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核酸与蛋白互作不仅是生物有机体展示其生命活动的基本形式之一,还是核酸和蛋白功能阐释的重要内容。
核酸-蛋白互作研究按照实验内容可分为两大类,一是验证或筛选某条核酸序列(RNA或DNA)的结合蛋白,二是验证或筛选某个兴趣蛋白的结合RNA或DNA。
筛选蛋白基因片段
辉骏生物提供以下多种技术,帮助研究者们解析生物体内核酸与蛋白质之间的相互作用网络。
更多实验项目请联系我们:
电话:400-699-1663
邮箱: service@fitgene.com
官网:www.fitgene.com
地址:广州市黄埔区科学城广州国际企业孵化器D506
核酸-蛋白互作研究按照实验内容可分为两大类,一是验证或筛选某条核酸序列(RNA或DNA)的结合蛋白,二是验证或筛选某个兴趣蛋白的结合RNA或DNA。
筛选蛋白基因片段
辉骏生物提供以下多种技术,帮助研究者们解析生物体内核酸与蛋白质之间的相互作用网络。
验证或筛选某条RNA/DNA的结合蛋白
| 技术类型 | 技术特点 | 适用样本 |
| RNA pull-down | 用生物素标记RNA,链霉亲和素磁珠捕获体外条件下结合的靶RNA-蛋白质复合物,Western Blot技术检测目的蛋白和靶RNA是否结合,或质谱技术鉴定复合物中的蛋白质成分 | 细胞 |
| DNA pull-down | 用生物素标记DNA,链霉亲和素磁珠捕获体外条件下结合的靶DNA片段-蛋白质复合物,Western Blot技术检测目的蛋白和靶DNA位点是否结合,或质谱技术鉴定复合物中的蛋白质成分 | 细胞 |
| 双荧光素酶检测启动子和转录因子的结合 | 将待测启动子构建到荧光素酶(Luc)基因上游,将构建好的Luc载体和转录因子表达载体共转染细胞,检测Luc活性,从而判断转录因子与目标启动子是否有相互作用 | 细胞 |
验证或筛选某个兴趣蛋白的结合RNA/DNA
| 技术类型 | 技术特点 | 适用样本 |
| RIP | 用诱饵蛋白抗体捕获体内条件下的诱饵蛋白与RNA复合物,采用qPCR技术检测诱饵蛋白与目的RNA是否结合,或采用高通量测序技术获得与诱饵蛋白结合的RNA序列 | 细胞 |
| ChIP | 用诱饵蛋白抗体捕获体内条件下的诱饵蛋白与DNA片段的复合物,采用qPCR技术检测诱饵蛋白与目的DNA位点是否结合,或采用高通量测序技术获得与诱饵蛋白结合的DNA位点序列 | 细胞 |
更多实验项目请联系我们:
电话:400-699-1663
邮箱: service@fitgene.com
官网:www.fitgene.com
地址:广州市黄埔区科学城广州国际企业孵化器D506
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文献和实验相关实验
课程内容: 1.荧光素酶报告基因检测 2.FISH 定位检测 3.circRNA-miRNA pull-down
一、引言 在许多的细胞生命活动中,例如 DNA 复制、mRNA 转录与修饰以及病毒的感染等都涉及到 DNA 与蛋白质之间的相互作用的问题。 重组 DNA 技术的发展,人们已分离到了许多重要的基因。现在的关键问题是需要揭示环境因子及发育信号究竟是如何控制基因的转录活性。为此需要: 1. 鉴定分析参与基因表达调控的 DNA 元件。 2. 分离并鉴定这些顺式元件特异性结合的蛋白质因子。 这些问题的研究都涉及到 DNA 与蛋白质之间的相互作用。 研究 DNA-蛋白质相互作用的实验方法主要包括
研究应用|使用 NanoBiT 技术进行的蛋白质相互作用细胞内定位成像
NanoBiT 是一种结构互补报告分子系统,可用于 PPI 的细胞内检测。它已成功应用于药物筛选、信号传导分析和病毒感染机制分析等一系列研究领域。该系统由一个大型 BiT(LgBiT;17.6 kDa)和一个小型 BiT(SmBiT;11 个氨基酸)亚基组成,它们将与目标蛋白质融合。这些亚基随后在细胞中表达,因此只有靶向 PPI 才能使这些亚基形成功能酶,从而产生明亮的发光信号(图 1)。 图 1. NanoBiT 蛋白质相互作用系统概览(图像 Promega 提供) 1.
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核酸-蛋白相互作用技术
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