M-MuLV反转录酶(不含RNase H活性)

M-MuLV反转录酶(不含RNase H活性)

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  • 百奥莱博
  • 北京
  • 2025年07月15日
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      224

    • 英文名

      M-MuLV Reverse Transcriptase

    • 保质期

      长期

    • 供应商

      北京百奥莱博科技有限公司

    • 保存条件

      -20℃

    • 规格

      10KU|10KU×5

    特别提示:包括M-MuLV反转录酶(不含RNase H活性)在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!


    产品名称:M-MuLV反转录酶(不含RNase H活性)
    英文名称:M-MuLV Reverse Transcriptase
    产品货号:ALH257
    产品规格:10KU|10KU×5

    本品是使用通过基因重组技术克隆表达的点突变型RNase H活性缺失的M-MuLV反转录酶。野生型的M-MuLV包含的RNase H活性能够催化降解DNA/RNA杂合体中的RNA,因此在cDNA第一条链的合成反应中可能会降解RNA/DNA杂合体中的模板RNA。本酶M-MuLV(RNase Hˉ)的RNase H活性缺失,与M-MuLV 相比,具有更强的延伸能力和稳定性,可用于较长的cDNA合成以及高比例的全长cDNA文库的构建等。本酶浓度200 units/μl,合成cDNA片段长度最高可达12kb。

    试剂盒组分(10KU):
    M-MuLV RTase(200U/μl)———————10000U
    5×RT Buffer————————————500μl

    注意事项:
    1. 避免RNase污染。
    2. 为保证反转录成功建议使用高质量的RNA样品。
    3. 如果RNA模板GC含量丰富或者有复杂二级结构,可以先只加RNA模板、引物和和RNase free H2O混匀,65℃变性5分钟,冰上冷却,短暂离心后加入其它成分继续下面的反转录步骤。

    储存条件:-20℃。

    本制品别名:M-MuLV反转录酶(RNase H活性缺失)|N-MuLV Rtase

    除了M-MuLV反转录酶(不含RNase H活性),M-MuLV反转录酶(RNase H活性缺失)|N-MuLV Rtase,我公司还供应以下相关产品:



    名称:dNTP溶液(10mM)
    货号:BTN51208B
    规格:0.5mL
    本产品是dATP、dTTP、dGTP、dCTP四种核苷酸的混合液,每种核苷酸的浓度为10mM,纯度在98%以上(HPLC检测),不含DNA内切酶、DNA外切酶、RNA酶和磷酸酶的污染,可以直接用于PCR、RT-PCR、cDNA合成、DNA测序、DNA探针标记等反应。使用浓度根据具体的反应决定,请参考相关手册。

    dNTP的分子结构

    储存条件:低温运输和-20℃保存、有效期一年。

    DNA为何使用2"-脱氧核糖和胸腺嘧啶?
     DNA为何不选择现成的光合作用产物核糖和合成RNA的原料尿嘧啶(uracil)分别作为其糖分子和碱基,而去选择需要额外的合成步骤才能得到的2"-脱氧核糖和胸腺嘧啶(thymine),其原因何在呢?目前的主流观点是:DNA不能选择核糖的原因之一是由于核糖2"位置上的OH基团会使得到的双螺旋骨架结构不均匀、不平行,难以有效地折叠进染色体结构中,而使用2"-脱氧核糖则能得到均匀平行的双螺旋结构;原因之二是核糖2"位置上的OH基团会对邻近的磷酸二酯键进行分子内亲核攻击,降低分子的稳定性,而对遗传物质来说稳定性十分重要,所以DNA选择了失去分子内亲核攻击能力的2"-脱氧核糖。对信使分子而言,稳定性并不重要,所以RNA仍然使用核糖。
     DNA使用胸腺嘧啶的原因是DNA中的胞嘧啶(cytosine)会缓慢水解变成尿嘧啶,如果尿嘧啶也是DNA的正常组成成份,则DNA修复系统就不能区分哪些尿嘧啶是正常的,哪些是需要修复的。使用胸腺嘧啶(比尿嘧啶分子多一个甲基)不但能保持跟尿嘧啶一样的形成碱基对的能力,同时又能跟尿嘧啶区别开来,使DNA分子中出现的任何尿嘧啶都能被尿嘧啶DNA糖苷酶(uracil-DNA glycosylase)发现和修复。

    名称:通用反转录试剂盒(不含Taq酶)
    货号:QN0943
    规格:50T|100T
    本试剂盒适用于各种 RNA制品的反转录反应。它采用M-MLV进行反转录反应,能够获得较长的反转录产物用于后续的PCR扩增和分子克隆实验。

    本试剂盒中配置的酶为进口的酶。RT酶采用进口的M-MLV,所以cDNA更长,基因的信息保留得更完整!反转录过程中特异的RNase抑制剂可有效降低由于外源RNase污染而导致实验失败的风险。本试剂盒使用方便、快捷,可广泛用于cDNA克隆及目的基因检测等分子生物学实验。

    注意事项:用于cDNA合成反应的相关试剂和耗材尽可能用DEPC进行处理,并在高压灭菌后使用。有些试剂不能高压灭菌时,首先用经过灭菌的器具、水等配制溶液后,再将溶液进行过滤除菌处理。

    储存条件:-20℃保存,避免反复冻融,有效期12个月。

    名称:百无忧SPIA扩增试剂盒(用于扩增DNA模板)
    货号:BTN131084
    规格:20次

    名称:LAMP试剂盒(含染料)
    货号:MT0030
    规格:50T|200T
    LAMP(环介导等温扩增技术)是一种新型核酸扩增技术,采用4或6条能够识别目的基因上的6个特异区域的引物,依赖于Bst DNA聚合酶的强链置换活性,在30~60分钟内DNA扩增可达109~1010倍。本试剂盒含有可见光染料,阳性扩增样品的颜色为天蓝色,阴性扩增为紫罗兰色。购买本试剂盒,我们可以免费为客户设计引物,需要设计引物的请发Email咨询。

    产品特点:
    1.检测方便:变色反应,颜色变化明显,肉眼即可观察。
    2.操作简单:一步反应30分钟即可完成。
    3.特异性高:六条特异性引物,保证了产物的特异性和检测的可靠性。
    4.仪器简单:只需维持恒温的水浴锅。
    5.灵敏度高:能从极低拷贝中扩增靶基因。
    6.应用广泛:广泛适用于微生物致病菌检测和疫病检测。

    产品组成:
    组分 50T 200T
    10×可见光染料 150μl 1ml
    10×LAMP Buffer 1ml 1ml
    100 mM MgSO4 500μl 500μl
    10 mM dNTP Mixture 500μl 1ml
    Bst DNA Polymerase 2.0 50μl 200μl

    注意:10×LAMP Buffer中的Mg2+浓度为60 mM。

    保存条件:-20℃,避免反复冻融,有效期3年。

    反应实例:
    LAMP试剂盒(含染料)应用实例
    应用本试剂盒和6条引物扩增HHV-6 DNA,产物分别可见光染料显色观察和电泳法检测

    使用方法:
    1.按以下组分配置反应混合液:
    加入物 加入量
    10×LAMP Buffer 2.5μl
    10×可见光染料 2.5μl
    10mM dNTP Mixture 2μl
    模板 DNA Xμl
    *10×LAMP Primer Mix 2.5μl
    Bst DNA Polymerase 2.0 1μl
    ddH2O Up to 25μl

    *10×LAMP Primer Mix:FIP/BIP 16μM each,Loop F/R 8μM each,F3/B3 2μM each
    2.反应体系配好后,充分混匀并短暂离心,65℃ 30分钟。

    注意事项:
    1.为了减少交叉污染,请分区操作(试剂和模板DNA的配置操作最好在不同区域中进行)。
    2.实验时,所需模板量取决与样品类型(0.1ng~100ng),可先进行预实验确定模板量。
    3.10×LAMP Buffer中含有60 mM MgSO4,反应体系中Mg2+终浓度为6 mM。通常无需添加即可,必要情况下可提高到10~16mM。
    4.各区物品均为专用,不可交叉使用,防止污染。
    5.实验过程中应穿工作服,带手套,建议使用带滤芯的一次性吸头。

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