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- 2026年01月07日
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免疫荧光检测
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文献和实验；每孔总量为 0.2ml 。 3． 在 37 ℃ 5 ％ CO2 的饱和水汽二氧化碳培养箱中培养 24 小时。 4． 直接在荧光检测仪上检测荧光强度，激发波长 530nm ，发射波长 590nm 。各孔荧光强度值应减去培养液对照荧光强度的平均值，各复孔荧光强度的平均值记为 AF 。按下式计算特异性杀伤百分比： 特异性杀伤（％）＝ 100 × [AF 靶细胞对照－（ AF 实验孔－ AF 效应细胞对照） ]/AF 靶细胞对照
间接标记法 1. 制备单细胞悬液； 2. 细胞计数，取出 1×106 个细胞于试管中； 3. 用台盼蓝染色计活细胞数，要求活细胞数 >90～95%； 4. 在试管中加入一抗， （剂量按照说明书的要求） ，孵30育～60 分钟； 5. PBS 洗涤 1～2 次，1500rpm，离心 3 分钟，弃上清； 6. 加入二抗，孵育 20～30 分钟； 7. PBS 洗一次，1500rpm，离心 3 分钟，弃上清; 8. 加 300μ l PBS，上机检测( 若不能
由于NF－kb采用免疫荧光检测可能会出现非特异性结合，一般转核观察NF-kb采用荧光效果欠佳，建议是否考虑采用激光共聚焦检测，其效果要比前者好多了。供参考。 本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴 师兄微信号：shixiongcoming
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