BTN130301型DNA甲基化修饰试剂盒厂家

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

百奥莱博专业生产销*(代"售")BTN130301型DNA甲基化修饰试剂盒厂家，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：BTN130301型DNA甲基化修饰试剂盒厂家
品牌：百奥莱博
英文名：Embedded Bisulfite Modification Kit
产地：国产|进口
编号：BTN130301
亚硫*(代"酸")*盐修饰DNA时要求DNA必须在单链状态，反应还必须在低温进行，常规的修饰试剂盒由于是在液相进行，要在低温下让DNA不相互复性而保持单链状态非常棘手，所以常规修饰试剂盒的修饰效率一般都不高。此外，常规方法要切换反应液，有多次沉淀步骤，使得DNA的回收率一般都不超过50%。为克服这些缺点，本公司开发出了此升级产品。

产品特点：
1．用包埋的样品进行所有操作，免去所有沉淀和纯化步骤，极大简化了操作。
2．免去了DNA提取过程，所需实验材料比常规方法更少，最少几个细胞都可以，极大地节约了宝贵材料，尤其适用于珍稀材料。
3．包埋处理后，DNA在整个操作过程中都处于最适于修饰的单链状态，极大提高了修饰效率。
4．DNA包埋于包埋块中，切换反应液非常方便，而且DNA不会丢失，所以最终回收率都在90%以上。
5．适用于实体材料、悬浮细胞和纯化好的DNA样品。
6．本试剂盒足够制备150多个10μL包埋块(如果用纯化好的DNA)或25个10μL包埋块(如果用悬浮细胞)。

试剂盒组成：

 

成分	规格
包埋液	1.5ml
分子生物学级石蜡油	25ml
包埋块裂解液	12.5ml
蛋白酶K溶液(10mg/mL)	150μl
溶液A	30ml
溶液B成分一	2.3 g×5棕色瓶
溶液B成分二	110mg×5棕色管
TE缓冲液，pH8.0	125ml
说明书	1份

注: 包埋液用1.5mL旋盖离心管包装，溶液B成分一用5mL棕色瓶包装，溶液B成分二用1.5mL旋盖棕色管包装。

储存条件：低温运输、4℃保存、避免反复冻融，有效期一年。

使用方法：

一、准备试剂
1．在装有2.3g溶液B成分一干粉的瓶中加入3.9mL水和0.9mL溶液A，摇晃溶解得到4.8mL溶液B成分一。在装有110mg溶液B成分二干粉的离心管中加入1mL 50℃预热的超纯水，摇晃溶解，得到溶液B成分二。将0.6mL溶液B成分二加入到4.8mL溶液B成分一中，得到5.4mL溶液B，冰上放置待用。未用完的溶液B下次不得再使用。
2．每次实验前，将装有1.5mL包埋液离心管在沸水浴上放置数分钟直到变成溶液，然后放80℃待用。

二、对微量组织材料(如果材料足够，可先纯化DNA，再按第三方案进行)
1．用常规的胰酶消化法处理动物实体组织或培养细胞，得到浓度不超过60细胞/μL的单细胞PBS悬液。如果实验材料已经是单细胞悬浮液(如卵细胞)，则PBS洗涤后直接离心沉淀，再重悬在PBS中(浓度不超过60细胞/μL)。注：本试剂盒不含本步所需相关试剂。
2．在一个2mL离心管中加入3μL细胞悬液，再迅速滴加7μL在 80℃预热的包埋液。注：不需要吹打混匀以免混合液在抢头里面凝固。
3．加入500μL分子生物学级石蜡油，将离心管在沸冰浴中放置20分钟。
4．将离心管转移到冰上放置30分钟，低温下包埋液和细胞混合液将凝固成10μL的包埋块。
5．加入500μL包埋块裂解液和5μL Proteinase K溶液，37℃保温过夜。加入的溶液比重都比石蜡油大，将会自动沉降到石蜡油下层，不需离心。
6．吸弃包埋块之外的所有溶液(包括石蜡油)，用1mL TE缓冲液室温浸泡包埋块2次，每次15分钟。此步可去除残留包埋块裂解液。
7．酶切包埋块中的DNA：选定不识别PCR靶片段的内切酶(本试剂不提供该相关试剂)，再用100μL选定内切酶的1×缓冲室温液浸泡包埋块15分钟，吸弃缓冲液后再加入100μL选定内切酶的1×缓冲液和50U选定的内切酶，37℃保温2小时。
8．吸弃酶切反应液，再加入500μL新鲜配制的处理液A(配制方法：100μL溶液A+400μL超纯水)室温放置15分钟，重复此步一次。此时DNA将呈单链。
9．吸弃处理液A后，用1mL新鲜配制的处理液B(注：不是溶液B，配制方法：50μL溶液A+950μL超纯水)室温浸泡包埋块5分钟。
10．吸弃处理液B，加入750μL石蜡油，然后沸水浴20-30秒，使DNA单链彻底彼此分开。
11．奖离心管转移到冰上放置30分钟使包埋块重新凝固。
12．在离心管中加入1mL预冷的溶液B，溶液B将自动沉降到石蜡油下层。继续在冰上放置30分钟。此步用于修饰单链的DNA。
13．将离心管转移到50℃放置3.5小时。
14．吸弃溶液B，用1mL TE缓冲液常温洗涤包埋块2次，每次15分钟。
15．吸弃TE缓冲液，用500μL新鲜配制的处理液C(50μL溶液A+450μL超纯水)常温洗涤包埋块2次，每次15分钟。
16．吸弃处理液C，用1mL TE缓冲液常温洗涤包埋块3次，每次10分钟.
17．吸弃TE缓冲液，所得包埋块可以在4℃保存数月待用，也可以用超纯水洗涤两次(每次15分钟)后直接用做100μL体系甲基化PCR的模板。

三、对纯化好的DNA
18．选用不识别PCR靶片段的合适内切酶酶切纯化的基因组DNA(本试剂不提供所需试剂)，总体积不超过20μL，基因组DNA不超过700 ng。
19．酶切结束后，沸水浴5-10分钟灭活内切酶并变性DNA。
20．冰上放置并短暂离心数秒后，再加入4μL溶液A，50℃保温15分钟。
21．迅速加入50μL在80℃预热的包埋液，用手指快速弹击管底混匀溶液并继续放80℃待用。不要吹打混匀以避免包埋液在移液枪头中凝固。
22．在一个新的2mL离心管中，加入1mL预冷的溶液B，再加上750μL石蜡油，并将离心管放冰上预冷。
23．迅速取80℃保温的混合液10μL，用在空中滴加的方式加到上步准备的预冷的离心管中，滴加的混合液遇冷将迅速在石蜡油中形成包埋块并自动沉入管底，得到1个包埋块。注意：不要将枪头浸入到预冷的溶液中，否则包埋液将迅速在枪头内凝固。如果包埋块没有沉到管底，可以用枪头将其拨到石蜡层下面的液相中。
24．再重复上步操作6次(步骤23)，共可以得到7个包埋块(约含100ng DNA)。
25．将离心管(含7个包埋块)继续放冰上30分钟进行修饰。
26．后续操作同第13-17步。

想要了解更多关于BTN130301型DNA甲基化修饰试剂盒厂家的价格、品牌、厂家、说明书、促销信息，请和我们联系。此外我公司还销*(代"售")下面的产品：

·多粘菌素B硫*(代"酸")盐
编号：BTN120699
英文名称：Polymyxin B Sulfate Solution
规格：5mL
本产品为浓度100mg/mL的多粘菌素B硫*(代"酸")盐溶液。多粘菌素B硫*(代"酸")盐(硫*(代"酸")多粘菌素B ；Aerosporin；Mastimyxin)，分子式：C55H96N16O13·2H2SO4，分子量：1385.63，CAS号：1405-20-5。多粘菌素B为多肽类抗生素，可以改变膜结构使小分子物质泄漏而抑制革兰氏阴性菌的生长。

储存条件：低温运输，4℃避光保存，有效期6个月。

·*苄青霉素干粉
编号：BTN60101
英文名称：Ampicillin Powder
规格：1g
*苄青霉素为白色晶体或粉末，分子式是C16H19N3O4S，分子量为349.41。溶于稀酸和稀碱，微溶于水和甲醇，几乎不溶于*仿、96%乙醇、乙*(代"醚")、乙酸乙酯和固定油。无臭，味苦。抗革兰氏阳性及阴性菌，用于分子 生物学和组织培养(防止微生物污染和抗性筛选)。

储存条件：常温运输、4℃保存，有效期一年。

·*基酰dUTP溶液，10mM
编号：BTN120631
英文名称：aminoallyl-dUTP Solution
规格：100μL
本产品是浓度为10mM的5-(3-*基烯丙基)-2’-脱氧鸟苷-5´-三磷酸的溶液，pH为7.0。可在各种DNA聚合酶作用下掺入到新合成的DNA产物中。

储存条件：低温运输和-20℃保存、有效期一年。


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·超纯水
编号：BTN100935
英文名称：Ultrapure Water
规格：250mL
本品是指将水中的导电介质几乎全部去除，又将水中不离解的胶体物质、气体和有机物均去除至很低程度的水。可以用于各种分子生物学实验。

储存条件：常温运输和保存、有效期两年。

·TdT加尾法DNA生物素标记试剂盒
编号：BTN90605B
英文名称：TdT-Tailing DNA Labeling Kit
规格：5次
本试剂盒是基于TdT末端转移酶能够在DNA的3´端添加dNTP尾巴的原理而设计，该反应的示意图如下：


产品特点：
1.快速，15分钟即可完成标记反应。
2. 不但可用于单链DNA和DNA Oligo标记，还可用于3´突出的双链DNA标记，但后者标记效率稍低。
3.可用同位素底物和非同位素底物(生物素和地高*(代"辛")标记的核苷酸等)。
4. 提供不带标记核苷酸、带生物素标记核苷酸和带地高*(代"辛")标记核苷酸三种选择。
5. 同时提供非标记的dATP，用户可以用其调节加尾长短和标记核苷酸掺入比例。
6. 标记的探针可用于电泳迁移率实验(EMSA)、原位杂交(ISH)、Northern Blot(不推荐用于低丰度RNA检测)、小RNA Northern、Southern Blot(不推荐用于单拷贝基因检测)、菌落杂交、斑点印迹杂交分析等。

试剂盒组成：

成分	规格
TdT缓冲液，5×	20μl
TdT(末端转移酶，10U/μL)	10μl
dATP，2mM	5μl
标记核苷酸	(A、B、C不同，见注)
超纯水	1ml
说明书	1份

注：A型用于自选标记，用户需自备标记核苷酸，本产品不提供标记核苷酸；B型提供5μl Biotin-11-dUTP；C型提供含5μl DIG-11-dUTP。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：
1.在0.2mL微量离心管中按下表设置一个20μl体系的标记反应(如果需要标记更多探针，请增加标记体积而不要增加探针DNA的浓度)：

成份	用量
探针DNA	100-200 pmol
TdT Buffer，5×	4μl
标记核苷酸，1mM (A型需自备标记核苷酸)	1μl
dATP，2mM	(见下注)
TdT末端转移酶(10U/μL)	2μl
超纯水	补到20μl

注：dATP可以不加，但这样得到的加尾全部是标记核苷酸，由于空间阻碍，灵敏度不一定最佳。如果杂交效果不好，掺入一定比例的dATP到标记核苷酸中，以控制标记的密度，提高比活。具体比例如何可以自己优化。
2. 37℃反应15分钟，延长到30分钟也可以。如果没有非标记核苷酸存在，一般可以加尾3-5个Biotin或DIG标记的核苷酸(标记物空间阻碍抑制延长)；如果有在加尾反应中加入一定比例的非标记核苷酸dATP(其他dNTP也可，只是本试剂盒只提供dATP而已)，每条探针上可加上约100个核苷酸，平均含5个标记核苷酸
3. 70℃ 10分钟灭活TdT酶。
4. 如果需要，可以PAGE电泳+银染(相关试剂需要另购)检测标记效率，带标记的探针泳动速度将低于没标记的探针。
5. 如果是非同位素标记，探针不需纯化可以直接用于杂交。如果需要纯化非同位素标记的探针，请不要酚/*仿抽提，因为非同位素标记物一般会使探针DNA进入有机相而丢失。
6. 使用时需将探针以1-8 ng/μL的终浓度加入到杂交液中(如果探针是双链DNA，加入前还需热变性)。如果不立即使用，非同位素标记的探针DNA可-20℃长期放置一年，同位素标记的探针DNA不能放置。


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ARB10763 人抗IgA抗体(Anti-IgA-Ab)ELISA代测服务 Human anti-iga antibody ELISA KIT
004001 小牛胸腺DNA
PL0401 无内毒素高纯度质粒小量快速提取试剂盒(离心柱型)
SJ0676 Marker Ⅱ
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糖原PAS快速染色液   3×100ml
磷酸*喹 Formamidinium acetate 50-63-5
BTN111007 MALDI蛋白样品处理试剂盒 MS Sample Preparation Kit
Delafield苏木素染色液   100ml|500ml
ARB11782 人*脱氧核苷尿嘧啶(BrdU)ELISA代测服务 Human bromodeoxyuridine,brdu ELISA KIT
ARB10391 人可溶性白细胞抗原G(sHLA-G)酶联免疫定量检测 Human soluble Human leucocyte antigen g1,shla-g ELISA KIT
*化镧 2,4-D 10025-84-0
BTN131209 MMLV逆转录酶(H-) MMLV Reverse Transcriptase(H-)
ARB12382 大鼠肺表面活性物质相关蛋白B(SP-B)代做ELISA实验 Rat associated protein b,sp-b ELISA KIT
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PY01-021  大豆卵磷脂  10克  
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