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TA克隆试剂盒(不含多克隆位点)(拓扑连接酶技术)现货促销

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  • ¥160 - 1910
  • 百奥莱博
  • ALH331-XPQ
  • 北京
  • 2025年07月08日
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      287

    • 英文名

      Zero Background TOPO TA Cloning Kit(without MCS)

    • 保质期

      12个月

    • 供应商

      北京百奥莱博科技有限公司

    • 保存条件

      2~8℃

    特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

    北京百奥莱博主要从事生物试剂的生产和销*(代"售"),产品线涵盖TA克隆试剂盒(不含多克隆位点)(拓扑连接酶技术)现货促销在内的分子生物学试剂产品,还包括PCR及荧光定量PCR、核酸提取试剂盒类、样本核酸保护试剂、核酸提取、克隆与转化、蛋白纯化、蛋白检测、免疫组化、细胞凋亡与抗体等。


    名称:TA克隆试剂盒(不含多克隆位点)(拓扑连接酶技术)现货促销
    产地:国产|进口
    英文名:Zero Background TOPO TA Cloning Kit(without MCS)
    编号:ALH331
    品牌:百奥莱博
    规格:20次|80次
    本试剂盒和传统的T4连接酶原理不同,它根据用拓扑异构酶可以在瞬间(几秒钟-几分钟)、高效(接近100%)连接DNA片段的原理,采用本公司独特的工艺制成。

    试剂盒组份(20次):
    TOPO-Ta Simple Vector(30ng/μl)—————20μl
    1000bp Control(30ng/μl)————5μl
    10×Enhancer———————————20μl

    产品特点:
    1. 可以在瞬间(几秒钟-几分钟)完成连接。
    2. 无需冰浴和热休克,室温5分钟内完成转化;无需1小时复苏,只需37℃10分钟复苏便可以涂板。从连接到涂板只需15-20分钟。
    3. 无自连、零背景,无需繁琐蓝白斑筛选,见到长出的克隆便是有插入的(接近100%)。
    4. 可以连接长达10kb片段(即使连接5kb片段,挑10个菌落,至少8个是有插入的),是目前世界上最简单、最快速、零背景免筛选的TOPO TA克隆载体。

    储存条件:-20℃,有效期12个月。

    本品别名:TA克隆试剂盒(不含多克隆位点)(拓扑连接酶技术)|TA克隆载体连接试剂盒

    想要了解更多关于TA克隆试剂盒(不含多克隆位点)(拓扑连接酶技术)现货促销的价格、品牌、厂家、说明书、促销信息,请和我们联*(代"系")。此外我公司还销*(代"售")下面的产品:
    ARB10385 人可溶性CD30配体(sCD30L)含量测试 Human soluble cluster of differentiation 30 ligand,scd30l ELISA KIT
    HEPES溶液(pH6.8-8.0)  1mol/L 100ml
    F030701 BIOTIN标记小鼠抗乙肝核心抗原抗体 Monoclonal Mouse Anti-HBcAg*BIOTIN
    D-山梨糖 DTAB 3615-56-3
    BL1226 Hanks,含**,不含酚红(HBSS)
    BL1333 通用引物 ITS1
    ARB13677 兔血浆α颗粒膜蛋白(GMP-140)含量测试 Rabbit alpha-granular membrane protein,gmp-140 ELISA KIT
    *基肽酶染色液(同时偶联法)   3×20ml
    F030403 胶体金标记小鼠抗人IgG Fab抗体 Monoclonal Mouse Anti-Human IgG Fab*GOLD
    DP115 N96快速质粒提取试剂盒
    BTN80905 大提柱式细菌RNAOUT Maxi Column Bacterial RNAOUT
    ARB12112 大鼠可溶性Toll样受体2(sTLR2)ELISA代测服务 Rat soluble toll-like receptor 2,stlr-2 ELISA KIT
    BTN131139 Deaza dGTP溶液,5mM Deaza dGTP Solution
    *化铷 11-Aminoundecanoic acid 7791-20-0
    F040305 猪IgG抗原 Pig IgG
    十八冠醚-6 Canada balsam 17455-13-9
    L-酪*酸甲酯 3-Nitrophenol 1080-06-4
    TA克隆试剂盒(不含多克隆位点)(拓扑连接酶技术)现货促销关键词:TA克隆载体连接试剂盒,TA克隆试剂盒(不含多克隆位点)(拓扑连接酶技术)


    ·平末端载体连接试剂盒(含多克隆位点)(T4连接酶技术)
    编号:ALH339
    英文名称:Zero background flat end fast connection kit(with mcs)
    规格:20次|40次
    本试剂盒是一种先进的自杀基因阳性选择克隆系统,可以高效克隆平末端PCR产物和任何具有平末端的DNA片段。该试剂盒对磷酸化或非磷酸化的 DNA片段都有效。 阳性选择载体和插入片段连接仅需5分钟即可获得超过95%的阳性重组克隆。由具有校正活性的聚合酶(如:Pfu polymerase)扩增的平末端 PCR 产物可直接连入克隆载体。连接产物可直接转化常用的大肠杆菌菌株。

    试剂盒提供一个新颖的自杀基因阳性选择克隆载体t。该载体含有致死的自杀基因(内含多克隆位点),当载体与片段连接成功,自杀基因无法正确表达,包含重组子的细胞可以正常生长;当载体与片段连接不成功,载体自连后自杀基因正确表达,包含自连空载体的细胞无法存活,即“零ZERO”背景。这种阳性筛选策略无需蓝白斑筛选,极大地加速了克隆筛选进程。

    为方便酶切作图和插入片段基因操作,本试剂盒克隆载体的多克隆位点两侧各包含一个BglII识别序列。此外,该载体含有T7启动子,可用于体内或体外转录、插入片段测序等研究。

    试剂盒组份(20次):
    平末端载体(40ng/μl)——————————————20μl
    900bp Control(40ng/μl)————————————5μl
    2×Quick Ligation Buffer-————————————100μl
    T4 DNA ligase(5U/μl)—————————————20μl
    Forward Sequencing Primer (10μM)————————50μl
    Reverse Sequencing Primer (10μM)————————50μl
    注:
    forward sequencing primer, 23-mer 5’-CGACTCACTATAGGGAGAGCGGC-3’
    reverse sequencing primer, 24-mer 5’-AAGAACATCGATTTTCCATGGCAG-3’

    储存条件:-20℃,有效期6个月。


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    ·热启动Taq PCR MasterMix
    编号:ALH249
    英文名称:2×HotStart Taq PCR MasterMix
    规格:0.5ml|5ml
    本产品包含HotMaster Taq DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液,浓度为2×。具有快速简便、灵敏度高、特异性强、稳定性好等优点,可最大限度的减少人为误差。HotMaster Taq DNA polymerase 采用了国际上最新独特的合成亲和性配体技术,该配体可以以一种温度依赖性的方式来可逆性地阻断酶的活性。该酶与一般Hot-start 酶不同之处在于,一般的Hot-start 酶只在第一步温度升高之前封闭酶的活性,而HotMaster Taq DNA 聚合酶利用抑制性配体通过温度调节方式封闭HotMasterTaq DNA 聚合酶的底物结合位点,温度低于40℃时,形成非活性的酶-抑制剂复合物,当温度升高至引物特异性的退火温度时,结合平衡向模板-特异性引物复合物形成方向移动,因此最大限度的减少PCR 扩增全程中的非特异性扩增产物产生,大大提高了PCR 反应的精确性。本产品使用方便快捷,能避免 PCR 操作过程中的污染,使用时只需取适量2×HotMaster Taq PCR MasterMix溶液,加入模板和引物,并加入去离子水补足体积,使MasterMix溶液浓度为1×即可进行反应。使用前请保证充分溶解并混匀。

    产品组份:HotMaster Taq DNA Polymerase:0.05units/μl ;MgCl2: 4mM ;dNTPs (dATP, dCTP, dGTP, dTTP):0.4mM;稳定剂;增强剂。

    储存条件:-20℃。

    ·一步法荧光定量RT-PCR试剂盒
    编号:ALH195
    英文名称:One Step qRT-PCR Kit
    规格:50μl×50次|50μl×100次
    本试剂盒是采用SYBR Green I 嵌合荧光法进行Real Time PCR 的专用试剂,用本制品进行Real Time qRT-PCR 可在同一反应管内连续进行。反应过程中无需打开管盖添加试剂并可对扩增产物进行实时检测,避免了污染的同时提高了检测灵敏度和实验效率。非常适合于微量RNA 尤其是微量RNA病毒的检测。本试剂盒包括最适合Real Time PCR的突变改造M-MuLV H Minus逆转录酶、热启动HotMaster Taq DNA聚合酶和RNasin抑制剂mix、同时包含适用于逆转录和PCR扩增的优化独特反应体系。本酶M-MuLV(RNase Hˉ)的RNase H活性缺失,与M-MuLV 相比,具有更强的延伸能力和稳定性。同时该酶提高了耐热性,可以在42-50℃反转录,提高了复杂二级结构,GC含量丰富模板反转录效率。而采用优质热启动酶HotMaster Taq DNA Polymerase可以最大限度的减少PCR扩增全程中的非特异性扩增产物产生,大大提高了荧光定量PCR反应的精确性。本制品可以在宽广的定量区域内得到良好的标准曲线,对靶基因进行准确定量检测,重复性好,可信度高。

    试剂盒组份(50次):
    2 XqRT-PCR Mix (含Sybr Green I)-——————1.25ml
    OneStep Enzyme Mix—————————————100μl
    RNase free H2O———————————————1.5ml

    适用范围:适用于高拷贝、低拷贝基因检测;部分高GC含量或具有复杂二级结构的RNA模板。

    注意事项:
    1. 当同时需要进行数次Real Time One Step qRT-PCR反应时,应先配制各种试剂的混合液(Master Mix,其中包括RNase-free ddH2O、Buffer、各种酶等),然后再分装到每个反应管中。这样可使所取的试剂体积更准确,减少试剂损失,避免重复分取同一试剂。同时也可以减少实验操作或实验样品之间产生的误差。
    2. 使用Enzyme Mix时,分取之前要小心地瞬间离心收集到反应管底部;由于酶保存液中含有高浓度的甘油,粘度高,分取时应慢慢吸取。
    3. 2×qRT-PCR Mix内含Sybr Green I,保存或配制One Step qRT-PCR反应液时应避免强光照射。
    4. 为保证反应成功建议使用高质量的RNA模板。
    5. 不同的片段,所需最佳RNA模板用量不同,过多的RNA会抑制反应,建议根据反应调整模板用量。
    6. 只能使用特异性引物,不能使用Oligo(dT) 和Random Primer 进行反应。

    储存条件:-20℃,有效期12个月。



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    • 载体多克隆位点(MCS)改造

      按克隆的连接体系将这个小片段与你的载体(相应双切)连接转化…… 小片段连入的效率相当高,如果大家要检验:在菌长出来后,做PCR检验(人工合成的这个小片段的正链或反链与载体上的引物)。举个例子: 比如要在某载体的EcoR I和BamH I之间加一个新的MCS(EcoR V-Kpn I-Xho I-Hind III)(这几个位点必须在目的 载体上没有,如果有这个切点,你又实在想用的话,可以将目的载体用这个单切,绿豆芽核酸 /s1核酸酶平端化,再自连——位点封闭): 1、合成 5‘-

    • PCR产物的TA克隆 (DNA的胶回收和连接)

      原理】 1.DNA片段回收方法:DNA片段在适当浓度的琼脂糖凝胶中,通上一定电压进行电泳,不同大小的DNA分子由于迁移率的不同而分离开。切下带有所需DNA片段的凝胶,用冻融法、玻璃奶回收法或商品化胶回收试剂盒将目的片段回收纯化。 2.利用Taq酶能够在PCR产物的3’末端加上一个非模板依赖的A,而T载体是一种带有3’T突出端的载体,在连接酶作用下,可以把PCR产物插入到质粒载体的多克隆位点,可用于PCR产物的克隆和测序。

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