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- 详细信息
- 文献和实验
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- 库存:
966
- 英文名:
Alkaline Phosphatase,Calf Intestinal
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")牛小肠碱性磷酸酶(CIAP)怎么卖,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
北京百奥莱博科技有限公司专业生产供应牛小肠碱性磷酸酶(CIAP)怎么卖,产品信息:
类别:工具酶
英文名:Alkaline Phosphatase,Calf Intestinal
| 产品名 | 产品编号 | 包装规格 |
| 牛小肠碱性磷酸酶(CIAP) | BTN120404 | 500U |
编号:BTN120404
规格:500U
英文名:Alkaline Phosphatase,Calf Intestinal
品牌:百奥莱博
产地:北京
牛小肠碱性磷酸酶与E.coli来源的碱性磷酸酶相同,催化所有磷酸单酯的水解,不能催化磷酸二酯以及磷酸三酯的水解,对ATP等的焦磷酸键水解速度较慢。由于CIAP处理后的DNA片段缺少连接酶所要求的5´磷酸末端,因此它们不能进行自连接。这个特性可以在克隆时降低载体DNA的背景。
产品用途:
1.去除载体DNA片段的5´-末端的磷酸基;
2.防止克隆载体的自连接;
3.蛋白质丝*酸、苏*酸和酪*酸的去磷酸化;
4.为5´末端标记准备模板。
产品组成:
| 成份 | 规格 |
| CIAP(10~30U/μl) | 500U |
| 10×CIAP Buffer | 0.5mL |
| 使用手册 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
活性定义:在37℃、pH9.8的条件下,1分钟内水解对硝基*(代"*")磷酸盐生成1μmol的对硝基*(代"*")酚所需要的酶量定义为1个活性单位。
纯度:
1.30 U的本酶和1μg的λDNA-Hind III片段在37℃下反应16小时,DNA的电泳谱带不发生变化。
2.30 U的本酶和1μg的Closed circular(RFI)pBR322 DNA在37℃下反应1小时,DNA的电泳谱带不发生变化。
3.18 U的本酶和1μg的16S,23S rRNA在37℃下反应16小时,RNA的电泳谱带不发生变化。
使用举例:
1.在微量离心管中配制50μL反应体系:
| 成分 | 加入量 |
| DNA Fragment in TE Buffer | 1~20pmol |
| 10×CIAP Buffer | 5μl |
| CIAP(10~30units/μl) | 1-2μl |
| 补水到 | 50μl |
2.37℃或50℃反应30分钟。或者先37℃反应15分钟,再50℃反应15分钟。注意:单链DNA和具有5´突出末端的DNA在较低温度下(如37℃)即可去磷酸化,而具有3´突出末端的DNA或平末端DNA需要较高温度(如50℃)才能去磷酸化。
3.*酚/*仿/异戊醇(25:24:1)抽提2次。注意:如果早在*酚抽提之前,用自备的蛋白酶K降解CIAP酶,则效果更好。具体做法是:加入EDTA和SDS使其终浓度为5mM EDTA和0.5% SDS,最后加入蛋白酶K溶液,使其终浓度为50μg/mL,然后56℃处理30分钟,再75℃孵育10分钟。然后用于*酚/*仿/异戊醇抽提。
4.*仿/异戊醇(24:1)抽提1次。
5.添加2.5μl的3M NaCl(终浓度150mM)。
6.添加125μl的(2.5倍量)冷乙醇,在-20℃下放置30~60分钟。
7.13000g离心20分钟后,小心去上清。
8.用1mL 75%乙醇洗涤一次。
9.干甩数秒,小心吸弃上清。
10.用20μl以下的TE Buffer溶解DNA沉淀待用或放-20℃长期放置。
牛小肠碱性磷酸酶(CIAP)怎么卖专业优质供应商:北京百奥莱博科技有限公司
关键词:CIAP,牛小肠碱性磷酸酶,牛小肠碱性磷酸酶(CIAP),BTN120404,Alkaline Phosphatase,Calf Intestinal
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| 编号 | 类别 | 名称 |
| BTN90309 | DNA纯化 | 红细胞裂解液B型(流式细胞分析用) |
| BTN131224 | 其他细胞生物学试剂 | Helly固定液 |
| BTN80901 | RNA纯化 | 柱式动物RNA大量提取试剂盒 |
| BTN131083 | 核酸扩增(PCR) | Ribo-SPIA cDNA扩增试剂盒 |
| BTN131046 | 蛋白质研究 | n-十二烷基β-D-麦芽糖苷 |
| BTN130997 | 探针标记及检测 | Sephadex G50介质 |
| BTN170403 | 核酸扩增(PCR) | 一管式反转录试剂盒 |
| BTN60106 | 克隆与表达 | 平末端DNA加T试剂盒 |
| BTN130511 | 克隆与表达 | 大肠杆菌JM110化学感受态细胞 |
| BTN130616 | 工具酶 | Bsu DNA聚合酶,大片段 |
| BTN130645 | 工具酶 | 8-氧代鸟嘌呤DNA糖基化酶(OGG1) |
| BTN51208C | 核酸扩增(PCR) | dNTP溶液(100mM) |
| BTN51102 | RNA纯化 | 细菌RNA提取试剂盒 |
| BTN100837 | 蛋白质研究 | EDTA溶液(0.5M,蛋白级) |
| BTN130969 | RNA纯化 | 冷冻型血液RNA保存液 |
| BTN90801B | 克隆与表达 | 一站式TA克隆试剂盒(含感受态细胞) |
| BTN3073 | RNA纯化 | 一管式病毒RNA提取试剂盒 |
| BTN130819 | 其他细胞生物学试剂 | Bouin固定液 |
| BTN131029 | 工具酶 | 胰蛋白酶(质谱级) |
| BTN70904B | 探针标记及检测 | 酵母tRNA溶液(精提) |
| BTN120512 | 克隆与表达 | 即用型蓝白T载体B型(T7-T3,有MCS) |
| BTN100103B | 克隆与表达 | 裂殖酵母化学感受态细胞制备试剂盒 |
| BTN120684 | 克隆与表达 | 噻孢霉素溶液 |
| BTN101106 | 蛋白质研究 | 沉淀型TMB显色试剂盒 |
| BTN80810 | 蛋白质研究 | 一站式SDS-PAGE蛋白电泳套装 |
| BTN70503A | 核酸电泳和回收 | DNA marker(50-500bp) |
| BTN130818 | 蛋白质研究 | HRP标记的链霉亲和素 |
| BTN91104B | 探针标记及检测 | Denhardt溶液(非同位素探针) |
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文献和实验1 溶解核酸酶P1(sigma)的冷冻干燥物与1.0ml30mM醋酸缓冲液(PH=5.3)?不知道此配法行不行?在sigma的说明书上没有具体说明! 酶活性:1mg核酸酶P1在1小时,ph5.3 ,T=50 能够把2gRNA或0.2gDNA酶解为5-单核甘酸 促进此酶的稳定性:在孵育时,可加zn和人血清白蛋白增加其稳定性! 2牛小肠碱性磷酸酶 试剂准备 • 10mM Tris-HCl (pH 8.0) • CIAP stop buffer 10mM Tris-HCl (pH
识别的特定DNA序列不同的碱基序列,这种现象叫限制酶的star活性。它的出现与限制酶、底物DNA以及反应条件有关。 (2)碱性磷酸酶 细菌碱性磷酸酶(BAP)和牛小肠碱性磷酸酶(CIAP)都能催化水解DNA、RNA、dNTP和NTP上的5’-磷酸残基。比较而言,CIAP更常用,因其可在70℃ 10’内加热灭活或通过苯酚抽提而变性失活,同时CIAP的活性比BAP的高10-20倍。它主要用于:(1)克隆时去除载体的5’-P,以防载体自连;(2)在用 Kinase进行
克隆。 6. 线形质粒DNA 5'-粘性末端去磷酸 经限制性内切酶酶切的质粒DNA 5'端均带有磷酸集团,如用此载体直接转化大肠杆菌,其自身环化几率非常高,影响连接、转化效率。因此一般酶切的质粒DNA要经脱磷,使用碱性磷酸酶(CIAP)去除5'端磷酸集团。方法如下: 1) 质粒DNA和CIAP以及BUFFER 37℃水浴30min。 2) 补充CIAP 再37℃水浴30min。 3) 加入50mM EDTA至终浓度5mM 75℃加热
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