蛋白质相互作用、反义技术、SELEX技术和RNA干扰(RNAi)等实验。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 转录预配液(2×) | 0.5mL |
| 阳性对照DNA(1.3 kb片段) | 20μL(10 ng/μL) |
| SP6 RNA聚合酶混合液 | 50μl |
| RNase-free水 | 1ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
一、制备DNA模板
PCR片段和质粒DNA都可以用作体外转录的模板,但是必须注意以下几点。一是必须使用线性化的DNA。如果是质粒DNA,则必须先用适当的限制性内切酶切成线状。二是需要转录的DNA序列的上游必须有SP6启动子。如果模板是PCR产物,则可以在设计引物时将SP6启动子序列(5´ATT TAG GTG ACA CTA TAG AGN G 3´)加上,转录其实是从3端G AGN G中的第一个G开始。如果是将DNA片段克隆到载体上,则需要选择有SP6启动子的载体,并且克隆位点必须位于SP6启动子下游。三是需要转录的DNA序列的下游端最好不要是3´突出。如果是3´突出(如选择了Pst I来线性化质粒),则最好用T4 DNA聚合酶修平。四是必须保证DNA模板中没有RNase。由于提取质粒DNA的过程中一般要使用大量的RNase A,因此质粒DNA一般都有严重的RNase A污染,所以在用作模板前,最好采取胶回收得方法回收质粒DNA。并且加入少量总RNA一起保温,然后电泳检测RNA是否被降解,以此判断纯化的DNA模板是否有残留RNase A。
二、体外转录反应
1.在一个RNase-free的塑料离心管中,在室温下(不是在4℃下)按次序加入下列成分:
| 成分 | 加入量 | 备注 |
| DNA模板 | xμL | 总量在50 ng-1μg(如果模板是PCR片段,建议用50 ng左右;如果模板是质粒DNA,建议用1μg左右;如果用本产品提供的阳性对照,建议用4μL) |
| SP6转录预配液(2×) | 10μl | 本成分还含其他促进剂,所以是混合物 |
| RNase-free水 | 补水到20μL |
注:此为20μL反应体系的用量,对其他反应体系,各成分的用量可以按比例增减。如果需要标记RNA探针,则需要订购NTP分开的试剂盒。如果需要得到加帽RNA,则需要加入自备的加帽修饰核苷酸(本公司有各种加帽修饰核苷酸)。
2. 37℃保温1-2小时。注意:延长保温时间并不能提高产量。
3. 70℃加热10分钟灭活SP6 RNA聚合酶。
4. 取1-3μL电泳检测转录效果。一般1μg DNA可以合成 5-10μg的RNA。
5. 得到的RNA可以放-80℃保存。
若需进一步去除DNA模板,可参考下列操作步骤,但所用试剂需另行购买,本试剂盒不提供。
1.在体外转录体系中加入3-5U自备的RNase-free DNase(BTN90903;3-5U/μL)。
2. 37℃保温15-30分钟。
3. 补水到100μL。
4. 用等体积(100μL)的Tris饱和酚-*仿抽提一次去除残留的DNase和RNA聚合酶。
5.在上清中加200μL自备的微量核酸沉淀剂(BTN50903;用前需要摇晃混匀),振荡后15000rpm离心3~5分钟,弃上清。
6. 加入1mL 75%乙醇,震荡10秒后15000rpm离心3~5分钟,弃上清。
7. 短暂离心数秒,用枪头吸弃上清。
8. 晾干半分钟,所得沉淀即去除DNA模板后的RNA。可溶于RNase-free水中后立即使用或放-80℃长期保存。
疑难解答:
1. 没有RNA产物。最常见原因是模板有RNase污染,可用纯化的RNA跟模板DNA一起保温,再检测RNA是否降解。还可以增加RNase Inhibitor用量,本试剂盒缓冲液和酶混合液中有RNase inhibitor,如果模板RNase污染严重,可能需要用户补加RNase inhibitor。
2. RNA产量低。最常见的原因是DNA模板。在转录序列的第一个和第二个碱基最好都是G,在前14个碱基内避免有U存在。
3. RNA长度比预期的短。可能是模板序列中有SP6 RNA聚合酶的终止序列。可以改用SP6体外转录试剂盒(启动子也必须改成SP6启动子)。
4. RNA长度比预计的长。SP6 RNA聚合酶跟Taq DNA聚合酶一样,有不依赖于模板的加尾功能,最多有一半的RNA可以带一个或两个碱基的尾巴。如果RNA长度比预计的长很多,使用的模板又是质粒DNA,则可能是质粒DNA线性化不彻底。
5. 5´单磷酸还是三磷酸。如果使用GTP,则得到的RNA是三磷酸,体外转录时如果保温时间太长(如12小时),则有50%的三磷酸会变成单磷酸。如果在转录体系中加入GMP,则SP6 RNA聚合酶将优先使用GMP,所得RNA产物中5´端是单磷酸的比例将大大增加。
6. 如何得到带帽RNA?需加入带帽NTP类似物即可,本公司提供5种供选择。
我公司正在优惠促销核酸电泳和回收等系列产品,期待您的咨询选购北京促销一站式RNA电泳套装价格。
风险提示:丁香通仅作为第三方平台,为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全,合理判断,谨慎选购商品,商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品,请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
技术资料暂无技术资料 索取技术资料
北京促销一站式RNA电泳套装价格
¥140 - 1850









