猪链球菌病荧光PCR检测试剂盒(PSS)大量库存促销

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博致力于最快速、最有效的检测产品，包括猪链球菌病荧光PCR检测试剂盒(PSS)大量库存促销在内的动物疫病PCR检测试剂盒产品是我公司倾力打造的优势产品，欢迎选购。

名称：猪链球菌病荧光PCR检测试剂盒(PSS)大量库存促销
品牌：百奥莱博
等级：科研试剂
产地：国产|进口
规格：48次/盒|96次/盒
编号：SYA443

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·副溶血性弧菌耐热直接溶血素(TDH)单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA069
等级：科研实验专用
规格：48次/盒
一、简介：
本试剂盒用一对副溶血性弧菌耐热直接溶血素特异性引物，结合一条特异性探针，用荧光PCR技术对副溶血性弧菌耐热直接溶血素的核酸进行体外扩增检测，用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。

二、用途：
该试剂盒适用于检测水样粪便、疑似污染的水、食物等样本中的副溶血性弧菌耐热直接溶血素(TDH)，用于副溶血性弧菌耐热直接溶血素(TDH)感染的辅助诊断，其检测结果仅供临床参考。

三、试剂盒组成：(48T)

 

组份	数量	规格
TDH反应液(TDH-qPCR MIX)	1管	672μL/管
DNA抽提液(DNA Extraction)	2管	1.5mL/管
酶混合物(Enzymes MIX)	1管	48μL/管
阴性对照(NTC)	1管	50μL/管
TDH 阳性对照(TDH -PTC)	1管	50μL/管

四、荧光PCR仪器适用范围：
ABI 系列、MJ 系列、Roche 系列，博日系列及其他荧光定量PCR 检测仪。

五、储存条件及有效期：
本试剂盒于-20℃以下保存，有效期为6 个月。

六、样品采集、前处理与DNA提取
6.1 样品采集
水样便取0.5-1 mL；疑似污染的食物取1g。
6.2 样本前处理：
水样便13000rpm离心2min，去尽上清；疑似污染的食物用手术剪剪碎混匀后取0.05g于研磨器中研磨，加入1.5mL生理盐水后继续研磨，待匀浆后转至1.5mL灭菌离心管中，8000rpm离心2min，取上清液100μL于1.5mL灭菌离心管中；疑似污染的水直接取100μL。
6.3 DNA提取
可采用PCR试剂盒配备的DNA抽提液，按以下说明进行DNA核酸的粗提。也可采购北京百奥莱博科技有限公司生产的DNA提取试剂盒(过柱法-荧光配套)或其他合适商业化产品，并按照相应试剂盒说明进行操作。
对上述处理好的样本加入50uL核酸提取液，100℃恒温处理10min，13000rpm离心5min，取上清液转移至新的1.5mL EP管，-20℃保存；
 注：阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取)，直接取5μL加入到反应体系中即可。
由于阳性对照浓度较高，建议最后在样品制备区域加入阳性对照。

七、检测步骤：
7.1 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR 反应液(TDH-qPCR MIX)、酶混合液(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm 离心10s。
设所需要的PCR 反应管管数为N(N=样本数+1 管阴性对照+1 管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：

试剂	每个反应加入的量	N个反应加入的量
荧光PCR反应液	14µL	N×14µL
酶混合液	1µL	N×1µL
总量	15µL	N×15µL

算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm 离心10s，向设定的N 个PCR 反应管中分别加入15μL 荧光PCR 反应液，向每管中加入处理后样品/阴性对照(NTC)/阳性对照(TDH-PTC)5μL，10000rpm 瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入实时荧光PCR仪器的反应槽内。推荐循环条件：

	1循环	50℃ for 2 min
预变性	1循环	95℃ for 10 min
PCR扩增	40循环	95℃ for 15 sec 60℃ for 60 sec

在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。

八、结果分析：
8.1 结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整，以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的最高点为准。
8.2 试验成立判定
(1)阴性对照(NTC)：不应产生任何的扩增曲线。
(2)阳性对照(TDH-PTC)：均产生扩增曲线。
(3)以上条件应同时满足，否则，此次试验视为无效。
8.3 结果判定
(1)在试验成立的条件下，Ct值≤35的样本为阳性，表明副溶血性弧菌耐热直接溶血素核酸阳性。
(2)Ct值显示为无的样本为阴性样本，表明副溶血性弧菌耐热直接溶血素核酸阴性。
(3)如果Ct值>35，判为可疑样品。对于可疑样品，先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线，则为可疑阳性，否则判为阴性。
(4)对于可疑阳性样品，重新抽提核酸，再次进行副溶血性弧菌耐热直接溶血素qPCR检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线，判为样本阳性，表明副溶血性弧菌耐热直接溶血素核酸阳性；否则判为样本阴性。

九、注意事项：
(1)初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
(2)所有使用的离心管应高压灭菌，而且必须不含DNA 酶。
(3)PCR 操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR 扩增区等)，防止实验室污染。
(4)样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行，以免污染。
(5)试剂盒里所有物品应视为污染物对待，并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。


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·新冠状病毒双重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA192
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·甲型H1N1流感病毒单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA147
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·猪圆环病毒II型抗体ELISA检测试剂盒
编号：SYA638
等级：科研实验专用
规格：192次/盒

·牛支原体抗体ELISA检测试剂盒
编号：SYA665
等级：科研实验专用
规格：96次/盒

·沙门氏菌单重凝胶PCR检测试剂盒
编号：SYA255
等级：科研实验专用
规格：48次/盒
一、简介：
本试剂盒用一对沙门氏菌特异性引物，对沙门氏菌DNA 进行体外扩增检测，用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。

二、用途：
该试剂盒适用于增菌培养物、疑似病料及食品中沙门氏菌(Sal)的特异性检测，用于沙门氏菌(Sal)的辅助诊断，其检测结果仅供临床参考。

三、试剂盒组成：(48T)
组份 数量 规格
沙门氏菌PCR反应液(Sal-PCR MIX) 1管 720μL/管
DNA抽提液(DNA Extraction) 2管 1.5mL/管
阴性对照(NTC) 1管 50μL/管
阳性对照(JEV-PTC) 1管 50μL/管

四、储存条件及有效期：
本试剂盒于-20℃以下保存，有效期为6个月。

五、PCR仪器适用范围
ABI系列，Roche系列等PCR检测仪等。

六、样品的采集与DNA提取
6.1 样品的采集
6.1.1 食品样品：样品的采集与预培养按照样品的采集与预培养按照《食品安全国家标准食品微生物学检验沙门氏菌检验》(GB 4789.4-2010)要求进行。
6.1.2 粪便样品：取粪便置于灭菌的收集管中送检。
6.1.3 病灶部位样品：取发病部位新鲜渗出物、粘液脓血送检。
 注：上述样品建议经过增菌后，收集培养物用于检测。
6.2 DNA提取
可采用PCR试剂盒配备的DNA 抽提液，按以下说明进行DNA 核酸的粗提。也可采购北京百奥莱博科技有限公司生产的DNA 提取试剂盒(过柱法-凝胶配套)，并按照相应试剂盒说明进行操作。
6.2.1 培养物：取培养物50μL(培养至一定浊度)或者挑取单克隆菌落与50μL DNA 抽提液充分混匀，100℃恒温10min，13000rpm 离心3min，取上清5μL 进行PCR 反应。
6.2.2 粪便样品：挑取米粒大小粪便于灭菌离心管中，加入0.5mL 生理盐水，振荡混匀，13000rpm 离心3 分钟，弃上清，沉淀中加入50μL DNA 抽提液充分混匀，100℃恒温10min，13000rpm 离心3min 取上清5μL进行PCR反应。
6.2.3 其他液体标本：取标本2-3mL，13000rpm 离心3min，弃上清，沉淀中加入50μL DNA 抽提液充分混匀，100℃恒温10min，13000rpm 离心3min 取上清5μL进行PCR反应。
 注：阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取)，直接取5μL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高，建议最后在样品制备区域加入阳性对照。

七、检测步骤：
7.1 试剂的准备
从试剂盒中取出PCR 反应液(Sal-PCR MIX)，室温融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR 反应管管数为N(N=样本数+1 管阴性对照+1 管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
PCR反应液 15µL N×15µL
向设定的N个PCR 反应管中分别加入15μL PCR 反应液，向每管中加入处理后样品/阴性对照(NTC)/阳性对照(Sal-PTC)5μL，10000rpm 瞬时离心10秒。
7.2 PCR反应条件
将各反应管放入PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
预变性 1循环 94℃ for 2 min
PCR扩增 35循环 94°C for 30 sec
58°C for 30 sec
72°C for 30 sec

八、结果分析：
(1) 称取1.5g琼脂糖放于250mL锥形瓶中，加入100mL 1×TAE电泳缓冲液，微波炉加热溶解，稍冷后加入10μL染色液混匀，倒入插有梳子的制胶板中。
(2) 待胶凝固后，取10μL Maker(推荐使用DL2000 Maker)点样于左侧凝胶孔中，取10μL PCR产物依次点样于凝胶孔中，电压值设定为电泳槽正负极距离(cm)与5(V/cm)的乘积。待*酚兰指示剂电泳至凝胶中部时停止电泳并使用凝胶成像仪或紫外透照台观察结果。


九、结果分析：
(1) 阴性对照(NTC)：无任何的条带(引物带除外)。
(2) 阳性对照(Sal-PTC)：在260bp处有条带。
(3) 被检样品：在260bp处有条带为阳性样品，否则为阴性样品。
(4) 以上条件应同时满足，否则，此次试验视为无效。



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·禽流感H9N1病毒双重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA159
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·肉毒杆菌8种通用型单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA016
英文名称：Fluorescent PCR detection kit for 8 kinds of botox
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·弓形虫(Toxoplasma gondii)单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA466
英文名称：Fluorescent PCR detection kit for 8 kinds of botox
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·人细小病毒B19核酸检测试剂盒
编号：SYA774
英文名称：Fluorescent PCR detection kit for 8 kinds of botox
等级：科研实验专用
规格：48次/盒
人类细小病毒B19是英国科学家Cossart及其同事于1977年在筛查无症状乙肝患者血清时无意发现的，根据生化及分子生物学特点将其归为细小病毒科。由于其是在B组的第19号样品中发现的，故命名为B19病毒。最初人们认为B19是人群中普遍存在而不致病的一种病毒，但后来发现，B19感染是引起传染性红斑、慢性溶血性贫血患者发生再障危象、免疫抑制患者慢性贫血、孕期流产、死胎的病原体。
本试剂盒适用于检测人全血等标本中的人细小病毒(B19)DNA，适用于人细小病毒(B19)感染的辅助诊断，其检测结果仅供参考。
【检验原理】
本试剂盒用一对人细小病毒B19特异性引物，结合一条特异性探针，用荧光PCR技术对人细小病毒B19核酸进行体外扩增检测，用于对可疑感染者的病原学诊断。
【试剂组成】
名称 数量 规格
核酸提取液 2管 1.5ml
酶液 1管 50μl
B19反应液 1管 1.0ml
B19阳性质控品 1管 50μl
阴性质控品 1管 250μl
说明：不同批号的试剂盒组分不可交互使用。
【储存条件及有效期】
-20℃避光保存、运输、避免反复冻融，有效期12个月。
【适用仪器】
ABI系列、MJ系列、Roche系列、博日系列及其他荧光定量PCR检测仪。
【标本采集】
1. 适用标本类型：人全血；
2. 标本采集：
血液:无菌注射器抽取外周血1-2ml注入EDTA2Na(或柠檬酸*)抗凝管；
【保存和运输】
上述标本短期内可保存于-20℃，长期保存可置-70℃，但不能超过6个月，标本运送应采用0℃冰壶。
【使用方法】
1. 样品处理(样本处理区)
1.1 样本前处理
取抗凝血下层(细胞层)50μl，加入200μl ddH2O使其胀破。
1.2 DNA提取
1) 取上述处理好的标本40μl，加入等体积核酸提取液，100℃恒温处理10分钟，13000 rpm离心5分钟，取上清液转移至新的1.5ml EP管，-20℃保存；
2) DNA的提取也可以采用北京百奥莱博科技有限公司生产的DNA提取试剂盒(离心柱提取法)，请严格按照试剂盒说明书进行操作。
2. 试剂配制(试剂准备区)
根据待检测样本总数，设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1
管阴性对照+1管阳性对照)，每测试反应体系配制如下表：
试剂 B19 反应液 酶液
用量 20μl 1μl
3. 加样(样本处理区)
将步骤1提取的DNA、阳性质控品、阴性质控品各取4μl，加入相应的反应管中，盖好管盖，混匀，短暂离心。
4. PCR扩增(核酸扩增区)
4.1 将待检测反应管置于荧光定量PCR仪反应槽内；
4.2 推荐循环参数设置：
步骤 循环数 温度 时间 收集荧光信号
1 1 cycle 94℃ 2min 否
2 40 cycle 94℃ 15sec 否
55℃ 30sec 是
反应体系为25ul；荧光通道检测选择：FAM通道。
5. 结果分析判定
5.1 结果分析条件设定
1) 设置基线(baseline)：一般情况下，对ABI 7500、7700等仪器设为6-15cycle，对PE5700设为3-15cycle,对MJ Research Option2设为6-12cycle。特殊情况可对基线适当调整。
2) 设置阈值(threshold):以阈值线刚超过阴性对照扩增曲线(无规则的噪音线)的最高点。
5.2 结果判断
1) 阳性：检测样本Ct值小于等于35.0，且曲线有明显的指数增长期；
2) 可疑：检测样本Ct值大于35.0且小于40.0，重复一次实验，如果Ct值仍小于40.0，且曲线有明显的指数增长期，为阳性，否则为阴性；
3) 阴性：检测不到样本Ct值或Ct值为40。
6. 对检验结果的解析
实验室环境污染，试剂污染，标本交叉污染会出现假阳性结果；试剂运输，保存不当或试剂配制不准确引起的试剂检测效能下降，出现假阴性或定量检测不准确的结果。
7. 质控标准
1) 阴性质控品：扩增曲线无对数生长期或无Ct值显示；
2) 阳性质控品：扩增曲线有明显对数生长期，且Ct值≤32;
以上条件应同时满足，否则实验视为无效。
【注意事项】
1. 所有操作严格按照说明书进行；
2. 试剂盒内各种组分使用前应自然融化，混匀并短暂离心；
3. 反应液应避光保存；
4. 反应中尽量避免气泡存在，管盖需盖紧；
5. 使用一次性吸头、一次性手套和各区专用工作服；
6. 样本处理、试剂配制、加样需在不同区进行，以免交叉污染；
7. 实验完毕后用10%次*酸或75%酒精或紫外灯处理工作台和移液器；
8. 试剂盒里所有物品应视为污染物对待，并按照《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。

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