细胞毒性检测试剂盒(乳酸脱氢酶法)大量库存促销

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细胞毒性检测试剂盒(乳酸脱*酶法)大量库存促销由专业试剂供应商北京百奥莱博提供，用于生化科学研究，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多细胞毒性检测试剂盒(乳酸脱*酶法)等细胞凋亡与增殖产品请联*(代"系")我司咨询订购。

名称：细胞毒性检测试剂盒(乳酸脱*酶法)大量库存促销
品牌：百奥莱博
编号：YT125
英文名：LDH Cytotoxicity Assay Kit
规格：100次|500次
本试剂盒也称乳酸脱*酶检测试剂盒(LDH Assay Kit)或乳酸脱*酶释放检测试剂盒(LDH Release Assay Kit)，是一种基于diaphorase催化的INT显色反应，通过比色法检测细胞毒性时释放的乳酸 脱*酶活性或检测其它样品中的乳酸脱*酶活性的试剂盒。

本试剂盒可以用于常规的乳酸脱*酶活性的检测，更常用于以LDH释放为指标的细胞毒性检测。同时，基于细胞总乳酸脱*酶活性的检测，本试剂盒也可以用于检测细胞增殖和细胞毒性检测。

细胞凋亡或坏死而造成的细胞膜结构的破坏会导致细胞浆内的酶释放到培养液里，其中包括酶活性较为稳定的乳酸脱*酶(lactate dehydrogenase, LDH)。通过检测从质膜破裂的细胞中释放到培养液中的LDH的活性，就可以实现对细胞毒性的定量分析。LDH释放被看做细胞膜完整性的重要指标，并被广泛用于细胞毒性检测。LDH释放被认为是以前使用放射性的51Cr标记细胞，随后通过51Cr释放进行 细胞膜完整性检测的安全有效的替代方法。

本试剂盒的基本原理是，在乳酸脱*酶的作用下，NAD+被还原生成NADH，NADH和INT (2-p-iodophenyl-3-nitrophenyl tetrazolium chloride)被硫辛酰胺脱*酶(diaphorase)催化反应生成NAD+和强生色物甲臜(formazan)，在490nm波长下产生吸收峰，从而可以通过比色来定量乳酸脱*酶的活性。吸光度与乳酸脱*酶活性成线性正相关。该酶联反应原理的示意图如下：



试剂盒组份（100次为例）：
LDH释放试剂——————1.5ml
乳酸溶液———————2ml
酶溶液————————1ml×2
INT溶液(10X)—————0.2ml
INT稀释液——————2ml

注意事项：
1. 冷冻会使样品中部分乳酸脱*酶失活，4℃可放置2-3天。建议样品准备好后尽量当天完成测定。
2. 如果检测细胞培养液中的乳酸脱*酶，由于血清含有乳酸脱*酶，建议血清的使用浓度不要超过1%，并最好使用热灭活血清。如果一定需要使用10%血清，在检 测时一定要设置没有细胞，但加入了相同体积培养液的对照孔，以用于消除背景。
3. 细胞过度生长、密度过高、离心速度过大、培养箱内外温差过大，都会造成细胞释放乳酸脱*酶增加。
4. 如果希望进行乳酸脱*酶活性的绝对定量，用户需自备乳酸脱*酶标准品。

储存条件：-20℃，有效期一年。

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·p35/p25抗体
编号：YT833
英文名称：anti-p35/p25 antibody
规格：>40次
本抗体是用人工合成的人p35/p25羧基端(carboxy-terminal)的一段多肽进行适当修饰后免疫rabbit，然后用protein A和抗原多肽亲和柱经过两步纯化而得到的高纯度抗体。本抗体如果用于常规的Western检测，至少可以检测40次。

本抗体不仅可以识别p35，也同时可以识别p25。

Cdk5(cyclin dependent kinase-5)是细胞周期进程中的一个关键蛋白，在脑中高表达。p35在神经细胞中特异性表达，可以和Cdk5直接结合，并激活Cdk5。p25是p35被calpain剪切后残留下来的羧基端(carboxy-terminal)部分，比p35可以更长时间地激活Cdk5。p25在脑部的累积被认为和老年痴呆症有一定关系。

产品组份：
p35/p25抗体————40μl
Western一抗稀释液————40ml

抗体参数：
免疫原物种：人
免疫原：人工合成的人p35/p25羧基端(carboxy-terminal)的一段多肽
宿主：兔
用途：WB,IP,IF
交叉反应性：人，小鼠，大鼠
抗体识别位点：C-terminal
p35/p25分子量：～25/35kD
推荐稀释比例：WB(1:200-1000),IP(1:50),IF(1:100-500)

注意事项：
1. 在Western实验后，请注意回收稀释的抗体。回收的抗体在进行Western实验时至少可以重复使用10次。稀释后的抗体，包括已经使用过的稀释抗体，4℃保存。
2. 回收后重复使用的抗体，使用方法同新鲜稀释的抗体。如果在重复使用过程中发现抗体出现轻微混浊现象，可以10000g离心1-3分钟，取上清用于后续检测。如果回收的抗体出现明显的絮状物或长霉长菌等情况，则可以考虑废弃该抗体。
3. 对于本抗体，Western检测时一抗要4℃缓慢摇动过夜，如果仅短时间与一抗孵育检测效果较差。

储存条件：-20℃，有效期一年。


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·cDNA第一链合成试剂盒II(RNase H-)
编号：YT397
英文名称：First Strand cDNA Synthesis Kit II (RNase H minus)
规格：20次|100次
本试剂盒是一种采用了经过改造和优化的M-MLV反转录酶II(RNase H-)（YT394），用于以总RNA、mRNA等为模板反转录合成cDNA第一链的试剂盒。本试剂盒包含了进行cDNA第一链合成所需的各种试剂。

使用本试剂盒合成的第一链，可以直接用于后续的常规PCR、real-time PCR也称定量PCR(quantitative PCR, qPCR)、 cDNA的第二链合成以及cDNA文库的构建等。

使用本试剂盒可以轻松完成长度为8 kb及以下基因的反转录(参考图1)，反转录的最大长度可以超过10 kb。在采用M-MLV反转录酶II(RNase H-)（YT394）的情况下，由于缺失了RNase H酶活性，RNA和DNA双链复合物中的RNA不会被降解，这样反转录出来的cDNA的长度就会更长，并且产量更高。


使用本试剂盒对总RNA反转录后，对于不同长度的cDNA进行PCR扩增后的电泳效果图。图中可见对于0.2-8kb的cDNA可以非常高效地被反转录。

本试剂盒中的M-MLV反转录酶II(RNase H-)（YT394）热稳定性高，最适反应温度为42-45℃，但当温度达到50℃时仍具有很高活性，且可获得较高产量的cDNA。

试剂盒中提供了RNase Inhibitor，确保在反转录过程中的RNA不会被RNA酶所降解并取得较好的反转录效果。

试剂盒还提供了Oligo(dT)18和random hexamer这两种引物，前者适合用于带有Poly(A)尾的mRNA的反转录，后者进行反转录时不需要poly(A)尾。也可以自行采用基因特异性引物进行cDNA第一链的合成。

本试剂盒用于体积为20微升的cDNA第一链合成反应时足够进行20个cDNA第一链样品的合成。

产品组份：
M-MLV反转录酶II(RNase H-)——————————20μl
Reaction Buffer (5X)————————————0.1ml
RNase Inhibitor (20U/μl)——————————20μl
dNTP Mix (10 mM each)————————————40μl
Oligo(dT)18 Primer (0.5μg/μl)——————20μl
Random Hexamer Primer (0.2μg/μl)——————20μl
DEPC-treated Water——————————————0.3ml

储存条件：-20℃。


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·增强型ATP检测试剂盒
编号：YT362
英文名称：Enhanced ATP Assay Kit
规格：200次
本试剂盒可以用于检测普通溶液、细胞或组织内的ATP水平。细胞和组织样品一步裂解即可完成样品制备，检测灵敏度高达0.1nmol/L，化学发光可以持续稳定达30分钟。本试剂盒的多项指标优于许多国外的同类产品。并且获得的样品还可以同时进行Western检测。本试剂盒的使用方便快捷，通常10-20个样品可以在30-60分钟内测定完毕。一个包装的本试剂盒至少可以进行200次测试。

试剂盒组分：
ATP检测试剂—————————3.5ml(0.7ml/管，共5管)
ATP检测试剂稀释液——————20ml
ATP标准溶液(0.5mM)——————0.1ml
ATP检测裂解液————————100ml

ATP作为最重要的能量分子，在细胞的各种生理、病理过程中起着重要作用。ATP水平的改变，会影响细胞的功能。通常细胞在凋亡、坏死或处于一些毒性状态下，ATP水平会下降；而高葡萄糖刺激等可上调某些细胞的细胞内ATP水平。通常ATP水平的下降表明线粒体的功能受损或下降，在细胞凋亡时ATP水平的下降通常和线粒体的膜电位下降同时发生。

样品制备非常简单。本试剂盒提供了可以用于细胞和组织裂解的ATP检测裂解液，简单裂解后即可用于ATP检测。无需进行高*酸或三*乙酸抽提，或样品裂解后的煮沸等繁琐操作。

本试剂盒根据萤火虫荧光素酶催化荧光素产生荧光时需要ATP提供能量研制而成。当萤火虫荧光素酶和荧光素都过量时，在一定的浓度范围内荧光的产生和ATP的浓度成正比。这样就可以高灵敏地检测溶液中的ATP浓度。本试剂盒在样品体积为100微升时可以检测浓度低达0.1nmol/L的ATP。而常规的细胞或组织裂解液中ATP的浓度仅为0.1-1μmol/L，一些常见细胞的细胞内ATP水平约为10nmol/mg蛋白。并且本试剂盒的检测浓度范围非常大，检测上限可以高达10μmol/L，并在0.1nmol/L～10μmol/L范围内可以形成良好的标准曲线。

本试剂盒进行了特殊的优化设计，使检测ATP时的化学发光非常稳定。对于ATP标准曲线的检测结果显示，在开始反应后10分钟内化学发光无明显下降，开始反应后30分钟内化学发光的下降不超过10%。

使用本试剂盒中的ATP检测裂解液裂解获得的细胞或组织样品，不仅可以用于ATP检测，还可用于检测蛋白浓度、进行SDS-PAGE或一些常规的较易溶解蛋白的Western检测。

注意事项：
1. ATP检测试剂中含有荧光素酶，反复冻融会导致其逐渐失活。尽管经测试ATP检测试剂反复冻融5次对于其检测效果无明显影响，为取得良好的使用效果，建议用户使用时的冻融次不宜超过3次。ATP检测试剂稀释成ATP检测工作液后，最好一次用完，不宜冻存后再使用。
2. ATP特别是裂解后样品中的ATP在室温不太稳定，需在4℃或冰上操作。ATP在冰上可以稳定长达6小时。
3. 本试剂盒需使用luminometer，即化学发光检测仪(检测荧光素酶报告基因时所用的仪器)。如果没有luminometer，也可以使用液闪仪。液闪仪的测定效果取决于液闪仪的检测灵敏度和检测精度。
4. 使用可检测化学发光的多功能酶标仪时，所用96孔板宜为孔和孔之间不透光的黑板或白板。如使用常规的透明96孔板，需特别注意正确设置酶标仪测定时板子的类型，同时也可以在检测孔之间设置间隔孔，以尽量避免邻近孔之间的相互干扰。
5. 本试剂盒提供的ATP检测裂解液可以有效裂解并释放常见的培养细胞和组织中的ATP。对于一些特殊的组织或样品，如果发现检测出来的ATP水平显著低于预期水平，可以在裂解样品后并且在离心前，取部分样品煮沸2分钟以充分释放ATP。煮沸后样品中的蛋白会变性，从而会在后续的离心步骤中被沉淀，因此煮沸的样品不能用于蛋白浓度测定、SDS-PAGE和Western检测。可以使用剩余的部分样品进行蛋白浓度测定、SDS-PAGE和Western检测。

储存条件：-20℃，有效期6个月。

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