虾碱性磷酸酶(SAP)厂家价格

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名称：虾碱性磷酸酶(SAP)厂家价格
规格：300U
编号：BTN120403
产地：国产|进口
品牌：百奥莱博
英文名：Shrimp Alkaline Phosphatase
虾碱性磷酸酶与大肠杆菌来源的碱性磷酸酶同样，催化所有磷酸单酯的水解，不能催化磷酸二酯以及磷酸三酯的水解，也能催化ATP等焦磷酸键水解。但该酶与大肠杆菌来源的BAP以及小牛肠来源的CIAP 不同，通过65℃，15分钟的热处理，可使酶完全不可逆失活。

产品用途：
1．去除DNA片段的5´-末端的磷酸基。防止线状DNA的自身环化(Self-Ligation)。
2．除去PCR反应后残存的dNTP。PCR产物进行测序时，在反应体系中如果有多余的Primer和dNTP，将影响测序反应的正常进行。使用Exonuclease I分解残存的Primer；用SAP处理可降解多余的dNTP，之后不需要对PCR产物进行精制，立即可以进行测序反应。

产品组成：

 

成分	规格
虾碱性磷酸酶(1U/μL)	300U
10×Buffer	1ml
说明书	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

活性定义：在37℃、pH9.8的条件下，1分钟内水解对硝基*(代"*")磷酸盐生成1μmol的对硝基*(代"*")酚所需要的酶量定义为1个活性单位。

纯度：

1．5U的本酶和1μg的λDNA-Hind III片段在37℃、pH7.5的条件下反应1小时，DNA的电泳谱带不发生变化。
2．5U的本酶和1μg的16S，23S rRNA在37℃、pH7.5的条件下反应1小时，RNA的电泳谱带不发生变化

使用举例：
1．在1.5mL离心管中配制下列反应液，定容至50μL。

成分	用量
DNA Fragment	1～10pmol
SAP(1～5μL)	1～5U
10×Buffer	5μL
dH2O	up to 50μL

2．37℃反应15～30分钟。
3．65℃反应15分钟(加热失活)。
4．加入2.5μL的3M NaCl(终浓度150mM)。
5．乙醇沉淀加入125μL(2.5倍量)的预冷无水乙醇，-20℃放置30～60分钟，离心。
6．加入200μl的70％冷乙醇清洗沉淀后，干燥。
7．TE Buffer(<20μL)溶解沉淀。


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·硫氧还蛋白
编号：BTN130870
英文名称：Thioredoxin
规格：5mg
硫氧还蛋白是一类广泛存在的热稳定的作为*载体的蛋白质(约12kDa)。在许多还原反应中作为*供体，特别是核苷二磷酸变成相应的脱氧产物和光依赖性的还原反应中。也以结构域的形式出现于二硫键异构酶中，在蛋白折叠过程中，硫氧还蛋白可以催化二硫键的正确形成。

·动物细胞裂解液A(非变性)
编号：BTN80807A
英文名称：Animal Cell Lysis Solution(A)
规格：100mL
本产品含有多种细胞裂解成分和蛋白酶抑制成分，可以在非变性或变性条件下迅速裂解组织或培养细胞，使之释放出细胞内蛋白，用于后续实验。

产品特点：
1.快速裂解，多种裂解成分经过精心优化，能快速使细胞裂解。
2. 非变性(BTN80807A)产品能最大程度地保留蛋白天然结构和功能，主要用于免疫沉淀和免疫共沉淀，还可以用于蛋白活性检测(信号传递研究和酶动力学检测)和Western Blot等各种后续实验。
3.变性(BTN80807B)裂解细胞的效率更高，主要用于对抗原空间构型不敏感的免疫共沉淀实验，还可以用于Western Blotting。
4.适用于培养细胞(包括悬浮细胞)和新鲜组织。

储存条件：常温运输、4℃保存，有效期一年。

注意事项：
1. 如果在本产品中额外再加入终浓度为1×的、新鲜配制的蛋白酶抑制剂复合物，可以更有效地抑制蛋白酶活性，防止蛋白降解。
2. 如果用于信号传递研究，最好在本产品中加入终浓度为1×的、新鲜配制的磷酸酶抑制剂复合物。
3. 整个裂解步骤都要在冰浴或4℃操作。本产品和PBS 均需预先冷却。
4. 本产品所含有较高浓度的去垢剂会对Bradford蛋白浓度测定有较大影响，因此只能使用BCA法测定蛋白浓度。

使用方法：

一：处理贴壁的培养细胞
1. 去除贴壁细胞培养液，用冰浴预冷的PBS 洗两遍，去尽残留的PBS。
2. 将培养板放置在冰上待用。
3. 按每106个细胞加入0.1mL 本产品(或100mm 贴壁细胞加1mL 本产品)的比例向培养板中加入适量的本产品(按此比例裂解得到的裂解物的蛋白浓度约在5-10mg/mL 之间)。
 注意：裂解效率跟细胞数量和本产品用量的比例密切相关。一般情况下6孔板的单孔(1～2×106细胞)需要0.1～0.2mL本产品；25 cm2培养瓶(3～6×106细胞)需要0.3~0.6mL；75 cm2培养瓶(1～2×107细胞)需要1～2mL。对于特别大或特别小的细胞，需要用户摸索最佳用量。
4. 冰上放置10-30分钟(最佳时间跟细胞系相关)，其间偶尔轻轻摇晃或用枪头轻轻吹打。
5. 将细胞培养板倾斜使上清液汇集在一端，并将其全部转移到一个新的1.5mL塑料离心管中。
6. 15000×g，4℃离心10分钟，将上清转移到一个新的1.5mL塑料离心管中，放置在冰上待用或放-80℃长期保存。注意：如果用于免疫沉淀，最好新鲜使用。
7. 用前最好先测定上清液的蛋白浓度，然后再进行后续的电泳、Western或免疫沉淀操作。

二：处理悬浮细胞
1. 400×g，4℃离心10分钟收集悬浮细胞，弃上清。
2. 用等体积的预冷PBS 洗涤细胞沉淀两遍，步骤同第一步。
3. 按每106个细胞加入0.1mL 本产品的比例加入本产品，充分悬浮细胞。
4. 冰上放置15分钟裂解细胞，期间偶尔轻柔震荡。
5. 15000×g，4℃离心10分钟，将上清转移到一个新的1.5mL塑料离心管中。为避免吸取到细胞沉淀，最好留20-40μL液体不取。
6. 将上清液放置在冰上待用或放-80℃长期保存。注意：如果用于免疫沉淀，最好新鲜使用。
7. 使用前最好先测定上清液的蛋白浓度，然后再进行后续的电泳、Western或免疫沉淀操作。

三：处理组织块
1. 称量组织块，用毛玻片或玻璃匀浆器研磨或匀浆，用5-10倍体积的、预冷的PBS洗两次(包括冲洗器材)。
2. 将匀浆物转移到离心管中，1500g、4℃离心5分钟后弃上清。
3. 按每50mg 组织加入0.2mL 本产品的比例加入预冷的本产品，吹打混匀，放置冰上。
4. 每隔5分钟振荡器轻柔振荡一次，共4次。
5. 15000×g、4℃离心10分钟，将上清转移到一个新的1.5mL塑料离心管中，放置在冰上待用或放-80℃长期保存。注意：如果用于免疫沉淀，最好新鲜使用。
6. 使用前最好先测定上清液的蛋白浓度，然后再进行后续的电泳、Western或免疫沉淀操作。

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