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大量
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β-1,3-GA
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半年
- 供应商:
上海沪震实业有限公司
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2-8℃
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100管/48样
β-1,3葡聚糖酶(β-1,3-GA)测试盒
测定意义:β-1,3-GA( EC 3.2.1.73)主要存在植物中,催化β-1,3-葡萄糖苷键水解。在植物染病或处于其他逆境条件下,可诱导细胞大量合成β-1,3-GA,因此β-1,3-GA活性测定广泛应用于植物病理和逆境生理研究。
测定原理:
β-1,3-GA水解昆布多糖,内切β-1,3-葡萄糖苷键,产生还原末端,通过测定还原糖生成速率来计算其酶活性。
自备仪器和用品:
可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。
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文献和实验几乎所有的赤霉素,在提取时,从乙酸乙酯的酸可溶性部分中所得到的都是游离型赤霉素。也有一些赤霉素是以与其他分子相结合的形态而存在,对这种类型的赤霉素,总称为结合型赤霉素( bound或 conjugated gibberellin)。对葡糖配糖体(例如 3-O-β -葡糖基 GA3 )和葡糖酯( GA4 葡糖酯)可以进行分离鉴定。前者为极性大的水溶性物质,可用 n-丁醇提取;后者被认为是中性赤霉素( neutral gibberellin
的裂解 常用方法有:① 高温珠磨法;② 高压匀浆;③ 超声破碎法;④ 酶溶法;⑤ 化学渗透等。前三种方法属机械破碎法,并且方法① 、② 已在工业生产中得到应用,后三种方法在实验室研究中应用较为广泛。下面介绍酶溶法和超声破碎法的实验步骤。 (1)酶溶法。常用的溶解酶有溶菌酶;β-1,3 -葡聚糖酶;β-1,6 -葡聚糖酶;蛋白酶;壳多糖酶;糖昔酶等。溶菌酶主要对细菌类有作用,而其他几种酶对酵母作用显著。主要步骤为: ① 4 ℃ ,5000rpm 离心,15 min ,收集诱导
烯酰胺凝胶电泳上样缓冲液后,作SDS -PAGE 检测. 2、大肠杆菌包涵体的分离与蛋白质纯化: 细菌的裂解 常用方法有:① 高温珠磨法;② 高压匀浆;③ 超声破碎法;④ 酶溶法;⑤ 化学渗透等.前三种方法属机械破碎法,并且方法① 、② 已在工业生产中得到应用,后三种方法在实验室研究中应用较为广泛.下面介绍酶溶法和超声破碎法的实验步骤. 酶溶法.常用的溶解酶有溶菌酶;β-1,3 -葡聚糖酶;β-1,6 -葡聚糖酶;蛋白酶;壳多糖酶;糖昔酶等.溶菌酶主要对细菌类有作用,而其
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