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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
624
- 英文名:
Instant Hotstart PCR MasterMix
- 保质期:
12个月
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
低温运输,-20℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产供应即用型热启动PCR试剂盒说明书,我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:即用型热启动PCR试剂盒说明书
编号:BTN130986
品牌:百奥莱博
产地:国产|进口
规格:1.5mL
英文名:Instant Hotstart PCR MasterMix
本产品是即用型的2×高保真PCR预配反应液,含有除引物、模板以外的所有PCR 试剂,包括Pfu DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液、PCR 增强剂、上样染料等,特别适合于高保真PCR反应。
产品特点:
1. Pfu DNA聚合酶是使用最广泛的高保真酶,其保真度为普通Taq酶的10倍。
2. 使用时只需在加入模板和引物并稀释到1倍浓度即可进行PCR反应,非常方便,简化了PCR的准备工作。
3. PCR反应所必需试剂全集于一管之中,数分钟即可完成反应体系配置。由于加样过程少,有利于减少污染,降低实验误差。
4. 本产品A型含电泳染料,PCR反应液可直接上样电泳,进一步简化了操作。
5. 由于各成分的浓度和比例都经过精心优化,反应的灵敏度高,特异性强。
6.适用于基因的高保真扩增和基因定点突变等实验,得到的PCR产物可用于平末端克隆。
储存条件:低温运输,-20℃保存,保存期限为12个月。
使用方法:
将本产品与用户自备的模板,引物混合液按下列推荐使用量(30μL反应体系)加入PCR 管中即可进行PCR,反应结束后直接取5-15μL电泳检查扩增结果。如果反应体系不是30μL,各成分需要按比例增加或减少。
| 试剂 | 加入量 | |
| Hotstart PCR Mix | 25μL | |
| DNA模板(自备) | 哺乳动物基因组DNA | 0.5-1μg |
| 酵母基因组DNA | 5-500ng | |
| 细菌基因组DNA | 0.5-50ng | |
| 质粒DNA | 5-500pg | |
| PCR回收片段 | 1-100pg | |
| PCR引物(自备) | 10pmol each | |
| 补水到 | 30μL | |
放入PCR 仪中,根据用户确定的参数进行PCR,扩增结束后取5-10μL上样电泳。
注:用户可按照每1.5mL Hotstart PCR Mix中加入60μl 专用染料的比例将60μl 专用染料加入到1.5mL PCR MagicMix 3.0中,本染料对PCR扩增效率没有任何影响。扩增结束后,可直接取PCR反应液上样电泳,不需要额外再加DNA上样液。
注意事项:
1.如果反应体系不是30μl,各成分需要等按比例增加或减少。
2.如果DNA 模板中有PCR 不明抑制物(植物、土壤和血液等DNA样品常含此类抑制物),可以在PCR 体系中加入1/10的PCR 抑制物清除剂(BTN60804,30μl 体系中加3μl),可能会对PCR 有帮助。
想要了解更多关于即用型热启动PCR试剂盒说明书的价格、品牌、厂家、说明书、促销信息,请和我们联*(代"系")。此外我公司还销*(代"售")下面的产品:
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即用型热启动PCR试剂盒说明书关键词:即用型热启动PCR试剂盒,Instant Hotstart PCR MasterMix,BTN130986
·核酸稀释液,测OD专用
编号:BTN131179
英文名称:Diluent for NA OD Detection
规格:250mL
测定核酸的OD需要一定的pH和盐浓度,本产品就是根据这一特点开发的、专门用于溶解和稀释核酸样品的溶液。
储存条件:常温运输和保存,有效期一年。
·农杆菌AGL1化学感受态细胞
编号:BTN140382
英文名称:E.coli AGL1 Chemical Competent Cell
规格:10×100μL
AGL1菌株为C58,RecA型背景,核基因中含有筛选标签——利福平抗性基因rif和羧苄青霉素抗性基因carb,为了便于转化操作,此菌株携带一无自身转运功能的琥珀碱型Ti质粒 pTiBo542DT-DNA,此质粒含有vir基因(vir基因是T-DNA 插入植物基因组必需的元件,pTiBo542DT-DNA质粒自身的T-DNA转移功能被破坏,但可以帮助转入的双元载体T-DNA 顺利转移)。
本产品为AGL1 农杆菌化学感受态细胞,适用于水稻、杨树、拟南芥等植物的转基因操作,经pCAMBIA2301质粒检测转化效率高达103cfu/μg。
基因型:C58 RecA(rifr/carbr)Ti pTiBo542DT-DNA Succinamopine。
储存条件:干冰运输、-80℃保存,有效期一年。
自备试剂:质粒DNA、液氮等
使用方法:
转化前准备
1. 冰水浴和37℃水浴。
2.液氮或干冰/乙醇混合物。
3. 将抗性平板在28℃培养箱中平衡至少15分钟。
转化方法
1. 取-80℃保存的农杆菌感受态细胞于室温或手心片刻待其部分融化,处于冰水混合状态时插入冰中。
2. 无菌条件下,向刚刚融化的感受态细胞悬液中加入需要转化的质粒,每100μL感受态细胞加1μg(体积不大于10μl)质粒DNA,轻柔混匀。冰水浴中静置5分钟。
3. 将离心管置于液氮中速冻5分钟(注:也可以用干冰和无水乙醇混合物替代液氮)。
4. 迅速将离心管置于37℃水浴静置中5分钟,不要晃动水面。然后快速转至冰水浴中静置5分钟。
5. 加入800μl 无抗生素的2×YT或LB液体培养基,28-30℃振荡培养2~3小时。使菌体复苏,表达抗性。
6. 5000rpm离心1分钟收菌,保留100μl左右上清,轻轻吹打重悬菌体,均匀涂布到含有相应抗生素的LB 固体培养基平板上,待平板中的液体完全吸收后,倒置平板,28-30℃培养48-72小时。(注:当平板只含有50μg/mLkan时,28℃培养48小时即可;平板中同时加入50μg/mL kan,20μg/mL rif时,需28℃培养60小时;如果使用的平板含有50μg/mL rif 则需要28℃培养72-90小时)。
即用型热启动PCR试剂盒说明书关键词:即用型热启动PCR试剂盒,Instant Hotstart PCR MasterMix,BTN130986
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我公司生产供应销*(代"售")的核酸扩增(PCR)正全品类优惠促销,十分期待您的咨询选购即用型热启动PCR试剂盒说明书。
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文献和实验PCR 新手指南——手把手教您如何正确选择合适的 PCR 酶
酶。 图 1.非特异性扩增(左图)与使用热启动 DNA 聚合酶进行的特异性扩增(右图)。 如何为您的 DNA 聚合酶选择正确的形式 还有更多需要考虑的因素。选择可以简化您工作流程的聚合酶形式。PCR 聚合酶形式的选择包括即用型预混液、用于直接凝胶上样的含染料缓冲液以及用于直接 PCR 分析的所有必要成分的完整试剂盒。 使用预混液,您只需添加模板和引物,然后,开始 PCR 实验。如果您想进一步减少操作步骤,使用含染料缓冲液的聚合酶允许 PCR 产物直接凝胶上样(注意:确保染料与下游应用兼容)。直接
buffer,摸索镁离子浓度或适当加入 DMSO(小于 0.3%) · 提高退火温度,增加延伸时间(反应条件参照试剂盒说明书) 问题 2:假阳性 现象:空白对照出现条带 可能原因: · 引物设计不适,与目的序列具有同源性 · 试剂污染:水、移液枪等被核酸污染 · 样品间出现交叉污染 解决方法: · 实验仪器高压灭菌 · 实验试剂(酶除外)高压灭菌,离心管枪头一次性使用 · 规范实验操作 · 假阳性可通过巢式 PCR 解决,或者使用特异性较高的试剂盒扩增 问题 3:拖尾、弥散 现象:电泳出现拖尾、涂抹
【分享】Thermo Scientific 直接PCR(植物、动物、人源组织)
直接PCR方法使PCR可以直接从样本开始,为DNA扩增带来前所未有的便捷。未经DNA纯化而直接使用微量原始样本做模板,为PCR实验节省大量的时间和成本。 优势: 无需进行昂贵又费时的DNA抽提; 样品需求量小; 实验方案简便,手动操作步骤少; 实验时间极短; 已对多种样本类型进行测试; 强劲的热启动DNA聚合酶保证特异性和高产量。 适用于各类植物样本的高效PCR 测试样本:叶片(拟南芥、玉米、水稻、棉花、烟草、葡萄藤) 种子(苹果、胡萝卜、南瓜) 真菌和藓类(稻瘟
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