北京现货PAGE胶DNA回收试剂盒折扣价

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名称：北京现货PAGE胶DNA回收试剂盒折扣价
品牌：百奥莱博
英文名：PAGE DNArc
产地：国产|进口
规格：30次
编号：BTN70908
本试剂盒是专门用于从PAGE凝胶中回收DNA片段和OLIGO的产品。

产品特点：
1.适合于回收100bp以下的DNA片段，包括长度在20nt左右的OLIGO。
2. 操作简单，只有浸泡和离心两步。
3. 回收率在70%以上(具体跟DNA的长度和浸泡的时间密切相关)。
4. 纯度高，本试剂盒回收的DNA和OLIGO可直接用于酶切、连接、PCR登等多种分子生物学实验。
5. 本产品既能回收双链DNA片段，也能回收单链DNA(包括OLIGO)。

试剂盒组成：

 

成分	规格
溶液A	15ml
溶液B	30ml
溶液C	30ml
DNA洗脱液	1.5ml
说明书	1份

储存条件：常温运输，4℃保存(长期)或室温保存(短期)，有效期为一年。

使用方法：
1.进行PAGE电泳，电泳后染色观察DNA 并确定需要回收的DNA 条带的位置。
2.小心切取含DNA片段的PAGE凝胶。尽可能多地把多余的胶切除，否则多余的胶会影降低DNA的回收效率。胶的重量控制在0.3克以下为宜。
3. 将凝胶块转移到一个干净的1.5mL塑料离心管中并用移液枪头充分将凝胶块捣碎。
4. 加入0.3mL溶液A，将离心管平放摇晃1-10小时。如果DNA片段长度在100bp左右，摇晃1-3小时就足够；如果长度在300bp以上，最好摇晃过夜。
5. 12000～15000g离心3～5分钟，小心将上清液(含DNA片段)转移到一个新的1.5mL塑料离心管中。在凝胶沉淀中加入0.2mL溶液A，充分吹打。
6. 12000～15000g室温离心3～5分钟，小心将上清液(含DNA片段)转移到第五步所得的，已经含有0.3ml上清液的塑料离心管中。此时，管中的上清液共0.5ml。
7.在管中加入加入2倍体积(1ml)的溶液B，充分颠倒混匀。
8. 12000～15000g室温离心10-15分钟，DNA将在管底形成细小的沉淀。小心移弃上清。
9. 加入1mL溶液C，振荡一分钟。12000～15000g室温离心3～5分钟后小心移弃上清。
10. 开盖室温静置，直到管中液体挥发。
11. 加入20-50μL DNA洗脱液3.0溶解管底的DNA沉淀，得到的溶液可以立即使用或低温保存。

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·蜗牛酶干粉
编号：BTN100917
英文名称：Snail enzyme,powder
规格：5g
本品是从蜗牛(Helix pomatia)的嗦囊和消化道中制备的混合酶，它含有β-glucoronidase、endo-β-glucanase、arylsulphatase、纤维素酶，果胶酶，淀粉酶，蛋白酶等20多种酶，呈褐色结晶粉末。可以用于真菌细胞核酸和蛋白质制备、原生质球制备等。

储存条件：低温运输，4℃保存，有效期一年。

使用方法：(处理酵母细胞举例)
1.配制山梨醇缓冲液(10mL)：1.82g山梨醇、0.042g柠檬酸*，用10mL pH5.8的磷酸*缓冲液溶解，涡旋震荡混匀，超净台中，滤器过滤除菌。
2.取5mL 山梨醇缓冲液加入到装有1g蜗牛酶的棕色瓶中，轻轻摇动混匀，务必使蜗牛酶完全溶解，使用之前用枪头挑一下瓶底，看是否有未溶解的酶，若有沉淀，则继续摇动或用枪头吹吸，使其溶解，得到的溶液为浓度是200mg/mL的蜗牛酶溶液。
3.取3-5mL酵母细胞，200μL无菌水洗涤菌体(吹吸重悬)，室温10000rpm离心1min，弃上清。重复洗涤2-3次。
4.将酵母细胞重悬于300-500μL巯基化合物中，32℃水浴15-30min。期间轻轻颠倒离心管两三次。
5.室温10000rpm离心1min，弃上清。将沉淀重悬浮于500μl山梨醇缓冲液中。
6.按照每克细胞30-40mg蜗牛酶的比例，加适量体积的第2步配制的蜗牛酶溶液到酵母细胞溶液中，37℃保温1小时。(破壁率一般达90%以上。)
7.4℃保存或直接用于核酸、蛋白质提取制备。

附：巯基化合物配制方法
巯基化合物(0.04M EDTA和0.14M β-巯基乙醇)(30mL)：

试剂	剂量
0.5M EDTA	2.4ml
巯基乙醇(分析纯ρ=1.11439g/mL)	294μl
无菌水	27.3ml

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