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牛小肠碱性磷酸酶(CIAP)怎么卖

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  • 百奥莱博
  • BTN120404-WQD
  • 北京
  • 2025年07月14日
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    • 英文名

      Alkaline Phosphatase,Calf Intestinal

    • 保质期

      一年

    • 供应商

      北京百奥莱博科技有限公司

    • 保存条件

      -20℃

    特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

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    北京百奥莱博科技有限公司专业生产供应牛小肠碱性磷酸酶(CIAP)怎么卖,产品信息:

    类别:工具酶

    英文名:Alkaline Phosphatase,Calf Intestinal

    产品名 产品编号 包装规格
    牛小肠碱性磷酸酶(CIAP) BTN120404 500U

    编号:BTN120404

    规格:500U

    英文名:Alkaline Phosphatase,Calf Intestinal

    品牌:百奥莱博

    产地:北京

    牛小肠碱性磷酸酶与E.coli来源的碱性磷酸酶相同,催化所有磷酸单酯的水解,不能催化磷酸二酯以及磷酸三酯的水解,对ATP等的焦磷酸键水解速度较慢。由于CIAP处理后的DNA片段缺少连接酶所要求的5´磷酸末端,因此它们不能进行自连接。这个特性可以在克隆时降低载体DNA的背景。

     

    产品用途:

    1.去除载体DNA片段的5´-末端的磷酸基;

    2.防止克隆载体的自连接;

    3.蛋白质丝*酸、苏*酸和酪*酸的去磷酸化;

    4.为5´末端标记准备模板。

     

    产品组成:

     

    成份 规格
    CIAP(10~30U/μl) 500U
    10×CIAP Buffer 0.5mL
    使用手册 1份

     

    储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。

     

    活性定义:在37℃、pH9.8的条件下,1分钟内水解对硝基*(代"*")磷酸盐生成1μmol的对硝基*(代"*")酚所需要的酶量定义为1个活性单位。

     

    纯度:

    1.30 U的本酶和1μg的λDNA-Hind III片段在37℃下反应16小时,DNA的电泳谱带不发生变化。

    2.30 U的本酶和1μg的Closed circular(RFI)pBR322 DNA在37℃下反应1小时,DNA的电泳谱带不发生变化。

    3.18 U的本酶和1μg的16S,23S rRNA在37℃下反应16小时,RNA的电泳谱带不发生变化。

     

    使用举例:

    1.在微量离心管中配制50μL反应体系:

     

    成分 加入量
    DNA Fragment in TE Buffer 1~20pmol
    10×CIAP Buffer 5μl
    CIAP(10~30units/μl) 1-2μl
    补水到 50μl

    2.37℃或50℃反应30分钟。或者先37℃反应15分钟,再50℃反应15分钟。注意:单链DNA和具有5´突出末端的DNA在较低温度下(如37℃)即可去磷酸化,而具有3´突出末端的DNA或平末端DNA需要较高温度(如50℃)才能去磷酸化。

    3.*酚/*仿/异戊醇(25:24:1)抽提2次。注意:如果早在*酚抽提之前,用自备的蛋白酶K降解CIAP酶,则效果更好。具体做法是:加入EDTA和SDS使其终浓度为5mM EDTA和0.5% SDS,最后加入蛋白酶K溶液,使其终浓度为50μg/mL,然后56℃处理30分钟,再75℃孵育10分钟。然后用于*酚/*仿/异戊醇抽提。

    4.*仿/异戊醇(24:1)抽提1次。

    5.添加2.5μl的3M NaCl(终浓度150mM)。

    6.添加125μl的(2.5倍量)冷乙醇,在-20℃下放置30~60分钟。

    7.13000g离心20分钟后,小心去上清。

    8.用1mL 75%乙醇洗涤一次。

    9.干甩数秒,小心吸弃上清。

    10.用20μl以下的TE Buffer溶解DNA沉淀待用或放-20℃长期放置。

    牛小肠碱性磷酸酶(CIAP)怎么卖专业优质供应商:北京百奥莱博科技有限公司

    关键词:CIAP,牛小肠碱性磷酸酶,牛小肠碱性磷酸酶(CIAP),BTN120404,Alkaline Phosphatase,Calf Intestinal

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