细胞毒性检测试剂盒(乳酸脱氢酶法)

特别提示：包括细胞毒性检测试剂盒(乳酸脱*酶法)在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：细胞毒性检测试剂盒(乳酸脱*酶法)
英文名称：LDH Cytotoxicity Assay Kit
产品规格：100次|500次

本试剂盒也称乳酸脱*酶检测试剂盒(LDH Assay Kit)或乳酸脱*酶释放检测试剂盒(LDH Release Assay Kit)，是一种基于diaphorase催化的INT显色反应，通过比色法检测细胞毒性时释放的乳酸 脱*酶活性或检测其它样品中的乳酸脱*酶活性的试剂盒。

本试剂盒可以用于常规的乳酸脱*酶活性的检测，更常用于以LDH释放为指标的细胞毒性检测。同时，基于细胞总乳酸脱*酶活性的检测，本试剂盒也可以用于检测细胞增殖和细胞毒性检测。

细胞凋亡或坏死而造成的细胞膜结构的破坏会导致细胞浆内的酶释放到培养液里，其中包括酶活性较为稳定的乳酸脱*酶(lactate dehydrogenase, LDH)。通过检测从质膜破裂的细胞中释放到培养液中的LDH的活性，就可以实现对细胞毒性的定量分析。LDH释放被看做细胞膜完整性的重要指标，并被广泛用于细胞毒性检测。LDH释放被认为是以前使用放射性的51Cr标记细胞，随后通过51Cr释放进行 细胞膜完整性检测的安全有效的替代方法。

本试剂盒的基本原理是，在乳酸脱*酶的作用下，NAD+被还原生成NADH，NADH和INT (2-p-iodophenyl-3-nitrophenyl tetrazolium chloride)被硫辛酰胺脱*酶(diaphorase)催化反应生成NAD+和强生色物甲臜(formazan)，在490nm波长下产生吸收峰，从而可以通过比色来定量乳酸脱*酶的活性。吸光度与乳酸脱*酶活性成线性正相关。该酶联反应原理的示意图如下：



试剂盒组份（100次为例）：
LDH释放试剂——————1.5ml
乳酸溶液———————2ml
酶溶液————————1ml×2
INT溶液(10X)—————0.2ml
INT稀释液——————2ml

注意事项：
1. 冷冻会使样品中部分乳酸脱*酶失活，4℃可放置2-3天。建议样品准备好后尽量当天完成测定。
2. 如果检测细胞培养液中的乳酸脱*酶，由于血清含有乳酸脱*酶，建议血清的使用浓度不要超过1%，并最好使用热灭活血清。如果一定需要使用10%血清，在检 测时一定要设置没有细胞，但加入了相同体积培养液的对照孔，以用于消除背景。
3. 细胞过度生长、密度过高、离心速度过大、培养箱内外温差过大，都会造成细胞释放乳酸脱*酶增加。
4. 如果希望进行乳酸脱*酶活性的绝对定量，用户需自备乳酸脱*酶标准品。

储存条件：-20℃，有效期一年。