北京RIPA裂解液(弱)现货

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北京百奥莱博主要从事生物试剂的生产和销*(代"售")，产品线涵盖北京RIPA裂解液(弱)现货在内的分子生物学试剂产品，还包括PCR及荧光定量PCR、核酸提取试剂盒类、样本核酸保护试剂、核酸提取、克隆与转化、蛋白纯化、蛋白检测、免疫组化、细胞凋亡与抗体等。

名称：RIPA裂解液(弱)
品牌：百奥莱博
规格：100ml
产地：国产|进口
英文名：RIPA lysis buffer (Weak)
编号：SY0315
RIPA裂解液(RIPA Lysis Buffer)，其本意是Radio Immunoprecipitation Assay，是一种传统的细胞组织快速裂解液，对动物细胞胞膜、胞浆、胞核成分均有裂解作用。根据其裂解液的强度不同，大致可以分为强、中、弱三类。

本品为较为温和的裂解液（即RIPA裂解液（弱）），含有sodiu*(代"m") orthovanadate，sodiu*(代"m") fluoride，EDTA，leupeptin等多种抑制剂，可以有效抑制蛋白降解。裂解得到的蛋白样品可用于常规的Western、IP等实验。

注意事项

1）需自备PMSF。
2）裂解样品的所有步骤都需在冰上或4℃进行。
3） 用RIPA裂解液裂解得到的蛋白样品，可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定其蛋白浓度（SY0298）。由于含有较高浓度的去垢剂，不能用Bradford法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。
4）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

储存条件：-20℃，避免反复冻融，有效期12个月。

使用说明：

(一) 细胞样品

1）融解RIPA裂解液，混匀。取适当量的裂解液，在使用前数分钟内加入PMSF，使PMSF的最终浓度为1mM。
2）贴壁细胞：去除培养液，用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍(如果血清中的蛋白没有干扰，可以不洗)。按照6孔板每孔加入150-250μl 裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下，使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞1-2秒后，细胞就会被裂解。
悬浮细胞：离心收集细胞，用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞加入150-250μl 裂解液的比例加入裂解液。再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多，必需分装成50-100万细胞/管，然后再裂解。
3）充分裂解后，10000-14000g离心3-5分钟，取上清，即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
裂解液用量说明：通常6孔板每孔细胞加入150μl裂解液已经足够，但如果细胞密度非常高可以适当加大裂解液的用量到200μl或250μl。

（二）组织样品：

1）把组织剪切成细小的碎片。
2）融解RIPA裂解液，混匀。取适当量的裂解液，在使用前数分钟内加入PMSF，使PMSF的最终浓度为1mM。
3）按照每20mg组织加入150-250μl裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液，如果需要高浓度的蛋白样品，可以适当减少裂解液的用量。)
4）用玻璃匀浆器匀浆，直至充分裂解。
5）充分裂解后，10000-14000g离心3-5分钟，取上清，即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
6）如果组织样品本身非常细小，可以适当剪切后直接加入裂解液裂解，通过强烈vortex使样品裂解充分。然后同样离心取上清，用于后续实验。直接裂解的优点是比较方便，不必使用匀浆器，缺点是不如使用匀浆器那样裂解得充分。
【注】：RIPA裂解液的裂解产物中经常会出现一小团透明胶状物，属正常现象。该透明胶状物为含有基因组DNA等的复合物。在不检测和基因组DNA结合特别紧密的蛋白的情况下，可以直接离心取上清用于后续实验；如果需要检测和基因组结合特别紧密的蛋白，则可以通过超声处理打碎打散该透明胶状物，随后离心取上清用于后续实验。如果检测一些常见的转录因子，例如NF-kappaB、p53等时，通常不必进行超声处理，就可以检测到这些转录因子。
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北京RIPA裂解液(弱)现货极具性价比，此外，我公司正火爆促销以下产品：

 

编号	名称
SY0359	SDS-PAGE凝胶配制试剂盒
SY0174	HNF4-GFP报告基因质粒
SY0393	His标签蛋白琼脂糖高速纯化树脂
SY0746	辣根过氧化物酶标记链霉亲和素
SY0099	GAL4-Luc荧光素酶报告基因质粒
SY0559	7-*基放线菌*(代"素")D
SY0141	SRF Luc荧光素酶报告基因质粒
SY0452	牛血清白蛋白(诊断级别)
SY0447	人源氧化高密度脂蛋白
SY0167	MEF2-GFP报告基因质粒
SY0415	27mm透析袋(透析分子量50kDa)
SY0749	Cy3标记链霉亲和素
SY0163	PPARγ-GFP报告基因质粒
SY0557	二乙酸荧光素
SY0408	30ml重力层析空柱
SY0646	兔抗Flag-Tag多克隆抗体(DYKDDDDK)
SY0387	透明质酸酶
SY0694	Alexa Fluor 790标记山羊抗小鼠IgG(H+L)
SY0160	RAR-GFP报告基因质粒
SY0606	悬浮细胞专用脂质体核酸转染试剂
SY0462	多聚L-赖*酸溶液(5mg/ml)(分子量15万～30万)
SY0487	体内巨噬细胞清除剂(阴离子**松)
SY0305	*甲基磺酰*(代"*")
SY0271	饱和酚
SY0501	Calcein-AM/PI活细胞/死细胞双染试剂盒
SY0620	3-吲哚乙酸
SY0149	AR-Luc报告基因慢病毒颗粒
SY0082	GLI-Luc荧光素酶报告基因质粒
SY0553	细胞膜可渗透*离子荧光探针
SY0228	RXR-GFP报告基因质粒
SY0637	HRP标记小鼠抗GAPDH单克隆抗体
SY0025	PCR Master Mix (含染料)
SY0324	蛋白酶抑制剂Cocktail, EDTA-free, 100×DMSO储液
SY0179	FOXO-GFP报告基因质粒
SY0793	亲和硅烷
SY0296	pET-28a(+) Vector 表达载体
SY0310	磷酸酶抑制剂混合物(100×，储存液)
SY0657	小鼠抗GST-tag单克隆抗体