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RIPA lysis buffer (Weak)
12个月
北京百奥莱博科技有限公司
-20℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京现货RIPA裂解液(弱)厂家直销是高品质的蛋白质研究产品,由北京百奥莱博供应,用于科研实验,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多RIPA裂解液(弱)等蛋白质研究产品请联*(代"系")我司咨询订购。
北京百奥莱博科技有限公司专业生产供应北京现货RIPA裂解液(弱)厂家直销,产品信息:
类别:蛋白质研究
英文名:RIPA lysis buffer (Weak)
产品名 | 产品编号 | 包装规格 |
RIPA裂解液(弱) | SY0315 | 100ml |
编号:SY0315
品牌:百奥莱博
英文名:RIPA lysis buffer (Weak)
产地:国产|进口
RIPA裂解液(RIPA Lysis Buffer),其本意是Radio Immunoprecipitation Assay,是一种传统的细胞组织快速裂解液,对动物细胞胞膜、胞浆、胞核成分均有裂解作用。根据其裂解液的强度不同,大致可以分为强、中、弱三类。
本品为较为温和的裂解液(即RIPA裂解液(弱)),含有sodiu*(代"m") orthovanadate,sodiu*(代"m") fluoride,EDTA,leupeptin等多种抑制剂,可以有效抑制蛋白降解。裂解得到的蛋白样品可用于常规的Western、IP等实验。
注意事项
1)需自备PMSF。
2)裂解样品的所有步骤都需在冰上或4℃进行。
3) 用RIPA裂解液裂解得到的蛋白样品,可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定其蛋白浓度(SY0298)。由于含有较高浓度的去垢剂,不能用Bradford法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。
4)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
储存条件:-20℃,避免反复冻融,有效期12个月。
使用说明:
(一) 细胞样品
1)融解RIPA裂解液,混匀。取适当量的裂解液,在使用前数分钟内加入PMSF,使PMSF的最终浓度为1mM。
2)贴壁细胞:去除培养液,用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍(如果血清中的蛋白没有干扰,可以不洗)。按照6孔板每孔加入150-250μl 裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下,使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞1-2秒后,细胞就会被裂解。
悬浮细胞:离心收集细胞,用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞加入150-250μl 裂解液的比例加入裂解液。再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多,必需分装成50-100万细胞/管,然后再裂解。
3)充分裂解后,10000-14000g离心3-5分钟,取上清,即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
裂解液用量说明:通常6孔板每孔细胞加入150μl裂解液已经足够,但如果细胞密度非常高可以适当加大裂解液的用量到200μl或250μl。
(二)组织样品:
1)把组织剪切成细小的碎片。
2)融解RIPA裂解液,混匀。取适当量的裂解液,在使用前数分钟内加入PMSF,使PMSF的最终浓度为1mM。
3)按照每20mg组织加入150-250μl裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液,如果需要高浓度的蛋白样品,可以适当减少裂解液的用量。)
4)用玻璃匀浆器匀浆,直至充分裂解。
5)充分裂解后,10000-14000g离心3-5分钟,取上清,即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
6)如果组织样品本身非常细小,可以适当剪切后直接加入裂解液裂解,通过强烈vortex使样品裂解充分。然后同样离心取上清,用于后续实验。直接裂解的优点是比较方便,不必使用匀浆器,缺点是不如使用匀浆器那样裂解得充分。
【注】:RIPA裂解液的裂解产物中经常会出现一小团透明胶状物,属正常现象。该透明胶状物为含有基因组DNA等的复合物。在不检测和基因组DNA结合特别紧密的蛋白的情况下,可以直接离心取上清用于后续实验;如果需要检测和基因组结合特别紧密的蛋白,则可以通过超声处理打碎打散该透明胶状物,随后离心取上清用于后续实验。如果检测一些常见的转录因子,例如NF-kappaB、p53等时,通常不必进行超声处理,就可以检测到这些转录因子。
北京现货RIPA裂解液(弱)厂家直销专业优质供应商:北京百奥莱博科技有限公司
关键词:SY0315,RIPA裂解液,弱,RIPA裂解液(弱),RIPA lysis buffer (Weak)
RIPA裂解液(弱)由我公司长期专业供应,公司为广大顾客提供 RIPA裂解液(弱)产品说明,生产厂家,价格,规格,哪里买 。公司遵循高品质的产品,高质量的技术服务,合理的价格,是国内研发与生产,销*(代"售")合为一体的一家大型企业,我们承诺:以最少的经费,最高的效率,得到您最需要的实验结果,同时我们承诺,若有质量问题,无条件退换。
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编号 | 类别 | 名称 |
SY0118 | 报告基因检测 | AREB6-Luc荧光素酶报告基因质粒 |
SY0614 | 其他细胞生物学试剂 | 重组人IFN-γ |
SY0004 | DNA纯化 | 蜗牛酶 |
SY0690 | 二抗 | R-藻红蛋白标记山羊抗兔小鼠IgG F(ab)2片段(Fcγ片段特异性) |
SY0691 | 二抗 | Alexa Fluor 488标记山羊抗小鼠IgG(H+L)F(ab)2片段 |
SY0745 | 其他分子生物学试剂 | Alexa Fluor 647标记链霉亲和素 |
SY0007 | DNA纯化 | 核糖核酸酶A(来源于牛胰腺) |
SY0064 | 报告基因检测 | SP1萤火虫荧光素酶报告基因质粒 |
SY0517 | 其他培养基 | *化可的松 |
SY0518 | 其他培养基 | 植物血凝素 |
SY0663 | 一抗 | 小鼠抗RFP-tag单克隆抗体 |
SY0722 | 二抗 | Alexa Fluor 594标记驴抗小鼠IgG(H+L) |
SY0540 | 其他细胞生物学试剂 | 细胞膜固定剂 |
SY0049 | 核酸扩增(PCR) | 通用型动物组织PCR试剂盒 |
SY0634 | 一抗 | HRP标记小鼠抗β-actin单克隆抗体 |
SY0646 | 一抗 | 兔抗Flag-Tag多克隆抗体(DYKDDDDK) |
SY0086 | 报告基因检测 | ER-Luc荧光素酶报告基因质粒 |
SY0654 | 一抗 | HRP标记小鼠抗HA-Tag单克隆抗体 |
SY0017 | 克隆与表达 | JM109化学感受态细胞 |
SY0026 | 核酸扩增(PCR) | 2×PCR Master Mix(不含染料) |
SY0577 | 探针标记及检测 | 迪夫快速染色液 |
SY0295 | 克隆与表达 | pUM19-T Vector TA克隆载体 |
SY0290 | 核酸扩增(PCR) | 第一条链 cDNA合成试剂盒 |
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