BTN130301型DNA甲基化修饰试剂盒现货供应

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

百奥莱博专业生产销*(代"售")BTN130301型DNA甲基化修饰试剂盒现货供应，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：BTN130301型DNA甲基化修饰试剂盒现货供应
英文名：Embedded Bisulfite Modification Kit
品牌：百奥莱博
规格：150次
产地：国产|进口
亚硫*(代"酸")*盐修饰DNA时要求DNA必须在单链状态，反应还必须在低温进行，常规的修饰试剂盒由于是在液相进行，要在低温下让DNA不相互复性而保持单链状态非常棘手，所以常规修饰试剂盒的修饰效率一般都不高。此外，常规方法要切换反应液，有多次沉淀步骤，使得DNA的回收率一般都不超过50%。为克服这些缺点，本公司开发出了此升级产品。

产品特点：
1．用包埋的样品进行所有操作，免去所有沉淀和纯化步骤，极大简化了操作。
2．免去了DNA提取过程，所需实验材料比常规方法更少，最少几个细胞都可以，极大地节约了宝贵材料，尤其适用于珍稀材料。
3．包埋处理后，DNA在整个操作过程中都处于最适于修饰的单链状态，极大提高了修饰效率。
4．DNA包埋于包埋块中，切换反应液非常方便，而且DNA不会丢失，所以最终回收率都在90%以上。
5．适用于实体材料、悬浮细胞和纯化好的DNA样品。
6．本试剂盒足够制备150多个10μL包埋块(如果用纯化好的DNA)或25个10μL包埋块(如果用悬浮细胞)。

试剂盒组成：

 

成分	规格
包埋液	1.5ml
分子生物学级石蜡油	25ml
包埋块裂解液	12.5ml
蛋白酶K溶液(10mg/mL)	150μl
溶液A	30ml
溶液B成分一	2.3 g×5棕色瓶
溶液B成分二	110mg×5棕色管
TE缓冲液，pH8.0	125ml
说明书	1份

注: 包埋液用1.5mL旋盖离心管包装，溶液B成分一用5mL棕色瓶包装，溶液B成分二用1.5mL旋盖棕色管包装。

储存条件：低温运输、4℃保存、避免反复冻融，有效期一年。

使用方法：

一、准备试剂
1．在装有2.3g溶液B成分一干粉的瓶中加入3.9mL水和0.9mL溶液A，摇晃溶解得到4.8mL溶液B成分一。在装有110mg溶液B成分二干粉的离心管中加入1mL 50℃预热的超纯水，摇晃溶解，得到溶液B成分二。将0.6mL溶液B成分二加入到4.8mL溶液B成分一中，得到5.4mL溶液B，冰上放置待用。未用完的溶液B下次不得再使用。
2．每次实验前，将装有1.5mL包埋液离心管在沸水浴上放置数分钟直到变成溶液，然后放80℃待用。

二、对微量组织材料(如果材料足够，可先纯化DNA，再按第三方案进行)
1．用常规的胰酶消化法处理动物实体组织或培养细胞，得到浓度不超过60细胞/μL的单细胞PBS悬液。如果实验材料已经是单细胞悬浮液(如卵细胞)，则PBS洗涤后直接离心沉淀，再重悬在PBS中(浓度不超过60细胞/μL)。注：本试剂盒不含本步所需相关试剂。
2．在一个2mL离心管中加入3μL细胞悬液，再迅速滴加7μL在 80℃预热的包埋液。注：不需要吹打混匀以免混合液在抢头里面凝固。
3．加入500μL分子生物学级石蜡油，将离心管在沸冰浴中放置20分钟。
4．将离心管转移到冰上放置30分钟，低温下包埋液和细胞混合液将凝固成10μL的包埋块。
5．加入500μL包埋块裂解液和5μL Proteinase K溶液，37℃保温过夜。加入的溶液比重都比石蜡油大，将会自动沉降到石蜡油下层，不需离心。
6．吸弃包埋块之外的所有溶液(包括石蜡油)，用1mL TE缓冲液室温浸泡包埋块2次，每次15分钟。此步可去除残留包埋块裂解液。
7．酶切包埋块中的DNA：选定不识别PCR靶片段的内切酶(本试剂不提供该相关试剂)，再用100μL选定内切酶的1×缓冲室温液浸泡包埋块15分钟，吸弃缓冲液后再加入100μL选定内切酶的1×缓冲液和50U选定的内切酶，37℃保温2小时。
8．吸弃酶切反应液，再加入500μL新鲜配制的处理液A(配制方法：100μL溶液A+400μL超纯水)室温放置15分钟，重复此步一次。此时DNA将呈单链。
9．吸弃处理液A后，用1mL新鲜配制的处理液B(注：不是溶液B，配制方法：50μL溶液A+950μL超纯水)室温浸泡包埋块5分钟。
10．吸弃处理液B，加入750μL石蜡油，然后沸水浴20-30秒，使DNA单链彻底彼此分开。
11．奖离心管转移到冰上放置30分钟使包埋块重新凝固。
12．在离心管中加入1mL预冷的溶液B，溶液B将自动沉降到石蜡油下层。继续在冰上放置30分钟。此步用于修饰单链的DNA。
13．将离心管转移到50℃放置3.5小时。
14．吸弃溶液B，用1mL TE缓冲液常温洗涤包埋块2次，每次15分钟。
15．吸弃TE缓冲液，用500μL新鲜配制的处理液C(50μL溶液A+450μL超纯水)常温洗涤包埋块2次，每次15分钟。
16．吸弃处理液C，用1mL TE缓冲液常温洗涤包埋块3次，每次10分钟.
17．吸弃TE缓冲液，所得包埋块可以在4℃保存数月待用，也可以用超纯水洗涤两次(每次15分钟)后直接用做100μL体系甲基化PCR的模板。

三、对纯化好的DNA
18．选用不识别PCR靶片段的合适内切酶酶切纯化的基因组DNA(本试剂不提供所需试剂)，总体积不超过20μL，基因组DNA不超过700 ng。
19．酶切结束后，沸水浴5-10分钟灭活内切酶并变性DNA。
20．冰上放置并短暂离心数秒后，再加入4μL溶液A，50℃保温15分钟。
21．迅速加入50μL在80℃预热的包埋液，用手指快速弹击管底混匀溶液并继续放80℃待用。不要吹打混匀以避免包埋液在移液枪头中凝固。
22．在一个新的2mL离心管中，加入1mL预冷的溶液B，再加上750μL石蜡油，并将离心管放冰上预冷。
23．迅速取80℃保温的混合液10μL，用在空中滴加的方式加到上步准备的预冷的离心管中，滴加的混合液遇冷将迅速在石蜡油中形成包埋块并自动沉入管底，得到1个包埋块。注意：不要将枪头浸入到预冷的溶液中，否则包埋液将迅速在枪头内凝固。如果包埋块没有沉到管底，可以用枪头将其拨到石蜡层下面的液相中。
24．再重复上步操作6次(步骤23)，共可以得到7个包埋块(约含100ng DNA)。
25．将离心管(含7个包埋块)继续放冰上30分钟进行修饰。
26．后续操作同第13-17步。

我公司的BTN130301型DNA甲基化修饰试剂盒现货供应，性价比高，货期短，送货上门，欢迎您来电咨询购买，另外，我公司还生产供应销*(代"售")下列产品：
PY02-418  LESEndo琼脂  250克  
ARB11867 人糖缺失性转铁蛋白(CDT)ELISA代测服务 Human carbohydRate-deficient transferrin,cdt ELISA KIT
518-47-8 荧光素* Fluorescein Sodium Salt
DP104 高纯质粒小提试剂盒
BL1351 次高分子量蛋白MARKER
HC0096 冻存管
F030223 HRP标记兔抗猴IgG抗体 Rabbit Anti-monkey IgG*HRP
番红O染色液  1%|0.5%|0.1% 100ml
ARB12666 大鼠碱性成纤维细胞生长因子9(bFGF-9)酶免分析 Rat basic fibroblast growth factor 9,bfgf-9 ELISA KIT
ARB12555 大鼠脂多糖/内毒素(LPS)血清中含量检测 
非变性聚丙*(代"烯")酰胺连续电泳缓冲液(10×)   500ml
卡特缩合剂 IAM 56602-33-6
ARB14101 羊脂肪甘油三酯脂酶(ATGL)含量测试 
脂多糖 VAZO67
77-92-9 Citric acid 柠檬酸
DH5α化学感受态细胞 20×100ul
BTN130301型DNA甲基化修饰试剂盒现货供应关键词：DNA甲基化修饰试剂盒,Embedded Bisulfite Modification Kit,BTN130301


·DNA marker(λ/EcoRI+HindIII)
编号：BTN90602F
英文名称：DNA ladder(λ/EcoRI+HindIII)
规格：50次
 本系列产品为传统的酶切分子量标准，由单一的质粒DNA或噬菌体DNA经单个限制性内切酶完成消化后，加热灭活而成。每次上样总DNA含量已知，每条带的含量可根据其摩尔数的比值计算出来。本系列产品成分中已经含有上样缓冲液，所以可以直接上样电泳。得到的电泳条带长度准确，明亮清晰，背景较低，稳定性很好。
 每次加样量为5μL，可用于相对定量。本系列产品与各种琼脂糖和各种电泳缓冲液兼容。

储存条件：低温运输、-20℃保存，有效期一年。

使用方法：直接上样电泳，每次加样量为5uL。

使用效果：


疑难解答：
a)如对带型要求较高，建议使用0.8-1.5%琼脂糖凝胶(对SuperBuffer-2缓冲液，电压为250-400V)或1.5-2.0%琼脂糖凝胶(对TAE或TBE缓冲液，电压为80V)，同时适当延长电泳时间。
b)电泳图象的质量与琼脂糖、电泳缓冲液有关。请采用高质量的琼脂糖，同时要经常更换电泳缓冲液。


·海洋动物DNA提取试剂盒(柱式提取)
编号：BTN130401
英文名称：Marine animal DNA column extraction kit
规格：50次
本试剂盒是在柱式动物DNA提取试剂盒(BTN71206)试剂盒基础上优化改良而得，专门针对海洋动物的基因组DNA提取的试剂盒，可用于鱼类、虾类、贝类、蟹类等海洋动物和水产动物的荃因组DNA提取，可以有效去除海洋动物组织中的蛋白、脂肪及其他有机化合物等杂质。

产品特点：
1. 使用本试剂盒提取的基因组DNA可适用于各种常规分子生物学操作，如:酶切、PCR、文库构建、Southern杂交等试验。
2. 操作简单安全，1小时内即可获得超纯的基因组DNA，纯化过程中不需要使用*酚*仿等有机试剂。
3. 应用广泛，适用于多种动物细胞和动物组织等。
4. 性价比高，质量和国外同类试剂盒相当，价格更低。

试剂盒组成：

成分	规格
溶液A	50ml
蛋白酶K溶液(20mg/mL)	1ml
溶液B	15ml
溶液C	13ml
离心吸附柱	50套
通用洗柱液	15ml
通用洗脱液	15ml
说明书	1份

储存条件：常温运输及保存(蛋白酶K溶液需要低温运输，-20℃保存)，有效期一年。

使用方法：
使用前请先在溶液C和通用洗柱液中加入无水乙醇，加入体积请参照瓶上的标签。

1. 切取不多于30mg的组织材料，放入装有200μL溶液A的离心管中，涡旋振荡15秒。注意：根据提取的组织不同，起始量也稍有不同，腮的细胞量较大，一般建议提取量不超过20mg。如果需要去除RNA，可加入40μL RNase A(10mg/mL)溶液(客户自备，BTN3160)，振荡15秒，室温放置5分钟。
2. 加入20μL蛋白酶 K溶液(20mg/mL)，涡旋混匀，简短离心以去除管盖内壁的水珠。在56℃下放置，直至组织完全溶解，简短离心以去除管盖内壁的水珠，再进行下一步骤。注意：不同组织裂解时间不同，通常需0.5-2小时即可完成。扇贝组织0.5小时基本可裂解完全，虾和鱼类组织1小时。每小时振荡混合样品2-3次，每次振荡混匀15秒。
3. 加入200μl溶液B，充分颠倒混匀，70℃放置10分钟，溶液应变清亮，简短离心以去除管盖内壁的水珠。注意：加入溶液B时可能会产生白色沉淀，一般70℃放置时会消失，不会影响后续实验。如溶液未变清亮，说明细胞裂解不彻底，可能导致提取DNA 量少和提取出的DNA 不纯。
4. 加入200μl 无水乙醇，充分颠倒混匀，此时可能会出现絮状沉淀，简短离心以去除管盖内壁的水珠。
5. 将上一步所得溶液和絮状沉淀都加入一个离心吸附柱中(吸附柱放入收集管中)，12000rpm(～13,400×g)离心30秒，倒掉废液，将吸附柱放回收集管中。
6. 向离心吸附柱中加入500μl溶液C(使用前请先检查是否已加入无水乙醇)，12000rpm(～13,400×g)离心30秒，倒掉废液，将吸附柱放入收集管中。
7. 向吸附柱中加入600μl 通用洗柱液(使用前请先检查是否已加入无水乙醇)，12000rpm(～13,400×g)离心30秒，倒掉废液，将吸附柱放入收集管中。
8. 重复操作步骤7。
9. 将吸附柱放回收集管中，12000rpm(～13,400×g)离心2分钟，倒掉废液。将吸附柱置于室温放置数分钟，以彻底晾干吸附材料中残余的漂洗液。注意：这一步的目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除，漂洗液中乙醇的残留会影响后续的酶反应(酶切、PCR等)实验。
10. 将吸附柱转入一个干净的离心管中，向吸附膜的中间部位悬空滴加50-200μl 通用洗脱液，室温放置2-5分钟，12000rpm(～13,400×g)离心2分钟，将溶液收集到离心管中。注意：通用洗脱液的体积不应少于50μl，体积过小影响回收效率。为增加基因组DNA的得率，可将离心得到的溶液再加入吸附柱中，室温放置2分钟，12000rpm(～13,400×g)离心2分钟。洗脱液的pH值对于洗脱效率有很大影响。若用超纯水做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5 范围内，pH值低于7.0会降低洗脱效率；且DNA产物应保存在-20℃，以防DNA 降解。


BTN130301型DNA甲基化修饰试剂盒现货供应关键词：DNA甲基化修饰试剂盒,Embedded Bisulfite Modification Kit,BTN130301


·凋亡DNA提取试剂盒
编号：BTN130812
英文名称：Apoptotic DNA extraction kit
规格：24次
细胞凋亡是生命个体中的调控基因为了维持个体生命，调控细胞进行新陈代谢，促使不需要的细胞或者具有危险性的细胞自我凋亡(自杀)的现象，与细胞的发生、分化、生理现象(特别在免疫方面)有着密切关系。细胞凋亡时，染色体DNA以核小体为单位(185bp)进行DNA片断化产生DNA Ladder，这些被片断化了的DNA片段，可以使用电泳的方法进行检出。本试剂盒能够从培养细胞中选择性地提取片断化DNA，能够最大限度地抑制起妨碍作用的完整的染色体DNA的混入，并可以通过电泳法进行高效检出。

产品特点：
1.操作简便：使用Ready-to-Use型试剂。
2.高灵敏度：能够高灵敏度地检出凋亡细胞的片断化DNA。
3.高特异性：抑制完整的染色体DNA的混入，选择性地提取片段化DNA。
4.快速操作：整体操作约需2.5小时。
5.定量性：与荧光色素组合可以对片断化DNA进行定量。
6.安全性：不使用*酚*仿等。

试剂盒组成：

成分	规格
溶液A	120ml
溶液B	1ml
溶液C	120μl
RNase A溶液(2mg/mL)	60μl
Proteinase K溶液(10mg/mL)	30μl
微量核酸沉淀剂	3ml
说明书	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：
1.冰上操作，将细胞样品(106-107)重悬于0.5mL Hanks平衡盐溶液(自备)或其他常用细胞缓冲液中。
2.将细胞重悬液与5mL溶液A混合，轻柔颠倒混匀后冰上放置4小时。如果暂时不用，可在-20℃最长保存四周。
3.800g离心5分钟，彻底移弃上清。
4.在细胞沉淀中加入40μL溶液B重悬细胞沉淀，室温放置至少30分钟，期间摇动数次。为方便离心，可将细胞重悬液转移至新的0.5mL或1.5mL Eppendorf离心管中，
5.800g离心5分钟，将上清移入到新的Eppendorf管中，并在SpeedVac上真空离心浓缩15分钟。
6.向浓缩物中加入5μL溶液C和2.5μl RNase A溶液(2mg/mL)，混匀后37℃保温30分钟。
7.再加入1μl Proteinase K溶液(10mg/mL)溶液，37℃保温30分钟。
8.加5μl电泳上样缓冲液(自备)，常规0.8%琼脂糖电泳分离、EB染色并观察电泳条带。
9.如果所得凋亡DNA溶液需要纯化(溶液中有proteinase K等)，需要继续纯化，则加入50μL酚*仿混合液(自备)，震荡3分钟混匀，13000g离心3分钟后转移上清到新离心管中，再加入2倍体积(约100μL)微量核酸沉淀剂，混匀后13000g离心15分钟，弃上清，再用1mL 75%的乙醇洗涤一次，空气放干后加入适当体积的水或TE溶解沉淀，所得溶解即凋亡片段DNA溶液。

使用效果：

使用本产品提取细胞DNA效果图。M为DNA Marker，最大条带1.3Kb。
1为正常非凋亡细胞DNA。2为凋亡细胞DNA。

我公司强烈推荐基因结构和功能系列产品，热情期待您的咨询选购BTN130301型DNA甲基化修饰试剂盒现货供应。