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- 详细信息
- 技术资料
- 库存:
974
- 英文名:
2×BaHF MasterMix(With Dye)
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产销*(代"售")北京2×BaHF MasterMix(含染料)厂家价格,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:北京2×BaHF MasterMix(含染料)厂家价格
英文名:2×BaHF MasterMix(With Dye)
品牌:百奥莱博
产地:国产|进口
编号:WE0114
本品为由BaHF DNA Polymerase、PCR Buffer、Mg2+、dNTPs以及PCR稳定剂和增强剂组成的预混体系,浓度为2×,具有操作简便快速、灵敏度高、特异性强、稳定性好的优点,可最大限度地减少人为误差和污染。该产品所含的BaHF DNA Polymerase是经过特殊处理的热启动高保真聚合酶。该聚合酶具有5"-3"DNA聚合酶活性,5"-3"核酸外切酶活性和3"-5"核酸外切酶活性,在普通PCR条件下,与BaldStar Taq DNA Polymerase相比,具有扩增效率高、错配率低的优良性能。化学修饰使该酶在常温下没有聚合酶活性,有效避免在常温条件下由引物和模板非特异性结合或引物二聚体而产生的非特异性扩增,酶的激活需要在95℃下孵育10分钟,该条件可以整合入已有的PCR热循环程序。优化的缓冲体系使酶的作用发挥最大功效,实现对目的片段的高保真、高特异性、高扩增效率、高灵敏度扩增。本产品已加入染料(蓝色),反应结束后可直接进行电泳检测,无需再使用上样缓冲液。扩增得到的PCR产物3"端附有一个“A”碱基,因此可直接用于T/A克隆。适用于常规的PCR反应和对高保真性有要求的基因克隆等实验。
产品组成:
| 组份 | 1ml | 5ml |
| 2×BaHF MasterMix(With Dye) | 1ml | 5×1ml |
| ddH2O | 1ml | 5×1ml |
注意:2×BaHF MasterMix含有BaHF DNA Polymerase,3.4 mM MgCl2和 400μM each dNTP。
质量控制:
1、经检验无外源核酸酶活性;
2、PCR方法检测无宿主残余DNA;
3、能有效地扩增多种基因组中的单拷贝基因;
4、2~8℃存放三个月,活性无明显改变。
使用方法:
以下举例为以人基因组DNA为模板,扩增1 kb的片段的PCR反应体系和反应条件,引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。
1、PCR反应体系
| 试剂 | 50μl反应体系 | 终浓度 |
| 2×BaHF MasterMix(With Dye) | 25μl | 1× |
| Forward Primer,10μM | 2μl | 0.4μM |
| Reverse Primer,10μM | 2μl | 0.4μM |
| Template DNA | <0.5μg | <0.5μg/50μl |
| ddH2O | up to 50μl |
注意:引物浓度请以终浓度0.1-1.0μM作为设定范围的参考。扩增效率不高的情况下,可提高引物的浓度;发生非特异性反应时,可降低引物浓度,由此优化反应体系。
2、PCR反应条件
| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
| 预变性 | 95℃ | 10 min | |
| 变性 | 94℃ | 30 s | 30-40 个循环 |
| 退火 | 55-65℃ | 30 s | |
| 延伸 | 72℃ | 60 s | |
| 终延伸 | 72℃ | 5 min |
注意:
1)一般实验中退火温度比扩增引物的熔解温度Tm低5℃,无法得到理想的扩增效率时,适当降低退火温度;发生非特异性反应时,提高退火温度,由此优化反应条件。
2)延伸时间应根据所扩增片段大小设定,本产品中所包含的BaHF DNA Polymerase的扩增效率为1-2 kb/min。
3)可根据扩增产物的下游应用设定循环数。如果循环次数太少,扩增量不足;如果循环次数太多,错配机率会增加,非特异性背景严重。所以在保证产物得率的前提下应尽量减少循环次数。
4)本产品须在预变性95℃,10 min条件下实现酶的活化。
储存条件:-20℃,避免反复冻融。
更多有关北京2×BaHF MasterMix(含染料)厂家价格的价格及使用说明等,请联*(代"系")我们的业务经理王欣女士咨询,我公司还销*(代"售")以下产品:
·SDS-PAGE快速电泳液
编号:WE0277
英文名称:Fast SDS-PAGE Running Buffer(10×)
规格:500ml
SDS-PAGE是蛋白质科学研究中最为常用的技术之一,使用常规SDS-PAGE电泳缓冲液(TG,Tris-Glycin系统)进行电泳时,电泳所需的时间一般为90分钟左右(mini胶),应用本产品可使同样的mini胶的SDS-PAGE所需的电泳时间缩短至20-30min,同时电泳后的条带较使用常规的TG电泳缓冲液所跑出的条带分辨率提高且更加清晰。本产品的使用非常简单,只需将您使用的常规TG电泳缓冲液系统更换为本产品的稀释液,调整电压后进行电泳即可,无需添加任何实验步骤。同时稀释为工作液的本产品可重复使用4-5次。本产品既可节省您宝贵的时间也可降低您的实验成本。
注意事项:
1、操作时请务必佩戴手套,如溅到皮肤上,请立即用大量水冲洗。
2、本产品中含有SDS,适合变性凝胶电泳,不适合非变性凝胶电泳。
3、应用本产品所进行的SDS-PAGE的结果显示,本产品的应用会使蛋白的分辨范围发生变化,同等浓度的凝胶,其分辨的最低分子量要小于使用TG电泳缓冲液(见下表)。
操作步骤:(以Bio-Rad mini胶及相关配套设备为例)
1、本产品为10倍浓缩液,使用时用纯水10倍稀释后配制成工作液(例如:取100ml本产品后用纯水定容至1 L)。
2、将适量的本产品加入到电泳槽的内、外槽中,调整电源为恒压200-250 V进行电泳。电泳指示剂*酚蓝至凝胶底部,所需时间约20-30 min。
3、电泳完成后收集电泳槽内、外槽电泳液,4℃保存,可重复使用4-5次,但如发生浑浊请勿使用。
表1 速泳电泳液与常规TG电泳液的最佳分辨率的比较
| 凝胶浓度 | 速泳电泳液 | 常规TG电泳液 |
| 8% | 20-250 kDa | 50-325 kDa |
| 10% | 15-140 kDa | 30-180 kDa |
| 12% | 10-80 kDa | 20-140 kDa |
| 15% | 5-70 kDa | 12-100 kDa |
储存条件:室温
北京2×BaHF MasterMix(含染料)厂家价格关键词:2×BaHF MasterMix(With Dye),含染料,WE0114,2×BaHF MasterMix(含染料)
·抗GST标签单克隆抗体
编号:WE0352
英文名称:Anti GST-Tag Mouse Monoclonal Antibody
规格:100μl
该抗体为高纯度的鼠单克隆抗体,与GST结构域具有高亲和性,可灵敏特异地检测各种GST编码载体表达的GST-Tag融合蛋白。
抗体类型:鼠单克隆抗体IgG1
免疫原:人工合成多肽
应用范围:WB(1:500-5000)、ELISA(1:200-20000)
·2×BAmp MasterMix(含染料)
编号:WE0106
英文名称:2×BAmp MasterMix(With Dye)
规格:5ml
BAmp MasterMix由BAmp DNA Polymerase、PCR Buffer、Mg2+、dNTPs以及PCR稳定剂和增强剂组成的预混体系,浓度为2×。BAmp DNA Polymerase是一种兼具高扩增效率和高保真性的耐热聚合酶。其主要特点是可以高效扩增长片段DNA,尤其在扩增>10 kb的DNA片段方面,其优势更加明显,所扩增的片段最长可以达到40 kb。该酶具有高度的延伸和校对能力,保真度高于普通Taq酶。预配好的PCR混合液使操作更加简单快捷,可最大限度地减少人为误差和污染。独创的MasterMix配方使整个反应体系非常稳定,重复性好。本产品已加入染料(蓝色),反应结束后可直接进行电泳检测,无需再使用上样缓冲液。扩增得到的PCR产物3"端附有一个“A”碱基,因此可直接用于T/A克隆。适用于构建基因图谱、序列测定及分子遗传学研究等。
产品组成:
| 组份 | 1ml | 5ml |
| 2×BAmp MasterMix(With Dye) | 1ml | 5×1ml |
| ddH2O | 1ml | 5×1ml |
注意:2×BAmp MasterMix含有BAmp DNA Polymerase,3 mM MgCl2 和400μM each dNTP。
质量控制:
1、经检验无外源核酸酶活性;
2、PCR方法检测无宿主残余DNA;
3、能有效地扩增多种基因组中的单拷贝基因。
使用方法:
以下举例为以人基因组DNA为模板,扩增1 kb的片段的PCR反应体系和反应条件,实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。
1、PCR反应体系
| 试剂 | 50μl反应体系 | 终浓度 |
| 2×BAmp MasterMix(With Dye) | 25μl | 1× |
| Forward Primer,10μM | 2μl | 0.4μM |
| Reverse Primer,10μM | 2μl | 0.4μM |
| Template DNA | <0.5μg | <0.5μg/50μl |
| ddH2O | up to 50μl |
注意:引物浓度请以终浓度0.1-1.0μM作为设定范围的参考。扩增效率不高的情况下,可提高引物的浓度;发生非特异性反应时,可降低引物浓度,由此优化反应体系。
2、PCR反应条件
| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
| 预变性 | 94℃ | 2 min | |
| 变性 | 94℃ | 30 s | 25-35 个循环 |
| 退火 | 55-65℃ | 30 s | |
| 延伸 | 72℃ | 30 s | |
| 终延伸 | 72℃ | 5 min |
注意:
1)一般实验中退火温度比扩增引物的熔解温度Tm低5℃,无法得到理想的扩增效率时,适当降低退火温度;发生非特异性反应时,提高退火温度,由此优化反应条件。
2)延伸时间应根据所扩增片段大小设定,BAmp DNA Polymerase的扩增效率为2.0 kb/min。
3)可根据扩增产物的下游应用设定循环数。如果循环次数太少,扩增量不足;如果循环次数太多,错配机率会增加,非特异性背景严重。所以在保证产物得率的前提下应尽量减少循环次数。
储存条件:-20℃,避免反复冻融。
北京2×BaHF MasterMix(含染料)厂家价格关键词:2×BaHF MasterMix(With Dye),含染料,WE0114,2×BaHF MasterMix(含染料)
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