双酶一管式RT-PCR试剂盒(MMLV-Taq) 核酸扩增(PCR)

双酶一管式RT-PCR试剂盒(MMLV-Taq) 核酸扩增(

PCR)
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  • ¥200 - 2460
  • 百奥莱博
  • BTN91202-FKE
  • 北京
  • 2025年07月11日
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      742

    • 英文名

      Two-Enzyme One-Tube RT-PCR Kit

    • 保质期

      一年

    • 供应商

      北京百奥莱博科技有限公司

    • 保存条件

      2~8℃

    特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

    百奥莱博专业生产供应双酶一管式RT-PCR试剂盒(MMLV-Taq) 核酸扩增(PCR),我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。


    名称:双酶一管式RT-PCR试剂盒(MMLV-Taq) 核酸扩增(PCR)
    英文名:Two-Enzyme One-Tube RT-PCR Kit
    品牌:百奥莱博
    产地:国产|进口
    规格:50次
    编号:BTN91202
    本产品是经过精心优化的、基于MMLV 逆转录酶和Taq DNA聚合酶的双酶一管式RT-PCR试剂盒,它含有除模版RNA和其专一性引物以外的所有RT-PCR试剂,包括MMLV 逆转录酶、Taq DNA聚合酶、RT-PCR缓冲液等,可以在同一反应管内完成RNA→cDNA→PCR反应(RT-PCR反应)。

    产品特点:
    1.一管式完成RT-PCR反应,避免样品交叉污染。
    2. 即开即用,用户不需要单独准备RT-PCR所需的各种试剂。
    3. 主要成分只有两个RT-PCR buffer和MMLV-Taq Mix,将加样步骤减少到最低,极大降低了加样误差,增加了可重复性。
    4. 使用范围广,适用于从病毒RNA 到人RNA的各种RNA 模板。
    5.高灵敏度,每个RT-PCR 体系最低可以检测200拷贝的RNA分子,可扩增的模版RNA的最长达2000nt。
    6. 所得RT-PCR产物可以直接用于AT克隆。

    试剂盒组成:

     
    成分 规格
    双酶一管式RT-PCR Buffer(2×) 750μl
    MMLV-Taq Mix 100μl
    RNase-free水 1ml
    说明书 1份


    储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。

    使用方法:
    注意:所有离心管用前最好全部短暂离心几秒使管壁上溶液沉淀到管底。下面以一个30μL 体系的RT-PCR 为例,如果体积不同,各成分用量需要适当调节。
    1.在一干净的无RNase的PCR管中,先加入下列成分:
    成分 阴性对照 样品
    RNA模板(自备,分下面三种情况) 见下
    总RNA 100-500ng
    或poly(A)mRNA 10-500ng
    或体外转录得到的专一RNA 0.01 pg-500ng
    RNA特异性引物一(自备) 终浓度300nM 终浓度300nM
    RNA特异性引物二(自备) 终浓度300nM 终浓度300nM
    探针(仅对Realtime RT-PCR) 终浓度200nM 终浓度200nM
    RNase-free水 补到13μL 补到13μL
    双酶一管式RT-PCR Buffer(2×) 15μl 15μl
    MMLV-Taq Mix 2μl 2μl

    注:通常初次使用本试剂时,可用引物浓度300nM,探针浓度200nM进行实验,根据实验结果具体情况,在200~800nM 范围内调整引物浓度,在50~400nM 范围内调整探针浓度以达到最佳检测效果。引物、探针、待检样品的具体加量用户可以根据实际情况调整,同时增减DEPC 水用量,保证总反应体积不变即可。
    2. 轻柔混合均匀后放入PCR 仪中进行RT-PCR。
    3. 设定RT-PCR反应条件时,一般将RT的条件设定成42℃,30 钟,后接94℃变性5分钟,然后进入PCR循环(PCR参数将根据自备引物的Tm 值由用户自行决定注)、最后72℃,5分钟。对Realtime PCR,在复性步骤设置荧光检测,检测通道:FAM/HEX/VIC/ROX/CY5
    4. RT-PCR结束后取5-10μL电泳检查。

    注意事项:
    1. 使用已校准的移液器,选用一次性PCR反应管、离心管、tip 头等进行样本处理及配液等操作,所有用具应不含DNA酶和RNA酶。
    2.引物、探针设计过程中应尽可能避免发夹结构、二聚体等现象的发生,探针的位置尽可能靠近上游引物,PCR 目标片段最好小于200bp,尽可能在150bp以内。
    3. 实验样品尽可能新鲜,提取过程应严防RNA酶污染及操作不当导致的RNA 降解。
    4. 使用本产品时建议对RT-PCR扩增条件、引物浓度和样品用量进行调整,选择最适当的引物浓度、样品浓度和PCR扩增条件。
    5. 本产品使用前应在室温充分融解,并用漩涡震荡器充分混匀。
    6. 统一配液后分装以减少加样误差,每次实验应设置阴性对照。
    7. 禁止标记PCR反应管,避免外源性荧光信号干扰。
    8. PCR反应管中不能有气泡,否则会产生非特异的荧光信号。若有气泡,可先用手指将气泡弹破,然后再低速离心消除。
    9. 实时荧光PCR 仪器连续进行实验时,最好间隔一小时以上再使用。
    10. 实时荧光PCR 仪需经常校正和清洁载样板板孔。
    11. 若使用Roch LightCyclerTM荧光PCR 仪,应将毛细管放在专门套管中,以便分装反应体系和加入待检样品。前述操作完毕应低速离心数秒再将毛细管垂直缓慢放入样品架,以免折断;若发生折断,应小心取出,用专用小毛刷擦拭干净后方可进行扩增。
    12. 实验室应严格分区,避免PCR产物污染。

    欲咨询购买双酶一管式RT-PCR试剂盒(MMLV-Taq) 核酸扩增(PCR),请致电北京百奥莱博科技有限公司,为您提供最全面周到的产品服务,除此之外,我公司正在促销以下产品:
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    ·Southern封堵液(Nylon专用)
    编号:BTN120677
    英文名称:Southern Blocking Buffer (Nylon)
    规格:100mL
    本产品为专门针对Nylon膜的核酸杂交封堵液,用于降低检测时的非特异性信号,降低背景,增强信噪比。即开即用,方便快捷。

    储存条件:低温运输、-20℃保存,有效期一年。

    ·硅胶膜离心吸附柱系列(小量提取)
    编号:BTN60911
    英文名称:Silica Spin Column for Miniprep
    规格:50套
    硅胶膜离心吸附柱目前广泛用于基因组DNA提取、总RNA提取、DNA反应纯化、DNA胶回收和质粒DNA制备等分子生物学实验,但是由于硅胶膜吸附核酸的能力千差万别(详细分析见百奥莱博综述Silica-DNA结合原理及影响因素),使得市场上相关产品的质量也良莠不齐。百奥莱博经过精心研究,找到特殊的化学修饰方法,使普通硅胶膜吸附核酸的能力大为增加,好于市场上绝大多数产品。本产品就是基于化学修饰硅胶膜的微型离心吸附柱。

    产品特点:
    1.高载量,在同等上样条件下吸附能力比同类产品高1-2倍左右。
    2.上样体积为0.7mL。
    3.与各种常用的,基于Silica-DNA结合原理的上柱液和洗柱液兼容。
    4.可以再生使用(需要百奥莱博的离心吸附柱再生液)。
    5. 结合DNA的性能不会随放置的时间变化。

    储存条件:常温运输及保存,有效期两年。

    使用效果:
    硅胶膜离心吸附柱系列(小量提取)
    图注: 本产品(T)和国内杭州V公司离心吸附柱(V)用于从1.5mL E.coli菌液中提取pGEM3质粒DNA(使用百奥莱博柱式质粒DNA提取试剂盒试剂),最后用100μl TE洗脱质粒DNA,5μl用于电泳。
    硅胶膜离心吸附柱系列(小量提取)
    图注: 本产品(左)和上海S公司离心吸附柱(右)用于从玉米叶片中提取总RNA。洗脱量为100μl,10μl用于甲醛胶变性电泳。


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    J0207 兔抗乙肝E抗原抗血清 1ml/10ml
    3-*杀螨醇 5-Aminofluorescein 115-32-2
    ARB14245 人CD3分子(CD3)尿液中含量检测 
    ARB12728 小鼠5核苷酸酶(5-NT)检测服务 Mouse 5-nucleotidase,5-nt ELISA KIT
    9005-84-9 麦芽糊精
    L-丙交酯 Ferric citrate 4511-42-6
    脱脂奶粉 β-Napthyl acetate
    ARB11645 人蛋白S(ProteIn S)Elisa分析 Human protein s ELISA KIT
    BTN130422 CM交换介质 CM Medium
    9013-20-1 链霉亲和素
    ARB10184 人α2抗纤溶酶(α2-AP)血清中含量检测 Human α2-antiplasmin,α2-ap ELISA KIT
    D-谷*酰胺 L-Cystathionine 5959-95-5
    姬姆萨染色液(1:9) Giemsa stain  100ml|500ml
    HC0158 离心管盒
    RN1401 RNAclean RNA 清洁纯化试剂盒
    ARB12138 大鼠生长抑素(SS)定量分析 Rat somatostatin,ss ELISA KIT
    ARB12223 大鼠血小板活化因子(PAF)elisa检测操作说明书 Rat platelet activating factor,paf ELISA KIT
    ARB10116 人LeIshmAnIA 代做ELISA实验 
    脱氧胆酸* DIPSO sodiu*(代"m") salt 302-95-4
    PY01-148  去*胆酸  10克  
    SJ0086 Creatine phosphate Na2 4H2O 磷酸肌酸二*四水

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