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- 详细信息
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- 技术资料
- 库存:
大量
- 英文名:
AllProtect™ Nucleic Acid and Protein Stabilization Reagent for Animal Tissue
- 保质期:
一年
- 供应商:
上海联迈生物工程有限公司
- 保存条件:
室温或4℃密封保存
- 规格:
25ml
| 产品编号 | 产品名称 | 产品包装 | 产品价格 |
| LM0121-25ml | AllProtect™动物组织核酸、蛋白稳定保存液 | 25ml | 321.00元 |
本产品使用范围广。本产品能够用于各种动物组织样品中RNA、DNA和蛋白的稳定和保存,如肝脏、脑、肺、脾脏、肾脏、心脏、肌肉、骨组织等,也可用于某些植物样品的保存。AllProtect™试剂用于样品蛋白的稳定和保存时不会导致蛋白变性,后续可进行Western Blot、SDS-PAGE、酶活力测定等全部常规蛋白实验。样品取出后可直接匀浆并按照常规方法进行组织裂解和蛋白抽提。
本产品的效果和液氮冻存的效果一致。本产品可以迅速渗透到组织内部,完全抑制RNase、DNase和蛋白酶(Proteinase),
避免RNA、DNA和蛋白降解,从而保持组织样品中RNA、DNA和蛋白的完整性,并且和液氮一样可以长期保存样品中的RNA、DNA和蛋白。
本产品安全便捷。本产品无任何毒性和刺激性,可在室温使用,确保了使用时的安全和便捷。和使用液氮相比,可以有效避免因使用超低温的液氮而引起的冻伤、离心管爆裂等安全隐患,并且携带、运输非常方便。
本产品适合普通新鲜组织样品中RNA、DNA和蛋白的稳定和保存,更加适合样品收集后不能够立即进行RNA(包括miRNA等小RNA)、DNA或蛋白抽提的情况,特别适用于野外或临床采集的样品、大批量采集的动物组织样品和不能立即冻存样品的稳定与保存。
在本产品中样品的保存时间和存储温度相关,例如37℃可保存1-2天,室温可保存一周,4℃可以保存6个月,-20℃或更低温度可以长期保存。具体如下表所示:
| 存储温度 | 37℃ | 25℃ | 4℃ | -20或-80℃ |
| 保存时间 | 1-2天 | 1周 | 6个月 | 长期 |
图1.小鼠肝组织在不同保存条件下的RNA、DNA的抽提效果对比。各组样品均约10mg,25℃分别用PBS和AllProtect™保存,或者液氮冻存,7天后分别使用联迈生物的RNAeasy™动物RNA抽提试剂盒(离心柱式)(LM0026)和基因组DNA小量抽提试剂盒(离心柱式)(LM0063)进行RNA和DNA抽提。A.各组抽提获得RNA量的柱状图。B.抽提获得的RNA样品的电泳图,各组均上样2μl洗脱下来的RNA样品(除PBS组外,每组约1.0μg RNA),并用1.2%甲醛变性琼脂糖凝胶进行电泳检测。本图中使用的是DNA marker。C. 各组抽提获得DNA量的柱状图。D.抽提获得的DNA样品电泳图,各组均上样2μl洗脱下来的DNA样品(除PBS组外,每组约300ng DNA),并用1.0%琼脂糖凝胶进行电泳检测。
图2.小鼠肝组织在不同保存条件下的总蛋白抽提效果对比。各组样品均约10mg,25℃分别用PBS和AllProtect™保存,或者液氮冻存,7天后分别使用联迈生物的Western及IP细胞裂解液(LM0013)进行总蛋白抽提。A. 各组抽提获得的蛋白总量柱状图。B. 抽提获得的蛋白样品SDS-PAGE电泳后的考马斯亮蓝染色图,各组按照约30μg蛋白上样(PBS组除外),并利用12% SDS-PAGE凝胶进行电泳和染色检测。C. Western blot检测各组β-Actin和Histone H3的表达情况。D. 利用半乳糖/半乳糖氧化酶检测试剂盒测得的半乳糖氧化酶活力柱状图。 本产品保存的组织样品能够与大多数RNA、DNA和蛋白抽提的方法相兼容,特别适用于联迈生物的RNAeasy™RNA抽提试剂盒(离心柱式)、基因组DNA抽提试剂盒(离心柱式)和蛋白抽提方法(详见后附的相关产品)。使用时直接将样品从AllProtect™试剂中取出,去除附着的溶液,少量的残留不会影响后续抽提效果。一个包装的LM0121-25ml可以用于约25个重量为100mg样品的保存;一个包装的LM0121-100ml可以用于约100个重量为100mg样品的保存。
包装清单:
| 产品编号 | 产品名称 | 包装 |
| LM0121-25ml | AllProtect™动物组织核酸、蛋白稳定保存液 | 25ml |
| LM0121-100ml | AllProtect™动物组织核酸、蛋白稳定保存液 | 100ml |
| — | 说明书 | 1份 |
室温或4℃密封保存,一年有效。
注意事项:
本产品可以用移液器吸取,但由于本产品的粘稠度与甘油相近,请用剪刀适当剪去枪头的尖端部分后再进行吸取。
本产品存放在蓝色包装瓶中,为方便使用还赠送了一个按压泵。按压泵第一次使用时须左右转动进行解锁。按压头下有一个保护卡扣。不取出卡扣,旋转卡扣使其开口处至按压嘴的背面,此时充分按压每次大约能流出近0.2ml液体;旋转卡扣使其开口处至按压嘴的同侧,此时按压每次大约能流出0.6ml;取出卡扣后,按压泵每次充分按压一次可以约流出1.5ml液体。
本产品每次使用后应当拧紧瓶盖或锁住按压泵,保证本产品的密闭保存,以免影响使用效果。
本产品若置于低于室温的条件保存,试剂粘度会增加,需平衡至室温(约25℃)后再使用。
实验中获得的组织样品适当处理大小后,应迅速并完全浸泡在AllProtect™试剂中。
本试剂只可用于新鲜动物组织样品中RNA、DNA和蛋白的稳定与保存,不可用于已冻存过的样品。冻存过的样品由于融解过程缓慢,会导致AllProtect™试剂很难快速浸润到组织内部以阻止核酸和蛋白的降解。
用本产品保存后,样品可能会变得微硬,为正常现象,不会影响后续RNA、DNA或蛋白抽提时组织的匀浆、裂解等操作。
样品如果需要在-20℃或-80℃长期保存,应在4℃保存过夜或更长时间后才能再转移至-20℃或-80℃保存,以保证
AllProtect™试剂更加充分有效地完全浸入组织内部。
AllProtect™试剂保存的样品置于-20℃或-80℃保存后,应先解冻并平衡至室温后再进行取样。AllProtect™保护的样品尽量减少反复冻融的次数,以免发生降解。通常用于蛋白分析时(特别如酶活性分析),冻融次数不应超过5次;用于RNA和DNA分析时,冻融次数可增加到15次。本产品本身通常不会影响酶活性,但对于反复冻融非常敏感的一些酶,本产品并不能缓解反复冻融对于这些酶活性的抑制作用。
用于植物样品保存时,应当去除表面蜡质,确保AllProtect™试剂能充分进入组织内部。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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文献和实验发生扩增。如果检测到扩增,则样本中可能含有未去除干净的 DNA。 阴性样本对照 Negative Sample Control 阴性样本指不含有目的基因或者靶序列的样本,也可以是样本保存液。从核酸提取开始做起,经历提取、逆转录(如有)和扩增过程。如果出现扩增,则说明其中某一实验步骤中存在污染,结合 NTC 结果,可以判断是否是样本提取过程中引入的污染。 阳性对照 荧光定量 PCR 实验从样本采集到最后的结果分析分为几个步骤完成,任何一个环节出现问题,都会对结果产生影响。当出现一个无扩增
本期专文要来跟大家讨论的话题是核糖核酸(RNA)的萃取,看到这里各位心中可能已经起了疑问:RNA 萃取不是很简单吗?只要照着标准步骤操作,加一加试剂就完成了,有必要大费周章特地开篇幅来谈这件事吗?其实越简单的东西遇到困难时就越难解,各位看倌就请耐着性子,听我们娓娓道来。Lab 的经验和客户的难题 以华联基因体实验室的长期以来承接客户RNA检体的经验来说,我们经常遇到的问题是: (1)RNA的总量不够 (2)RNA有严重的盐类污染 (3)RNA
?先前我们提及细胞内存在有内源性 RNase,且其表现量在不同种类的组织中差异极大。例如脑组织和心脏组织拥有相对低的内源性 RNase,但是胸腺组织和胰脏组织则保有约 100,000 倍于脑组织的内源 RNase。因此动物组织等最好都先用液氮冷冻起来,再进行后续的处理,不建议直接丢到-80℃ 冰箱。因为急速冻结可冻结 RNase 的活性,但-80℃ 冷冻算是缓慢降温,仍会造成部分 RNA 的降解; 如果无法快速冷冻检体,也可以采用市售的检体保存液,亦可达到不错的效果。如何进行样品的破碎及均质
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