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大量
- 英文名:
NADP-MDH
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半年
- 供应商:
上海沪震实业有限公司
- 保存条件:
2-8℃
- 规格:
50管/48样
NADP-苹果酸脱氢酶(NADP-MDH)测试盒
测定意义:MDH (EC 1.1.1.37)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,线粒体中MDH是TCA循环的关键酶之一,催化苹果酸形成草酰乙酸;相反,胞浆中MDH催化草酰乙酸形成苹果酸。草酰乙酸是重要的中间产物, 连接多条重要的代谢途径。因此,MDH在细胞多种生理活动中扮演着重要的角色,包括线粒体的能量代谢、 苹果酸-天冬氨酸穿梭系统、活性氧代谢和抗病性等。根据不同的辅酶特异性,MDH分为NAD-依赖的MDH和NADP-依赖的MDH, NADP-MDH主要存在于真核细胞中。
测定原理:
NADP-MDH催化NADPH还原草酰乙酸生成苹果酸,导致340nm处光吸收下降。
需自备的仪器和用品:
紫外分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1 mL石英比色皿和蒸馏水。
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文献和实验为催化苹果酸脱羧反应的酶。正式名称称为苹果酸脱氢酶(脱羧作用)。已知有三种苹果酸酶( EC1. 1. 1. 38— 40)。其中以 NADP为受体的酶( EC1. 1. 1. 40)催化生成下列反应: Δ G°′ =-0.36千卡。丙酮酸羧化反应(是 H. G. Wood和 C. H. Werkman, 1938最初发现的反应)中有的是苹果酸酶的作用,有的是丙酮酸羧化酶的作用,在生物体内已知以后者的作用为主。两者都是供给三羧酸循环中间体的补充反应
物;(3)这个三元复合物与HCO-3作用产生羧基磷酸与PEPC·Mg2+ 和烯醇式丙酮酸复合物,前者释放出CO2与Pi;(4)CO2与PEPC·Mg2+·烯醇作用产生OAA与PEPC·Mg2+ ,OAA为羧化反应的产物,PEPC·Mg2+ 则再次进行反应。PEPC是胞质酶,主要分布在叶肉细胞的细胞质中,分子量400 000,由四个相同亚基组成。PEPC无加氧酶活性,因而羧化反应不被氧抑制。 2.还原或转氨阶段 OAA被还原成苹果酸或经转氨作用形成天冬氨酸。 (1)还原反应 由NADP-苹果酸脱氢酶
亦称四碳二羧酸循环( C4 -dicarboxylic cycle)。光合碳同化的辅助途径。起源于热带及亚热带的一些植物,在其光合作用的暗反应中,二氧化碳首次被固定的接受体是磷酸烯醇式丙酮酸( PEP)。在 PEP羧化酶催化下形成 C4 -羧酸——草酰乙酸。在 NADP-苹果酸脱氢酶催化下,还原为苹果酸( C4 -酸),它由叶肉细胞运到维管束鞘细胞的叶绿体中。经脱羧释放二氧化碳并形成 C3 -酸, C3 -酸又回到叶肉细胞,转变成 PEP,又可接受二氧化碳,该循环由于固定
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