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- 库存:
310
- 英文名:
Agarose
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
室温
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产供应琼脂糖北京价格,我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:琼脂糖北京价格
规格:50g
品牌:百奥莱博
编号:YT019
产地:国产|进口
本品为不含DNase、RNase和Protease的琼脂糖,配制成的琼脂糖凝胶的凝固点为 34-38℃,熔点为87-89℃。常用于配制核酸分析凝胶,例如用于DNA电泳的琼脂糖凝胶、用于RNA电泳的琼脂糖凝胶等。常使用TAE或TBE作为电泳液。
琼脂糖凝胶的浓度和DNA电泳的分辨率及理想的电泳液参考下表。对于分辨率要求不高时,使用TAE和TBE均可;对于分辨率要求比较高时,对于较低浓度的胶和大分子量核酸宜使用TAE,对于较高浓度的胶和小分子量核酸宜使用TBE。
| 胶浓度(w/v) | 理想分离范围 | 理想的电泳液 |
| 0.8% | 800-22,000 bp | TAE |
| 1.0% | 500-10,000 bp | TAE/TBE |
| 1.2% | 400-7,000 bp | TAE/TBE |
| 1.5% | 250-5000 bp | TAE/TBE |
| 2.0% | 150-3,000 bp | TBE |
储存条件:室温。
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琼脂糖北京价格关键词:YT019,琼脂糖,Agarose
·生物素标记DNA探针制备试剂盒(随机引物法)
编号:YT031
英文名称:Biotin Random Prime DNA Labeling Kit)
规格:10次
本试剂盒是一种通过随机引物标记反应产生生物素标记DNA探针的试剂盒。本试剂盒标记的生物素DNA探针可以用于常规的Northern、Southern、colony或plaque hybridization、dot或slot blot、原位杂交等。
在Klenow酶(Klenow fragment,3"-5"exo-)催化下,通过随机引物标记反应(random prime labeling)可以把生物素标记的Biotin-11-dUTP掺入到新合成的DNA探针中,这样就可以产生生物素标记的DNA探针。在随机引物标记反应过程中,一些标记好的DNA探针可以被Klenow酶从模板DNA链上驱赶下来。这样在模板量较少的情况下,通过随机引物标记反应,最后可以产生比模板DNA量更多的生物素标记DNA探针,可多达1-15倍左右。
本试剂盒可以用于多种DNA模板的标记,包括DNA片段、线性化的质粒或cosmid、超螺旋DNA等。用于本试剂盒的模板DNA片段应不小于100bp,小于100bp的DNA模板可以使用百奥莱博的生物素3"末端DNA标记试剂盒(YT030)进行DNA探针标记。
用于本试剂盒的模板DNA的量应不少于10ng,推荐的模板用量为100ng-1μg。本试剂盒中提供了已经用生物素标记好的Biotin-Control DNA,可以用作检测生物素DNA探针标记效率的对照。生物素标记DNA可以使用百奥莱博的化学发光法生物素标记核酸检测试剂盒(YT032)或其它适当试剂盒进行检测。本试剂盒可以用于10个标记反应。
试剂盒组分:
| Random Primer in Buffer(5X) | 105μl |
| Klenow Fragment | 11μl |
| Biotin-Labeling Mix | 50μl |
| Ultrapure Water | 1ml |
| Biotin-Control DNA(3ng/μl) | 50μl |
| 探针标记终止液 | 100μl |
储存条件:-20℃。
使用说明:
1. 在一离心管或PCR管内加入100ng-1μg DNA模板,再加入适量试剂盒提供的Ultrapure Water,至总体积为34μl。(通常100-300ng DNA模板已经足够用于一次标记反应)
2. 加入10μl Random Primer in Buffer (5X),混匀。如有液滴沾在管壁上,高速离心数秒使所有液体集中在管底。
3. 沸水浴加热5分钟,或在PCR仪上100℃加热5分钟(如果不能设置100℃,99℃加热5分钟也完全可以)。
4. 立即放置到预先准备好的冰水浴中至少2-3分钟。
5. 加入5μl Biotin-Labeling Mix。
6. 加入1μl Klenow Fragment,混匀。如有液滴沾在管壁上,高速离心数秒使所有液体集中在管底。
7. 37℃孵育1小时或过夜(不宜超过20小时)。37℃孵育过夜可以显著增加生物素标记DNA的产量,因此推荐孵育过夜(12-20)小时。
8. 加入3μl探针标记终止液,混匀,终止标记反应。至此标记反应已经全部完成,标记好的DNA可以-20℃保存。
9. 此时探针可以直接用于探针标记效率的检测及Southern、Northern等后续操作。
10. 整个探针标记反应的流程参见下表:
| 100ng-1μgDNA模板 | xμl |
| Ultrapure Water | (34-x)μl |
| Random Primer in Buffer (5X) | 10μl |
| 100℃ 5分钟,立即冰浴冷却 | |
| Biotin-Labeling Mix | 5μl |
| Klenow Fragment | 1μl |
| 总体积 | 50μl |
| 37℃孵育过夜 | |
| 探针标记终止液 | 3μl |
| -20℃保存 | |
| 此时可用于标记效率的检测及Southern、Northern等后续检测 | |
11. 探针标记效率的检测:可以对标记好的探针进行适当梯度稀释后,使用百奥莱博的化学发光法生物素标记核酸检测试剂盒(YT032)或其它适当的方法进行检测。通常探针的标记效率可以参考下表:
| 模板DNA量 | 生物素标记DNA产量 | |
| — | 孵育1小时 | 孵育20小时 |
| 10ng | 80ng | 900ng |
| 30ng | 150ng | 1350ng |
| 100ng | 350ng | 1650ng |
| 300ng | 750ng | 2200ng |
| 1000ng | 1300ng | 2600ng |
| 3000ng | 1600ng | 2600ng |
注意:具体的探针标记效率还和模板DNA的长度、纯度等因素有关,上表的数值仅供参考。
12. 使用本试剂盒所获得的生物素标记DNA的长度通常在数百bp左右。具体的长度因模板的长度而有所不同。例如模板DNA的长度为1kb,则生物素标记DNA产物的长度通常为100-1000bp,平均长度约为300bp左右。
琼脂糖北京价格关键词:YT019,琼脂糖,Agarose
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