SABC免疫组化试剂盒(小鼠/兔IgG)(DAB显色)供应

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名称：SABC免疫组化试剂盒(小鼠/兔IgG)(DAB显色)供应
产地：国产|进口
品牌：百奥莱博
编号：QN1223
英文名：SABC(Mouse/Rabbit IgG)-POD Kit
本试剂盒适合于一抗为小鼠/兔IgG的免疫组化实验，DAB显色。

试剂盒组份：
封闭液(5% BSA)——————————10ml
3% H2O2-—————————————10ml
Bio-羊抗小鼠/兔IgG浓缩液—————200ul
SABC-POD浓缩液——————————100ul
稀释液——————————————30ml
20×DAB显色液A——————————1ml
20×DAB显色液B——————————1ml

SABC是专为免疫组化和其他免疫检测而设计的，用以显示组织和细胞中抗原分布。链霉亲和素(StreptAvidin)是一种从链霉菌中提取的蛋白质，同亲和素一样，对生物素有极高的亲和力，亲和素是一个碱性蛋白质(IP=10)，经改造后可以转变成中性蛋白质。链霉亲和素等电点接近中性，对组织和细胞的非特异吸附很低，基于链霉亲和素的免疫组化方法背景很低。SABC即StreptAvidin—Biotin Complex，SABC大约可形成一百个左右的过氧化物酶和五十个左右的链霉亲和素所构成的复合物。大量的酶将保证SABC具有很高的敏感性。

操作步骤:(以石蜡切片为例)
1. 切片常规脱蜡至水(三次二甲*，三次乙醇)。
2. 3% H2O2室温处理5-10分钟以灭活内源性酶。蒸馏水洗3次。
3. 可选步聚：
a、热修复抗原，将切片浸入0.01M柠檬酸*缓冲液(PH6.0),电炉或微波炉加热至沸腾 后断电，间隔5-10分钟后，反复1-2次。冷却后PBS(pH7.2-7.6)洗涤1-2次。
b、酶消化，滴加消化液，37℃10分钟，PBS(pH7.2-7.4)洗涤2-3次。
c、跳过此步，直接进入下一步。
4. 滴加5% BSA封闭液,室温20分钟。甩去多余液体, 免洗。
5. 用稀释液将一抗按一定比例稀释(稀释后的一抗4℃可保存一周)，也可另行购买抗体稀释液。滴加稀释的一抗37℃ 孵育1小时左右或20℃ 2小时左右，也可4℃过夜。PBS(pH7.2-7.4)洗涤3次，每次2分钟(一抗的稀释度、孵育时间和温度与染色强度、背景有直接关系。一般来说，阳性染色强度不够时，可提高一抗浓度和延长孵育时间;背景过高时，可降低一抗浓度和缩短孵育时间)。
6. 根据用量，用稀释液将Bio-羊抗小鼠/兔IgG浓缩液按1:50-100稀释成工作液(1ml稀释液加入10-20ul Bio-羊抗小鼠/兔IgG浓缩液混匀，此工作液4℃可保存一周)。滴加Bio-羊抗小鼠/兔IgG工作液,20-37℃ 孵育30分钟。PBS(pH7.2-7.4)洗涤3次，每次2分钟。
7. 根据使用量，用稀释液将SABC-POD浓缩液按1:100稀释成工作液(1ml稀释液加入10ul SABC-POD浓缩液混匀，此工作液4℃可保存一周)。滴加SABC-POD工作液,20-37℃，30分钟。PBS (pH7.2-7.4)洗涤4次，每次5分钟。
8. DAB显色:根据用量，用PBS(pH7.2-7.4)配制，按1ml PBS加入50ul 20×DAB显色液A，加入50ul 20×DAB显色液B 。充分混匀后滴加到切片上。室温显色，镜下控制反应时间，一般在5-30分钟之间。蒸馏水洗涤终止反应。
9. 苏木素轻度复染。脱水,透明,封片。显微镜观察。

对于细胞爬片，固定后，PBS漂洗两次，再用0.5% Triton X-100室温孵育20分钟，PBS漂洗两次，3% H2O2处理15分钟;PBS漂洗两次，接上述第4步。
对于冰冻切片，固定后，PBS漂洗两次，接上述第二步。

注意事项：如果染色背景过高，在SABC反应之后，DAB显色之前,用加有0.01—0.02% TWEEN-20的PBST(pH7.2-7.4)洗涤切片4次，PBS洗2次，然后DAB显色。

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·二乙酰一肟
编号：QN0003
英文名称：2,3-Butanedione Monoxime
规格：10g
CAS：57-71-6
分子式：C4H7NO2
分子量：101.1039
别名：2,3-丁二酮一肟;丁二酮单肟;二乙酰一肟

·腺苷
编号：QN0571
英文名称：Adenosine
规格：5g
CAS号：58-61-7
分子式：C10H13N5O4
分子量：267.24
性状：腺苷为白色或类白色结晶性粉末
溶解性：溶于水、甲醇，微溶于丙*(代"酮")、正己烷
储存条件：2～8℃

·苄基三甲基*化铵
编号：QN0594
英文名称：Benzyltrimethylammonium chloride
规格：100g|500g
本品常用于用于测定铂、钯、汞和金，用作乳化剂和阻聚剂。

CAS号：56-93-9
分子式：C10H16ClN
分子量：185.69

·瓜尔豆胶
编号：QN0839
英文名称：Guar gum
规格：100g
CAS号：9000-30-0

·20×SSC缓冲液，pH5.3
编号：QN1057
英文名称：saline sodiu*(代"m") citrate
规格：100mL|500mL
SSC缓冲溶液是分子生物学中最标准的印迹和杂交处理溶液，旨在用于各种杂交实验达到变性和清洗的目的，主要成分为*化*和柠檬酸*。SSC缓冲液中柠檬酸*起缓冲作用，盐离子(Na )中和核酸主链上的负电荷，使其呈电中性，这样可以使探针和靶序列的结合比较容易进行。也用于SDS-PAGE电泳分离胶配制。用于核酸杂交，不同浓度作用不同：常用2×，及0.5×

2×SSC：高盐洗膜，洗去部分非特异性结合的探针。
0.5×SSC：低盐洗膜，增加核酸链的严紧性，使得 RNA/DNA 之间的排斥力增加。
本产品为20×浓缩液，经过滤高压除菌处理，可根据实验要求使用去离子水直接稀释使用。

储存条件：常温

·L-甘露糖
编号：QN0143
英文名称：saline sodiu*(代"m") citrate
规格：1g|5g
别名：L-吡喃甘露糖
CAS号：10030-80-5
分子式：C6H12O6
分子量：180.16


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·右旋糖酐10000
编号：QN0841
英文名称：Dextran 10000
规格：10g
CAS号：9004-54-0

·甜菜碱盐*(代"酸")盐
编号：QN0731
英文名称：Betaine hydrochloride
规格：100g|500g
本品为高效甲基供体，可取代*化胆碱，减少蛋*酸的使用。

CAS号：590-46-5
分子式：C5H11NO2·HCL
分子量：153.6
储存条件：室温
性状：白色单斜结晶
纯度：＞98.0%

·X-gal(20mg/ml)
编号：QN1049
英文名称：Betaine hydrochloride
规格：5ml
IPTG为安慰性诱导物，X-gal为生色底物，二者共同用于蓝白斑筛选。IPTG可诱导载体Lac操纵子DNA区段合成β-半乳糖苷酶*基端片段，该片段可与宿主细胞编码的缺陷型β-半乳糖苷酶实现基因内互补(α 互补)。实现α互补的细菌铺在含有X-gal生色底物的培养基上，可形成蓝色菌落。外源DNA插入质粒的多克隆位点后可破坏α互补作用，将产生白色菌落。此产品为X-gal用DMF溶解过滤后配成的无菌溶液。

储存条件：-20℃

·β-葡聚糖酶
编号：QN0490
英文名称：β-Dextranase
规格：5g
CAS号：9025-70-1
储存条件：2～8℃
酶活：3600000u/g
性状：固体粉末

·PMSF(100mM)
编号：QN0440
英文名称：β-Dextranase
规格：10ml|100mL
本品仅可仅用于科研实验

别名：*甲磺酰*;PMSF
CAS号：329-98-6
分子式：C7H7SO2F
分子量：174.2
储存条件：-20℃
性状：液体


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