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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
923
- 英文名:
DNA Polishing Kit
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
2~8℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")DNA粘转平试剂盒北京厂家,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
北京百奥莱博科技有限公司专业生产供应DNA粘转平试剂盒北京厂家,产品信息:
类别:克隆与表达
英文名:DNA Polishing Kit
| 产品名 | 产品编号 | 包装规格 |
| DNA粘转平试剂盒 | BTN60107 | 20次 |
规格:20次
产地:国产|进口
英文名:DNA Polishing Kit
编号:BTN60107
本产品利用Pfu DNA polymerase所具有3´到5´的聚合酶活性和5´到3´外切酶活性,将3´或5´突出的DNA片段转化成平末端,用于克隆工作。
产品特点:
1. 简单,精心优化过的2×Polishing Buffer中含有所需要的所有成分,不需要单独准备。
2.适用于任何平末端的DNA载体。
产品组成:
| 成分 | 规格 |
| Pfu DNA Polymerase(3U/μL) | 20μl |
| 2×Polishing Buffer | 0.5ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,保存期限为一年。
使用方法:
1. DNA片段的准备:
无论是来源Taq,Tth,T7,Klenow和Vent等DNA聚合酶合成的DNA片段,还是用限制性内切酶制备的DNA片段,粘转平之前均需要将DNA沉淀以便去除反应液中的无关成份。沉淀DNA的方法包括经典的盐/纯沉淀法,离心柱DNA 吸附法和百奥莱博的一管式非醇超快DNA沉淀法。
2. 设置粘转平(Polishing)反应:
| 在一个干净的离心管中,分别加入
|
|
| 3´或5´突出的DNA片段 | 10-500ng |
| 2×Polishing Buffer | 25μL |
| Pfu DNA polymerase | 1μL |
| 补水到 | 50μL |
| 72℃保温2小时。 | |
注意:如果不使用热盖式PCR 仪器加热,则需要在反应管中再加入适量液体石蜡以防反应过程中水份蒸发。
3.反应后处理
粘转平反应后,样品可以放-20℃长期保存,也可以直接用于T4 DNA连接酶催化的连接反应。对10μL的连接反应体系,一般需要加入1-2μL粘转平反应液。由于Pfu DNA polymerase在连接反应的温度条件下几乎没有活性,所以不必去除。但文献报道,去除后连接效率更高。
DNA粘转平试剂盒北京厂家专业优质供应商:北京百奥莱博科技有限公司
关键词:DNA粘转平试剂盒,DNA Polishing Kit,BTN60107
我公司严格遵守“质量优先、客户优先、技术优先、服务优先”“四项优先”原则;DNA粘转平试剂盒已被广泛应用于化学、化工、生命科学的基础研究和开发应用等诸多领域,并销往全国各地,公司客户遍布国内各大学、医院、研究所、卫生防疫、制药公司、生物公司等单位,得到广大客户的一致好评。我们的宗旨是“为客户提供最优质的产品和服务”。 百奥莱博以技术为核心并拥有完善的市场营销体系、现代化管理体系和专业化物流配送系统,最大程度满足国内外生命科研人员的产品需求。公司专门设立优质完善的客服中心及技术中心,第一时间为客户解决技术支持、产品跟踪以及售后等相关问题,旨在生命科学和医学科学研究领域创造具有国际竞争力的自主知识产权品牌产品。欢迎社会各界朋友前来洽谈业务,共创辉煌!
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| 编号 | 类别 | 名称 |
| BTN90605C | 探针标记及检测 | TdT加尾法DNA地高*(代"辛")标记试剂盒 |
| BTN131044 | 蛋白质研究 | 辛甲基β葡糖苷 |
| BTN121105 | 细胞及免疫学 | 茜素红S染色试剂盒 |
| BTN130649 | 工具酶 | 尿嘧啶-DNA糖基化酶(人单链选择性单功能)(hSMUG1) |
| BTN80918 | RNA纯化 | Tris盐*(代"酸")溶液(1M,pH8.5)(RNase-free) |
| BTN130543 | 蛋白质研究 | α2巨球蛋白 |
| BTN70503R | 核酸电泳和回收 | DNA marker(100-2000bp) |
| BTN120700 | 克隆与表达 | 利福平溶液 |
| BTN70202 | DNA纯化 | 柱式酵母质粒DNA提取试剂盒 |
| BTN130429 | 工具酶 | Phusion DNA聚合酶 |
| BTN110809 | 蛋白质研究 | 6mL亲和层析柱 |
| BTN130994 | DNA纯化 | 96孔板质粒DNA提取试剂盒(真空法) |
| BTN130864 | 细胞及免疫学 | Hoechst 33258干粉 |
| BTN100880 | 核酸电泳和回收 | 四甲基乙二*(代"胺")(电泳级) |
| BTN81204 | 蛋白质研究 | 5×SDS-PAGE上样液 |
| BTN100101 | 蛋白质研究 | 镍柱介质(镍-琼脂糖凝胶) |
| BTN130938 | DNA纯化 | 痰液采集器 |
| BTN130540 | 蛋白质研究 | 二*异香豆素溶液(10mg/mL) |
| BTN131272 | 细胞组织染色 | Masson三色染色试剂盒 |
| BTN90602C | 核酸电泳和回收 | DNA marker(pUC19/MspI) |
| BTN131134 | 细胞及免疫学 | Percoll |
| BTN100822 | 干粉培养基 | SB培养基 |
| BTN130886 | 蛋白质研究 | 植物线粒体总蛋白提取试剂盒 |
| BTN131071 | 蛋白质研究 | 牛血清γ球蛋白标准品(2mg/mL) |
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文献和实验洗脱液,接着按照3.2b进行)2a.加入2ulRNaseA(0.5mg/ml).加热至65°C摇晃4-5小时或者过夜以逆转交联。DNA采用PCR纯化试剂盒中厂家说明进行纯化。样品冻存于-20°C.样品之所以加入RnaseA是因为高浓度RNA会在使用PCR纯化试剂盒时干扰DNA的纯化。而纯化柱子的饱和度是既定的。2b.加入5ul蛋白酶K(20mg/ml).加热至65°C摇晃4-5小时或者过夜以逆转交联。采用酚/氯仿抽提的DNA使用乙醇沉淀于10ul的糖原(5mg/ml).中。100ul水重悬浮。样品
填补Qiagen空白的植物RNA提取试剂盒(包括多糖多酚困难样品)
、多酚、次级代谢产物丰富的情况下,TRIzol类方法无法防止多糖多酚对于RNA/DNA分相的干扰,要么残留大量DNA,要么残留大量多糖、多酚或者次级代谢产物,氧化破坏RNA,或者残留这些多糖多酚,色素代谢产物等抑制下游的反转录等反应。限于技术水平的限制,市面上绝大多数的国产厂家是使用TRIzol的方法进行改良,无论是不是加了离心柱。但是实践证明,改良不能从根本上解决问题。判断是否试剂盒使用这种改良的方法非常简单:是否裂解液含有苯酚的味道和使用氯仿,如果使用到了氯仿就是TRIzol方法的改良
下,trizol类方法无法防止多糖多酚对于RNA/DNA分相的干扰,要么残留大量DNA,要么残留大量多糖、多酚或者次级代谢产物,氧化破坏RNA,或者残留这些多糖多酚,色素代谢产物等抑制下游的反转录等反应。限于技术水平的限制,市面上绝大多数的国产厂家是使用trizol的方法进行改良,无论是不是加了离心柱。但是实践证明,改良不能从根本上解决问题。判断是否试剂盒使用这种改良的方法非常简单:是否裂解液含有苯酚的味道和使用氯仿,如果使用到了氯仿就是TRIzol方法的改良。 第二种试剂盒失败的原因:直接裂解过柱
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