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- 详细信息
- 技术资料
- 库存:
931
- 英文名:
BloodClot Blood DNA Extraction Kit
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
室温(15~30℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
血块基因组DNA提取试剂盒厂家直销是高品质的DNA纯化产品,由北京百奥莱博供应,用于科研目的生化试验项目,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多血块基因组DNA提取试剂盒等DNA纯化产品请联*(代"系")我司咨询订购。
名称:血块基因组DNA提取试剂盒厂家直销
编号:WE0185
品牌:百奥莱博
规格:50次
产地:国产|进口
英文名:BloodClot Blood DNA Extraction Kit
本试剂盒供了一种快速、简单、高效的从血片中提取基因组DNA的方法。既适用于未加抗凝剂的血液,也可用于加入EDTA、柠檬酸盐、肝素等抗凝剂的血液样本。样品裂解后,DNA被选择性的吸附到硅基质膜上。两步漂洗后,高质量的DNA被溶解到洗脱液中。纯化得到的DNA无酶抑制剂和其他杂质的残留,A260/A280的比值在1.5-2.3。DNA最长可达50 kb,适用于PCR,Real-time PCR、Southern blotting等实验。
试剂盒组成:
| 组份 | 50次 |
| Buffer GTL | 15ml |
| Buffer GC | 15ml |
| Buffer GW1(浓缩液) | 13ml |
| Buffer PW2(浓缩液) | 18ml |
| Buffer GE | 15ml |
| 蛋白酶K | 25mg |
| 蛋白酶K 储存液 | 1.25ml |
| 吸附柱DC及收集管 | 50套 |
自备试剂:无水乙醇
产品特点
1、适用于凝固血液样本的高纯度总DNA分离纯化。
2、无需有机溶剂提取以及乙醇沉淀,彻底去除污染物及下游反应抑制物,快速提取高品质DNA。
实验前准备及重要注意事项/strong>:
1、向蛋白酶K 中加入1.25ml 蛋白酶K 储存液使其溶解,-20℃保存。配制好的蛋白酶K 勿长时间室温放置,避免反复冻融,避免反复冻融,以免影响其活性。
2、第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明在Buffer GW1和Buffer PW2中加入无水乙醇,混合均匀,并在试剂瓶标签上做好标记。
3、使用前请检查Buffer GTL和Buffer GC是否出现结晶或者沉淀,如有结晶或者沉淀,请将Buffer GC和Buffer GTL于56℃水浴重新溶解
4、将一个水浴锅预热至56℃,另一个水浴锅预热至70℃。
5、可将洗脱缓冲液Buffer GE预热至70℃。
操作步骤:
1、向1.5ml离心管中加入20μl 蛋白酶K 溶液,然后再加入180μl Buffer GTL。
注意:若样品数量较多,蛋白酶K 和Buffer GTL可按比例混合,然后将200μl混合物加入到1.5ml的离心管中。
2、将取下的干血片放入上一步中的离心管中,剧烈涡旋混匀并短暂离心。56℃孵育30-60分钟,期间每隔10分钟将离心管涡旋10秒。
3、加入200μl Buffer GC,彻底涡旋混匀。短暂离心后,70℃孵育10分钟,期间每隔3分钟将离心管涡旋10秒。
注意:加入Buffer GC后可能会产生白色沉淀,大部分情况下,在孵育过程中,沉淀会消失,沉淀不会影响后续的实验。
4、待步骤3离心管中样品降为室温后加入100μl无水乙醇,轻轻颠倒混匀样品,室温放置5分钟。短暂离心,将管壁内壁的液体富集于离心管底。
注意:
1)需要将样品和乙醇混合均匀。
2)当室温高于25℃时,需要先将乙醇预冷。
5、将上一步所得溶液全部加入到已装入收集管的吸附柱中,12000rpm(~13400×g)离心1分钟。倒掉收集管中的废液,将Spin Column DC放回收集管中。
6、向吸附柱中加入500μl Buffer GW1(使用前检查是否已加入无水乙醇),12000rpm离心1分钟。倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
7、向吸附柱中加入500μl Buffer PW2(使用前检查是否已加入无水乙醇),12000rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
8、重复步骤7。
9、12000rpm离心2分钟,倒掉废液,将吸附柱置于室温放置2-5分钟,以彻底晾干吸附材料中残余的乙醇。
注意:这一步的目的是将吸附柱中残余的乙醇去除,乙醇的残留会影响后续的酶促反应(酶切、PCR等)。
10、将吸附柱置于一个无菌的1.5ml离心管中,向吸附柱的中间部位悬空加入20-100μl BufferGE,室温放置2-5分钟。12000rpm离心1分钟,收集DNA溶液,-20℃保存DNA。
注意:
1)如果下游实验对pH值或EDTA敏感,可以用去离子水洗脱。洗脱液的pH值对洗脱效率有很大影响,若用去离子水做洗脱液应该保证其pH值在7.0-8.5(可以用NaOH将水的pH值调到此范围),pH值低于7.0时会降低洗脱效率。
2)离心前室温孵育5分钟可以增加产量;用另外的20-200μl Buffer GE再次洗脱可以增加产量。
3)如果要提高DNA的终浓度,可以将步骤10所得的DNA洗脱液重新加至吸附膜上,室温放置5 min后再次离心;若洗脱体积小于20μl,可以增加DNA的终浓度,但可能会减少总产量。如果DNA的量小于1μg,推荐用50μl Buffer GE或去离子水洗脱。
4)因为保存在水中的DNA会受到酸性水解作用的影响,如需长期保存,推荐用Buffer GE洗脱并于-20℃保存。
储存条件:室温(15~30℃)。
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·TBST(pH8.0,10×)
编号:WE0310
规格:500ml
·口腔拭子基因组DNA提取试剂盒
编号:WE0179
英文名称:Swab Genomic DNA Extraction Kit
规格:50次|200次
本试剂盒提供一种简单快速分离纯化口腔拭子样本总DNA的方法。该试剂盒采用可特异性结合DNA的硅基质膜和独特的缓冲系统,高效专一吸附DNA,每个拭子可得到0.5-3.5μg基因组DNA,提取的DNA片段大、纯度高、质量稳定可靠。适用于酶切、PCR、文库构建、Southern杂交等实验。
试剂盒组成:
| 组份 | 50次 | 200次 |
| Buffer GR | 25ml | 120ml |
| Buffer GL | 25ml | 120ml |
| Buffer GW1(浓缩液) | 13ml | 52ml |
| Buffer GW2(浓缩液) | 15ml | 75ml |
| Buffer GE | 15ml | 60ml |
| 蛋白酶K | 25mg | 90mg |
| 蛋白酶K 储存液 | 1.25ml | 5ml |
| 吸附柱DS及收集管 | 50套 | 200套 |
| 离心管(1.5ml) | 50个 | 200个 |
产品特点:
1、采用硅基质膜原理,简单、快速从口腔拭子中提取基因组DNA。
2、提取的基因组DNA片段大、纯度高。
3、单个拭子样本得率达到0.5-3.5μg。
自备试剂:无水乙醇。
实验前准备及重要注意事项/strong>:
1、向蛋白酶K 中加入指定用量(1.25ml/5ml)的蛋白酶K 储存液使其溶解,-20℃保存。配制好的蛋白酶K 勿长时间室温放置,避免反复冻融,以免影响其活性。
2、第一次使用前应按照试剂瓶标签说明在Buffer GW1和Buffer GW2中加入无水乙醇。
3、使用前若发现Buffer GL有沉淀,请将Buffer GL于56℃水浴溶解。
4、全部离心步骤可在室温下进行。
5、取样:使用口腔拭子在口腔内壁擦拭6次,晾干2小时保存,为确保样本不被食物或饮料污染,取样前30分钟内请勿进食和饮水。
操作步骤:
1.将口腔拭子的棉签用剪刀从杆上剪下,置于2ml的离心管(自备)中,加入400μl Buffer GR。
注意:如需无RNA污染的基因组DNA,可加入4μl浓度为100 mg/ml 的RNase A溶液(货号:WE0225S),震荡混匀。
2.加入20μl 蛋白酶K 和 400μl Buffer GL,立即涡旋震荡15秒,充分混匀。
注意:加入Buffer GL后立即充分混匀;不可将蛋白酶K 直接加入Buffer GL中使用。
3.56℃放置10分钟,短暂离心,使管壁上的溶液收集到管底。
4.加入400μl无水乙醇,涡旋震荡充分混匀,短暂离心,使管壁上的溶液收集到管底。
注意:加入无水乙醇后可能会产生白色沉淀,不会影响后续实验。
5.将上步所得溶液和沉淀分两次加入到已装入收集管的吸附柱中,一次最多不超过700μl 。12000rpm(~~13400×g)离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
6.向吸附柱中加入500μl Buffer GW1(使用前检查是否已加入无水乙醇),12000rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
7.向吸附柱中加入500μl Buffer GW2(使用前检查是否已加入无水乙醇),12000rpm离心3分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
注意:如需进一步提高DNA纯度,可重复步骤7。
8.12000rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液。将吸附柱置于室温数分钟,以彻底晾干。
注意:这一步的目的是将吸附柱中残余的乙醇去除,乙醇的残留会影响后续的酶促反应(酶切、PCR等)。
9.将吸附柱置于一个新的1.5ml离心管中,向吸附柱的中间部位悬空加入50μl Buffer GE或灭菌水,室温放置2-5分钟,12000rpm离心1分钟,收集DNA溶液,-20℃保存。
注意:
1)如果下游实验对pH值或EDTA敏感,可以用灭菌水洗脱。洗脱液的pH值对洗脱效率有很大影响,若用水做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5(可以用NaOH将水的pH值调到此范围),pH值低于7.0时洗脱效率不高。
2)若需长期保存,推荐用Buffer GE洗脱并于-20℃保存。
储存条件:室温(15~30℃)。
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血块基因组DNA提取试剂盒厂家直销
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